细胞核质转移受体蛋白13多克隆抗体制备方法技术

核质转移蛋白受体１３蛋白的表达、纯化及其抗体制备方法，涉及一种蛋白表达、纯化及抗体制备，尤其是涉及一种核质转移蛋白受体１３（ｉｍｐ　　１３）抗体的制备方法。提供一种以在生物体内合成的有生物活性的ｉｍｐ　　１３的全长蛋白做抗原制备核质转移受体蛋白１３抗体的方法。步骤为：将全长ｉｍｐｏｒｔｉｎ１３基因插入到表达质粒ｐＧＥＸ－４Ｔ－２，然后转化到大肠杆菌中，在ＢＬ２１中表达目的蛋白；经层析法纯化得到有生物活性的蛋白；用纯化后的蛋白做抗原去免疫兔子，得到了ｉｍｐ　　１３的抗体，用不完全福氏佐剂加强，测效价，取血，得到相应的抗血清。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种蛋白抗体的制备，尤其是涉及一种细胞核质转移受体蛋白13(importin13简称imp 13)的多克隆抗体的制备方法。
技术介绍
真核细胞中大分子(蛋白质和核酸)在细胞核与细胞质之间的转移，是细胞最重要的功能之一。现已发现，许多疾病的产生和发育的紊乱与细胞中蛋白质的正确定位有极大的关联。imp 13蛋白质是细胞核质转移蛋白受体家族(importinβsuperfamily)中的一个新成员(Mingot et al.，Importin 13a novel mediator of nuclear import and export，The EMBO Journal，2001，20(14)3685-3694)，它指导细胞内多个功能蛋白的入核及出核过程。它也是目前在importinβ家族中所发现的唯一受发育时期和激素调控的细胞核质受体蛋白(Zhang et al.，A Novel Karyopherin-βHomolog Is Developmentally and HormonallyRegulated in Fetal Lung，American Journal o本文档来自技高网...

【技术保护点】
细胞核质转移蛋白１３抗体制备方法，其特征在于其步骤为：１）将表达全长细胞核质转移受体蛋白１３蛋白质的重组表达质粒ｐＧＥＸ－４Ｔ－２－ｉｍｐ１３转化到大肠杆菌ＢＬ２１中；２）培养转化重组质粒的ＢＬ２１到ＯＤ值为０．５～１． ０；３）在培养的大肠杆菌ＢＬ２１中加入ＩＰＴＧ至０．１～０．５ｍＭ，诱导；４）将诱导后的菌体离心收集，用ＰＢＳ重悬，先加入ＤＴＴ至终浓度１～１０ｍＭ，后加溶菌酶溶菌，再超声波破碎，把破碎后的菌液离心，收集上清；５）将 上清与Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ的ｂｅａｄｓ混合，孵育...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陶涛，彭梓，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]