一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法技术

本发明专利技术公开了一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，步骤如下：将预处理铁皮石斛蒴果切开，将种子均匀散布在萌发培养基上，在组培室内进行培养，获得原球茎；将原球茎转接至增殖培养基中培养，获得类原球茎；将类原球茎转接至分化培养基中培养，获得幼苗；将幼苗转接至含有育苗培养基的组培瓶中培养，获得壮苗；将含有壮苗的组培瓶送入炼苗房内，进行炼苗，获得炼后苗；将炼后苗从组培瓶中取出，采用清水洗除根部携带的培养基，即可获得组培苗。本发明专利技术公开的铁皮石斛组培苗培育方法，所培育的组培苗健壮，移栽成活率高，质量稳定，有利于促进铁皮石斛生产规模的扩大，具有广阔的市场前景。

Cultivation method of a high survival rate of Dendrobium officinale

The invention discloses a high survival rate of plantlets cultivation method comprises the following steps: pretreatment of Dendrobium candidum capsule incision, the seeds evenly spread in the germination medium, were cultured in tissue culture room, get protocorm; protocorm will transfer to the proliferation medium, obtain protocorm like bodies; the PLB switching to the differentiation medium, will transfer to obtain seedlings; seedling tissue culture medium containing bottle seedling culture, obtain seedling; tissue culture flask containing seedling seedling into the room, for the acclimatization, obtained after refining seedlings; smelting after seedlings from tissue culture bottle with water to wash out in addition to the root medium to carry, can obtain plantlets. The invention discloses a tissue culture seedling cultivation method for Dendrobium candidum, which is strong in tissue culture, high in survival rate and stable in quality, and is conducive to the expansion of the production scale of Dendrobium candidum, and has broad market prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法
本专利技术涉及石斛栽培
，具体是一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法。
技术介绍
作为中国著名传统药材，铁皮石斛具有滋阴养胃、润肺止咳、清热明目的功效，另外，还有增强人体免疫力，消除肿瘤，抑制癌症等作用。早在《本草纲目》铁皮石斛就被列为药用，在《神农本草经》中被列为上品，在《道藏》中和天山雪莲、三两重人参、花甲之茯从、百二十年首乌、深山灵芝、冬虫夏草等一起被列为“中华九大仙草”，铁皮石斛位于“九大仙草”之首。由于铁皮石斛非常名贵，近年来，铁皮石斛人工栽培产业在全国范围内发展比较迅速。然而，铁皮石斛对生长环境要求苛刻，成苗困难，采用传统的分株、扦插等人工繁殖方法进行繁殖，增殖速度非常低，同时，还存在组培苗质量难以保证等问题，极大地制约了富硒铁皮石斛生产规模的扩大。