一种次级淋巴趋化因子SLC的制备方法技术

本发明专利技术涉及医药生物工程技术领域，是人次级淋巴趋化因子ＳＬＣ的一种新的制备方法。本发明专利技术选用的表达系统为毕赤酵母表达系统，包括如下步骤：（１）合成正、反向引物，以人肺ｃＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增，构建ＳＬＣ重组表达质粒＃－［Ｐ］ＰＩＣ９Ｋ／ＳＬＣ；（２）将重组表达质粒＃－［Ｐ］ＰＩＣ９Ｋ／ＳＬＣ线性化处理后电穿孔转化毕赤酵母受体细胞ＧＳ１１５，得工程菌ＧＳ１１５／＃－［Ｐ］ＰＩＣ９Ｋ／ＳＬＣ；（３）将工程菌进行诱导培养表达ＳＬＣ，经纯化得人次级淋巴趋化因子ＳＬＣ。本发明专利技术制备方法简便，容易纯化，表达水平高，成本低廉。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药生物工程
，是人次级淋巴趋化因子SLC的一种新的制备方法。
技术介绍
趋化因子是由一类结构上相关、功能上不同的小分子细胞因子(8-12KDa)组成的家族。它们在多种组织细胞和白细胞内表达。趋化因子在机体生理和病理状况下，都起着重要的作用。在炎症、肿瘤、自身免疫病、血管生成、变态反应、干细胞的分化、次级淋巴器官的发育、AIDS等病毒感染中均有趋化因子及受体的参与。至今已发现近50种趋化因子。绝大多数趋化因子的一级结构中有4个保守的半胱氨酸，根据半胱氨酸的数目和相对位置，按系统命名法将趋化因子分为四大亚家族CXC趋化因子，其前两个半胱氨酸之间有一个其它的氨基酸相隔；CC趋化因子，前两个半胱氨酸相邻；C趋化因子，只有第二和第四位的两个半胱氨酸；CX3C趋化因子，前两个半胱氨酸被其它3个氨基酸隔开。有的亚家族若有多种趋化因子，则再根据被发现的先后进行编排。最近发现一种次级淋巴趋化因子SLC(Secondary Lymphiod tissure Chemokine)也称CCL21，其由111个氨基酸组成，氨基酸序列从N端至C端为SDGGAQDCCLKYSQRKIPAK本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种次级淋巴趋化因子ＳＬＣ的制备方法，包括构建ＳＬＣ重组表达质粒、构建表达ＳＬＣ的工程菌及工程菌表达ＳＬＣ产物的纯化，其特征在于ＳＬＣ的表达系统为毕赤酵母工程菌。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：武圣明，高卜渝，袁汉英，
申请(专利权)人：武圣明，高卜渝，袁汉英，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]