本发明专利技术涉及海藻养殖，具体地说是用配子体克隆法繁育能源海藻－巨藻孢子体的方法，将雌雄配子体按鲜重比１∶１的比例放入带有棕帘或尼龙帘的容器中，使其附着，静止培养，配子体繁育成孢子体；培养温度为１２－１８℃；光照强度１５００－３０００ｌｕｘ，光时为１２∶１２的循环光照，培养液组成为：天然海水经过滤煮沸消毒，加入营养盐，使其中的Ｎ为３－８ｍｇ／Ｌ，Ｐ为０．３－０．８ｍｇ／Ｌ，Ｆｅ↑［３＋］为０．５μｇ／Ｌ，ｐＨ值为７．５－８。本发明专利技术将巨藻雌雄配子体分别扩增，然后再使其发育成孢子体，减少了海上培养苗种的流程，大大缩短了孢子体的繁育周期，并降低了发生病害的几率，并可以降低育苗成本。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及海藻养殖，具体地说是，其先将配子体分别扩增，然后附着基质繁育能源海藻——巨藻孢子体的技术。
技术介绍
巨藻原产于北美洲大西洋沿岸，澳大利亚、新西兰、秘鲁、智利及南非沿岸都有分布。我国在1978年从墨西哥把巨藻引进。巨藻养殖已经在我国沿海地区获得成功。但是，由于育苗等的原因，目前我国的巨藻的养殖已基本上停滞。常规的巨藻的繁育的方法时间长，成本高，并且繁育过程中容易出现病害等现象，严重影响巨藻的繁育及新品种的推广。同时，为解决当前的能源危机也急需大力发展巨藻的繁育技术。因此，发展一种新型的繁育方法，缩短繁育周期，克服当前巨藻繁育的不足，是进一步发展巨藻养殖业所需解决的关键问题。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是解决当前巨藻常规繁育方法的不足，提供一种新型、快速的。为实现以上目的，本专利技术采用的技术方案为利用巨藻配子体进行繁育，包括配子体的培育、分别扩增、孢子体的繁育等，就是要通过人工控制光照、温度、培养液分别扩增巨藻雌雄配子体，再利用大量繁殖的配子体进行孢子体的繁育。可按如下过程操作巨藻孢子体的繁育将雌雄配子体按鲜重比1∶1的比例放入带有棕帘或尼龙帘的容器(如广口培养瓶)中，使其附着(配子体附着基质为棕帘或尼龙帘)，静止培养，两周后，约有85-90％的配子体繁育成孢子体；培养温度为12-18℃；光照强度1500-3000lux，光时为12:12的循环光照，培养液组成为天然海水经过滤(可采用沙滤器)煮沸消毒，加入营养盐，使其中的N为3-8mg/L，P为0.3-0.8mg/L，Fe3+为0.5μg/L，pH值为7.5-8。巨藻的种苗繁育可将其应用于能源、化工和医药等领域中。所述配子体按如下过程进行培养操作，1)初始培养起始培养时将巨藻配子体细胞粉碎(约200μm)(破碎后使其分散成3-5个细胞，最好为1-2个细胞)，每瓶有效水体为15-20L，以接种密度为0.3-0.6g/L接种进行通气悬浮培养；2)扩培培养25-35天后，以密度0.5-1.5g/L分瓶，每瓶有效水体为15-20L，进行通气悬浮培养；培养条件培养温度为18-20℃；光照强度1000-1500lux，光时为1O-12:10-12的循环光照；培养液组成天然海水经沙滤器过滤煮沸消毒，加入营养盐，使其中的N为.1-8mg/L、P为O.1-0.8mg/L、pH值为7.5-8。配子体的培养操作过程中每天24小时充气；每周换水1-2次。本专利技术具有如下优点1.孢子体的繁育周期短。应用本专利技术进行的巨藻繁育可将繁育期由5个月缩短为2个月，大大缩短了孢子体的繁育周期；可大大减少病害的发生；可在一年内进行多次育苗，提高繁育的效率；同时，巨藻的种苗繁育后可将其应用于能源、化工和医药领域中。2.成本低。本专利技术将巨藻雌雄配子体分别扩增，然后再使其发育成孢子体，减少了海上培养苗种的流程，大大缩短了孢子体的繁育周期，并降低了发生病害的几率，并可以降低育苗(巨藻的生产性繁育和遗传育种)成本；可以将巨藻的杂种优势成功的推广到生产中。3.本专利技术成功的进行了巨藻配子体的培养，进而就可对巨藻进行种质保藏、杂交和遗传学研究、细胞工程化育苗、发育生物学研究、转基因等的研究。附图说明图1为巨藻雌雄配子体照片，其中A为雄配子体，B为雌配子体；图2为巨藻孢子体照片，其中A巨藻孢子体幼体；B一个有多个孢子体的配子体。具体实施例方式实施例(一)巨藻配子体的培养1.