人SP－A1在pichia pastoris中的表达制造技术

本发明专利技术公开了人ＳＰ－Ａｌ在Ｐｉｃｈｉａ　ｐａｓｔｏｒｉｓ中的表达，该方法将人ＳＰ－Ａｌ基因克隆至表达载体中，通过电击转化技术转入Ｐｉｃｈｉａ．ｐａｓｔｏｒｉｓ，并从转化菌株中筛选出多拷贝转化子，用高表达的甲醇氧化酶１基因（ＡＯＸｌ）启动子、利用甲醇作为唯一碳源诱导对重组Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ进行表达；在所述的诱导表达中，甲醇浓度为０．１～１．０％（ｇ／ｍｌ）。本发明专利技术能生产大量、高活性的人ＳＰ－Ａｌ，其最大表达量可达１５０ｍｇ／Ｌ，而且所表达的目的蛋白质能对巨噬细胞杀伤病原体发挥调理作用。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
人ＳＰ－Ａ１在Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ中的表达，其特征是：将人ＳＰ－Ａ１基因克隆至表达载体中，通过电击转化技术转入Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ，并从转化菌株中筛选出多拷贝转化子，用高表达的甲醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）启动子、利用甲醇作为唯一碳源诱导对重组Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ进行表达。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：封志纯，兰和魁，
申请(专利权)人：珠江医院，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]