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，步骤如下：1）选取成熟未开裂的铁皮石斛蒴果，采用清水冲洗后，放入0.1%升汞溶液中浸泡3-4min，取出后，采用无菌水冲洗2-3次，然后放入预处理液中浸泡7-10min，取出后，采用无菌水冲洗4-5次，吸干表面水分，获得预处理铁皮石斛蒴果，所述预处理液由柠檬酸和酒精组成；2）将预处理铁皮石斛蒴果切开，将种子均匀散布在萌发培养基上，在组培室内进行培养，在温度为22-24℃、光照时间为8h/d、光照强度为1000-1200lux的条件下培养19-22天，获得原球茎；3）将原球茎转接至增殖培养基中，在温度为23-25℃、光照时间为8h/d、光照强度为2000-2500lux的条件下培养24-25天，获得类原球茎；4）将类原球茎转接至分化培养基中，在温度为23-25℃、光照时间为12h/d、光照强度为2000-2500lux的条件下培养26-28天，获得幼苗；5）将幼苗转接至含有育苗培养基的组培瓶中，在温度为23-25℃、光照时间为15h/d、光照强度为2800-3000lux的条件下培养80-90天，获得壮苗；6）将含有壮苗的组培瓶送入炼苗房内，进行12-15天的炼苗，获得炼后苗；7）将炼后苗从组培瓶中取出，采用清水洗除根部携带的培养基，即可获得组培苗。作为本专利技术进一步的方案：所述预处理液的制备方法为：取10g柠檬酸，投入至100mL的85%酒精中，搅拌混合均匀后，即可。作为本专利技术再进一步的方案：所述萌发培养基由1/2MS培养基和萌发促进液组成。作为本专利技术再进一步的方案：所述萌发培养基的制备方法如下：取野马追，清洗，烘干后，粉碎，投入至渗漉器中，采用12-15倍重量的70%酒精进行渗漉处理，获得渗漉提取液和渗漉残渣，将渗漉残渣加入4-5倍重量的70%酒精，然后超声波处理40-50min，过滤，获得超声波提取液和超声波提取残渣，将渗漉提取液和超声波提取液合并，加入总重量3%的壳寡糖，搅拌混合均匀后，蒸发浓缩为原体积的20%，即得萌发促进液，将萌发促进液按照30g/L的量加入至1/2MS培养基中，即可。作为本专利技术再进一步的方案：所述增殖培养基采用MS培养基并加入10g/L香蕉汁和2g/L乙二胺四乙酸二钠组成。作为本专利技术再进一步的方案：所述分化培养基采用MS培养基并加入15g/L山药汁和0.4g/L萘乙酸组成。作为本专利技术再进一步的方案：所述育苗培养基由MS培养基和育苗促进液组成。作为本专利技术再进一步的方案：所述育苗培养基的的制备方法如下：取乌蔹莓干草，清洗，烘干后，粉碎，投入至渗漉器中，采用10-12倍重量的70%酒精进行渗漉处理，获得渗漉提取液和渗漉残渣，将渗漉残渣加入6-8倍重量的70%酒精，然后超声波处理40-50min，过滤，获得超声波提取液和超声波提取残渣，将渗漉提取液和超声波提取液合并，加入总重量5%的壳寡糖，搅拌混合均匀后，蒸发浓缩为原体积的15%，即得育苗促进液，将育苗促进液按照20g/L的量加入至MS培养基中，即可。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术公开的铁皮石斛组培苗培育方法，所培育的组培苗健壮，移栽成活率高，质量稳定，有利于促进铁皮石斛生产规模的扩大，具有广阔的市场前景。本专利技术公开的铁皮石斛组培苗培育方法，采用组培技术进行繁殖，增殖效率非常高，能够实现富硒铁皮石斛的大规模生产，操作简单，易于推广。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术的技术方案作进一步详细地说明。实施例1一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，步骤如下：1）选取成熟未开裂的铁皮石斛蒴果，采用清水冲洗后，放入0.1%升汞溶液中浸泡3min，取出后，采用无菌水冲洗2次，然后放入预处理液中浸泡7min，取出后，采用无菌水冲洗4次，吸干表面水分，获得预处理铁皮石斛蒴果，所述预处理液由柠檬酸和酒精组成，所述预处理液的制备方法为：取10g柠檬酸，投入至100mL的85%酒精中，搅拌混合均匀后，即可；2）将预处理铁皮石斛蒴果切开，将种子均匀散布在萌发培养基上，在组培室内进行培养，在温度为22℃、光照时间为8h/d、光照强度为1000lux的条件下培养19天，获得原球茎，所述萌发培养基由1/2MS培养基和萌发促进液组成，所述萌发培养基的制备方法如下：取野马追，清洗，烘干后，粉碎，投入至渗漉器中，采用12倍重量的70%酒精进行渗漉处理，获得渗漉提取液和渗漉残渣，将渗漉残渣加入4倍重量的70%酒精，然后超声波处理40min，过滤，获得超声波提取液和超声波提取残渣，将渗漉提取液和超声波提取液合并，加入总重量3%的壳寡糖，搅拌混合均匀后，蒸发浓缩为原体积的20%，即得萌发促进液，将萌发促进液按照30g/L的量加入至1/2MS培养基中，即可；3）将原球茎转接至增殖培养基中，在温度为23℃、光照时间为8h/d、光照强度为2000lux的条件下培养24天，获得类原球茎，所述增殖培养基采用MS培养基并加入10g/L香蕉汁和2g/L乙二胺四乙酸二钠