一种分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术公开了一种分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置，含有一个带盖的外离心管和一个带盖的内离心管，两者套装在一起并存在配合间隙，所述内离心管的底部设置有仅能使卵泡液通过的筛孔，在外离心管和内离心管的管壁上分别设置有对应的连接孔，各连接孔贯穿插入连接别针。本实用新型专利技术设计科合理、操作简单、成本低、样品收集快捷准确，所获细胞样品通过基因表达分析检测，可确定单个卵泡内的激素代谢及关键调控基因的表达水平，从而为提高动物繁殖效率提供新的研究思路和新靶点。

A device for separating granulosa cells and follicular fluid in a single follicle of a human animal

【技术实现步骤摘要】
一种分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置
本技术属于细胞研究领域，涉及一种分离家畜，如猪、牛、羊等单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的简易装置。
技术介绍
卵泡是卵巢的基本功能单位，卵泡担任着卵巢的生殖与内分泌功能，它由卵母细胞与其周围的颗粒细胞构成。颗粒细胞对卵母细胞的生长发育起到支持和营养作用，它参与卵子的生长、发育和成熟等事件，且其生长分化也是卵泡启动生长及激素合成的关键执行者。卵泡发育是雌性动物繁殖性能的关键，因为它直接影响着排卵率、受胎率和产仔数等。雌性动物卵巢中有大量卵泡，根据卵泡发育过程的形态和功能变化，可分为原始卵泡、生长卵泡和成熟卵泡三个阶段；按质量可分为健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡。目前，研究不同发育阶段卵泡中颗粒细胞的功能作用，通常是将多个卵巢中分离出的卵泡置于带目镜测微尺的体式镜下进行直径的测量和观察，根据卵泡大小进行分组，然后混合样品进行后续试验分析。此操作虽然简单，但存在诸多不足，如不能精确地研究母猪同一卵巢中不同质量的单个卵泡中的颗粒细胞功能，难以分析单胎动物（牛和羊）排卵前后单个卵泡中的颗粒细胞的调控作用，且极易将卵泡膜细胞和颗粒细胞混为一起。
技术实现思路
本专利技术提供一种分离大动物，如猪、牛、羊等卵泡颗粒细胞和卵泡液的简易装置，本专利技术能够解决目前单个卵泡颗粒细胞和卵泡液收集过程中存在的难题。为解决上述技术问题，本专利技术采取以下技术方案：一种分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置，含有一个带盖的外离心管和一个带盖的内离心管，两者套装在一起并存在配合间隙，所述内离心管的底部设置有仅能使卵泡液通过的筛孔，在外离心管和内离心管的管壁上分别设置有对应的连接孔，各连接孔贯穿插入连接别针。在所述内离心管的外侧复合一层导向架，该导向架包括沿内离心管外侧壁表面倾斜走向的导向条，相邻的倾斜导向条的下端和上端依次对接在一起，位于内离心管壁上的连接孔位于倾斜导向条上端对接角部的下方。所述外离心管为直径1.5mL离心管，内离心管为直径200μL离心管。另外，还可以在外离心管位于连接孔的外侧套装有弹性膜，弹性膜密封于外离心管连接孔周边。有益效果：在使用过程中，内部小管通过不锈钢管别针固定于外部大管中间并悬浮其中，通过使用小镊子和眼科剪将已经分离好的卵泡在内部小管内撕破，经过离心分离后卵泡液会通过小管底部的筛孔汇集于外部大管底部，而卵泡壁组织不能经小管底部筛孔流出故停留在内部小管中，因此可有效分离卵泡壁组织和颗粒细胞。本技术设计科合理、操作简单、成本低、样品收集快捷准确，所获细胞样品通过基因表达分析检测，可确定单个卵泡内的激素代谢及关键调控基因的表达水平，从而为提高动物繁殖效率提供新的研究思路和新靶点。附图说明图1是本技术的剖面结构示意图；图2是图1的装配状态示意图之一；图3是图1的装配状态示意图之二。图中，标号1为1.5mL离心管，2为外盖，3为200μL离心管，4为内盖，5为下部筛孔，6为连接别针，7为外管连接孔，8为内管连接孔，9为导向架。具体实施方式实施例1：如图1和图2所示，一种分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置，它包括1.5mL离心管1，200μL离心管3，200μL离心管上部连接孔7，200μL离心管下部筛孔5，1.5mL离心管上部连接孔8。1.5mL离心管1与200μL离心管3套装在一起并存在配合间隙，连接别针6横向贯穿各连接孔。应用时，操作人员将1.5mL离心管1和200μL离心管2高压灭菌，再通过连接别针将1.5mL离心管1和200μL离心管2相连并固定；然后使用镊子或眼科剪刀将分离完整的单个卵泡放入200μL离心管2中并撕破，盖上1.5mL离心管1盖后即可离心进行分离，一般3000rpm×5min即可，分离完成后颗粒细胞及卵泡液汇集于1.5mL离心管1底部，而卵泡壁组织则停留在200μL离心管2内部，然后根据不同实验需求可再次细分，包括分离卵泡液、颗粒细胞和卵泡细胞等。本实施例上述结构，能够使200μL离心管2在1.5mL离心管1内部固定的同时，还具有沿连接别针6摆动的功能。从而在离心分离过程中，1.5mL离心管1沿圆周运动，而200μL离心管2以圆周运动叠加摆动的组合运动曲线。再配合离心速度变化后，200μL离心管2的运动轨迹更加复杂，但这种离心运动效果能够使贴合于200μL离心管2下部筛孔的颗粒细胞或卵泡细胞产生运动，防止颗粒细胞或卵泡细胞紧密贴合于筛孔而无法进一步分离的问题发生。实施例2：如图3所示，在实施例1基础上，又在所述内离心管的外侧复合一层导向架9。该导向架包括沿内离心管外侧壁表面倾斜走向的导向条，相邻的倾斜导向条的下端和上端依次对接在一起，位于内离心管壁上的连接孔位于倾斜导向条上端对接角部的下方。所述外离心管为直径1.5mL离心管，内离心管为直径200μL离心管。另外，还可以在外离心管位于连接孔的外侧套装有弹性膜，弹性膜密封于外离心管连接孔周边。本技术对于研究多胎动物—（猪）同一卵巢中不同质量的单个卵泡中颗粒细胞的形态变化、激素合成与代谢，以及单胎动物—（牛和羊）单个卵泡中颗粒细胞的作用及调控机理具有重要的实用价值和理论意义。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置，其特征是：含有一个带盖的外离心管和一个带盖的内离心管，两者套装在一起并存在配合间隙，所述内离心管的底部设置有仅能使卵泡液通过的筛孔，在外离心管和内离心管的管壁上分别设置有对应的连接孔，各连接孔贯穿插入连接别针。

【技术特征摘要】
1.一种分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置，其特征是：含有一个带盖的外离心管和一个带盖的内离心管，两者套装在一起并存在配合间隙，所述内离心管的底部设置有仅能使卵泡液通过的筛孔，在外离心管和内离心管的管壁上分别设置有对应的连接孔，各连接孔贯穿插入连接别针。2.根据权利要求1所述的分离大家畜单个卵泡内颗粒细胞和卵泡液的装置，其特征是：...

【专利技术属性】
技术研发人员：张家庆，邢宝松，白献晓，王献伟，高彬文，牛刚，王璟，陈俊峰，任巧玲，马强，
申请(专利权)人：河南省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：新型
国别省市：河南,41