初始培养起始培养时将巨藻配子体细胞粉碎(约200μm)(破碎后使其分散成3-5个细胞，最好为1-2个细胞)，每瓶有效水体为15L，以接种密度为0.5g/L接种进行培养；2.扩培培养1个月后，不粉碎，以密度1g/L分瓶，每瓶有效水体仍为15L，进行通气悬浮培养。培养条件与方法培养温度为18-20℃；光照强度1500-2000lux，光源为大功率(150W)荧光灯，通过光照距离调节光强，光时为12:12的循环光照；培养液组成天然海水经沙滤器过滤煮沸消毒，进入培养室预冷后加入营养盐，使其中的N为.1-8mg/L、P为O.1-0.8mg/L、pH值为7.5-8(本例培养液中KNO3.0.022g/L，KH2PO40.0013g/L，pH值为7.5-8；)；充气悬浮培养，供给气体经1％硫酸铜溶液过滤；每周换水2次，换水时提前1小时停止充气，待丝状体沉降瓶底，吸出上清夜，加入新鲜培养液。(二)孢子体的繁育繁育技术将雌雄配子体按鲜重比1∶1的比例放入带有尼龙帘的广口培养瓶中，使其附着于基质上，静止培养，两周后，约有85-90％的配子体繁育成孢子体。培养条件与方法培养温度为12-18℃；光照强度2000-3000lux，光源为大功率(150W)荧光灯，通过光照距离调节光强，光时为12:12的循环光照，培养液组成为天然海水经沙滤器过滤煮沸消毒，进入培养室预冷后加入营养盐使用，使其中的N为3-8mg/L，P为0.3-0.8mg/L，Fe3+为0.5μg/L，pH值为7.5-8(本例培养液中KNO30.043g/L，KH2PO40.0026g/L，柠檬酸铁3μg/L，pH值为7.5-8)；每周换水2次。权利要求1.，其特征在于将雌雄配子体按鲜重比1∶1的比例放入带有棕帘或尼龙帘的容器中，使其附着，静止培养，配子体繁育成孢子体；培养温度为12-18℃；光照强度1500-3000lux，光时为12:12的循环光照，培养液组成为天然海水经过滤煮沸消毒，加入营养盐，使其中的N为3-8mg/L，P为0.3-0.8mg/L，Fe3+为0.5μg/L，pH值为7.5-8。2.按照权利要求1所述，其特征在于所述配子体按如下过程进行培养操作，1)初始培养起始培养时将巨藻配子体细胞粉碎，每瓶有效水体为15-20L，以接种密度为0.3-0.6g/L接种进行通气悬浮培养；2)扩培培养25-35天后，以密度0.5-1.5g/L分瓶，每瓶有效水体为15-20L，进行通气悬浮培养；培养条件培养温度为18-20℃；光照强度1000-1500lux，光时为10-12:10-12的循环光照；培养液组成天然海水经沙滤器过滤煮沸消毒，加入营养盐，使其中的N为.1-8mg/L、P为0.1-0.08mg/L、pH值为7.5-8。3.按照权利要求2所述，其特征在于所述配子体的培养操作过程中每天24小时充气；每周换水1-2次。全文摘要本专利技术涉及海藻养殖，具体地说是，将雌雄配子体按鲜重比1∶1的比例放入带有棕帘或尼龙帘的容器中，使其附着，静止培养，配子体繁育成孢子体；培养温度为12－18℃；光照强度1500－3000lux，光时为12∶12的循环光照，培养液组成为天然海水经过滤煮沸消毒，加入营养盐，使其中的N为3－8mg/L，P为0.3－0.8mg/L，Fe文档编号A01G33/00GK1865433SQ20051004647公开日2006年11月22日 申请日期2005年5月20日 优先权日2005年5月20日专利技术者王广策, 李德茂, 彭光, 叶乃好 申请人:中国科学院海洋研究所本文档来自技高网...
【技术保护点】
用配子体克隆法繁育能源海藻－巨藻孢子体的方法，其特征在于：将雌雄配子体按鲜重比１∶１的比例放入带有棕帘或尼龙帘的容器中，使其附着，静止培养，配子体繁育成孢子体；培养温度为１２－１８℃；光照强度１５００－３０００ｌｕｘ，光时为１２∶１２的循环光照，培养液组成为：天然海水经过滤煮沸消毒，加入营养盐，使其中的Ｎ为３－８ｍｇ／Ｌ，Ｐ为０．３－０．８ｍｇ／Ｌ，Ｆｅ↑［３＋］为０．５μｇ／Ｌ，ｐＨ值为７．５－８。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王广策，李德茂，彭光，叶乃好，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]
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