组成；4）将类原球茎转接至分化培养基中，在温度为23℃、光照时间为12h/d、光照强度为2000lux的条件下培养26天，获得幼苗，所述分化培养基采用MS培养基并加入15g/L山药汁和0.4g/L萘乙酸组成；5）将幼苗转接至含有育苗培养基的组培瓶中，在温度为23℃、光照时间为15h/d、光照强度为2800lux的条件下培养80天，获得壮苗，所述育苗培养基由MS培养基和育苗促进液组成，所述育苗培养基的的制备方法如下：取乌蔹莓干草，清洗，烘干后，粉碎，投入至渗漉器中，采用10倍重量的70%酒精进行渗漉处理，获得渗漉提取液和渗漉残渣，将渗漉残渣加入6倍重量的70%酒精，然后超声波处理40min，过滤，获得超声波提取液和超声波提取残渣，将渗漉提取液和超声波提取液合并，加入总重量5%的壳寡糖，搅拌混合均匀后，蒸发浓缩为原体积的15%，即得育苗促进液，将育苗促进液按照20g/L的量加入至MS培养基中，即可；6）将含有壮苗的组培瓶送入炼苗房内，进行12天的炼苗，获得炼后苗；7）将炼后苗从组培瓶中取出，采用清水洗除根部携带的培养基，即可获得组培苗。实施例2一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，步骤如下：1）选取成熟未开裂的铁皮石斛蒴果，采本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，其特征在于，步骤如下：1）选取成熟未开裂的铁皮石斛蒴果，采用清水冲洗后，放入0.1%升汞溶液中浸泡3‑4min，取出后，采用无菌水冲洗2‑3次，然后放入预处理液中浸泡7‑10min，取出后，采用无菌水冲洗4‑5次，吸干表面水分，获得预处理铁皮石斛蒴果，所述预处理液由柠檬酸和酒精组成；2）将预处理铁皮石斛蒴果切开，将种子均匀散布在萌发培养基上，在组培室内进行培养，在温度为22‑24℃、光照时间为8h/d、光照强度为1000‑1200lux的条件下培养19‑22天，获得原球茎；3）将原球茎转接至增殖培养基中，在温度为23‑25℃、光照时间为8h/d、光照强度为2000‑2500lux的条件下培养24‑25天，获得类原球茎；4）将类原球茎转接至分化培养基中，在温度为23‑25℃、光照时间为12h/d、光照强度为2000‑2500lux的条件下培养26‑28天，获得幼苗；5）将幼苗转接至含有育苗培养基的组培瓶中，在温度为23‑25℃、光照时间为15h/d、光照强度为2800‑3000lux的条件下培养80‑90天，获得壮苗；6）将含有壮苗的组培瓶送入炼苗房内，进行12‑15天的炼苗，获得炼后苗；7）将炼后苗从组培瓶中取出，采用清水洗除根部携带的培养基，即可获得组培苗。...

【技术特征摘要】
1.一种高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，其特征在于，步骤如下：1）选取成熟未开裂的铁皮石斛蒴果，采用清水冲洗后，放入0.1%升汞溶液中浸泡3-4min，取出后，采用无菌水冲洗2-3次，然后放入预处理液中浸泡7-10min，取出后，采用无菌水冲洗4-5次，吸干表面水分，获得预处理铁皮石斛蒴果，所述预处理液由柠檬酸和酒精组成；2）将预处理铁皮石斛蒴果切开，将种子均匀散布在萌发培养基上，在组培室内进行培养，在温度为22-24℃、光照时间为8h/d、光照强度为1000-1200lux的条件下培养19-22天，获得原球茎；3）将原球茎转接至增殖培养基中，在温度为23-25℃、光照时间为8h/d、光照强度为2000-2500lux的条件下培养24-25天，获得类原球茎；4）将类原球茎转接至分化培养基中，在温度为23-25℃、光照时间为12h/d、光照强度为2000-2500lux的条件下培养26-28天，获得幼苗；5）将幼苗转接至含有育苗培养基的组培瓶中，在温度为23-25℃、光照时间为15h/d、光照强度为2800-3000lux的条件下培养80-90天，获得壮苗；6）将含有壮苗的组培瓶送入炼苗房内，进行12-15天的炼苗，获得炼后苗；7）将炼后苗从组培瓶中取出，采用清水洗除根部携带的培养基，即可获得组培苗。2.根据权利要求1所述的高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，其特征在于，所述预处理液的制备方法为：取10g柠檬酸，投入至100mL的85%酒精中，搅拌混合均匀后，即可。3.根据权利要求1所述的高成活率的铁皮石斛组培苗培育方法，其特征在于，所述萌发培养基由1/2MS培养基和萌发促进液组成。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋剑春，
申请(专利权)人：江西宋氏灵斛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江西,36