基于脂肪组织样本，预测和/或诊断疾病的方法及方法套件技术

本发明专利技术是一种肥胖预测及从糖尿病、心血管疾病和代谢综合征群体中选定疾病的预测和/或诊断方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基于脂肪组织样本，预测和/或诊断疾病的方法及方法套件
本专利技术涉及一种肥胖预测的方法及从糖尿病、心血管疾病和代谢综合征群组中选取一种疾病的预测和/或诊断方法，它基于脂肪组织样本，将捐献者分入至少四个风险组。本专利技术还涉及一种方法套件及用于本专利技术方法完全合适的引物对。
技术介绍
超重与肥胖的蔓延成为全球性日益严重的健康问题。特别是肥胖和与肥胖相关的心血管疾病(CVD)增加了II型糖尿病和/或代谢综合征发展的风险。通过身体质量指数(BMI)来确定超重和肥胖，身体质量指数(BMI)描述了体重与身高之间的关系。BMI通过以下公式确定：BMI＝体重[kg]/身高2[m2]。根据WHO标准，正常BMI在18.5到24.9kg/m2之间，超重BMI超过25kg/m2，若BMI超过30kg/m2，则称之为肥胖。肥胖进一步细分等级：肥胖I级(BMI＝30-34.9)，肥胖II级(BMI＝35-39.9)，肥胖III级(BMI≥40)以及超级肥胖(BMI≥50)。但高BMI很少能说明真正的身体组织成分，它只是患与肥胖相关疾病可能性的一个粗略指标。最新研究显示，高BMI(BMI≥30kg/m2)的个体并不一定患心血管疾病和II型糖尿病(所谓的“新陈代谢健康肥胖症”)，BMI正常(18.5–24.9kg/m2)的个体虽然BMI较低，但是仍可能患上这种所谓的疾病。超重与肥胖产生的原因在于脂肪组织的生长，当通过食物摄入的能量长时间超过能量的消耗，则会引起超重与肥胖。在这种情况下，过剩的能量以甘油三酯的形式存储在脂肪组织中。身体中脂肪组织的增加会导致超重和肥胖，这不但基于脂肪细胞数量的增加(增生)而且取决于脂肪细胞体积的增加(肥大)。肥大被视为超重开始和未来有可能肥胖的最初特征。因为脂肪细胞增长数量有限，在高能量摄入的情况下，只有脂肪细胞再生，甘油三酯才能存储。但是不论是出现或形成超重还是脂肪组织的正常形成的情况下，脂肪细胞数量的增加可以被观察到。在脂肪形成过程中，与纤维母细胞相似的前脂肪细胞分化为脂质存储、胰岛素敏感的成熟脂肪细胞。此分化过程是非常动态的并且分成多个发展阶段，在各阶段中有不同的转录因子参与。脂肪形成的起始点是间充质干细胞(MSC)，它通过自我更新能够保持干细胞池的恒定，另一方面可以根据不同组织类型，根据相依的刺激来加以区分。Tang等人(TangW,ZeveD,SuhJM,BosnakovskiD,KybaM,HammerRE,TallquistMD,GraffJM(2008)Whitefatprogenitorcellsresideintheadiposevasculature.Science322:583-6)可以证明脂肪组织血管壁中祖细胞的存在。若MSN分化为确定性的前脂肪细胞，那么细胞分裂的阶段会到达某一点，即前脂肪细胞通过细胞接触抑制调节其生长，并被锁定在细胞周期之中。在荷尔蒙刺激之后，生长锁定的前脂肪细胞重新进入细胞周期，并进入一个增殖增强的阶段，这也被称为有丝分裂克隆扩张。在克隆扩张之后，前脂肪细胞进行新的细胞周期锁定和末端分化，以转录激活某些脂肪细胞特定基因为开始。转录因子的级联反应逐步激活，形成胰岛素敏感的成熟脂肪细胞。到目前为止，只有不准确和间接指标，比如腹部超重、高血压和高血糖等来评估风险，未来是否会患肥胖或者与肥胖相关的疾病：代谢综合征、脑血管疾病、II型糖尿病。可靠且有说服力预测这些疾病的指标并不存在。尽管超重是这些疾病产生非常重要的风险因素，但人们普遍认为，身体脂肪组织的分布和未成熟脂肪的累积是一个附加的、额外的因素。众所周知，在脂肪形成过程中机能不良会导致未成熟脂肪的累积，长期而言会形成糖尿病(II型糖尿病)和代谢综合征。时至今日，尚未有可靠的诊断方法来鉴定未成熟脂肪组织的分子水平。皮下脂肪组织(WAT)穿刺是一种简便、安全和侵入性小的获取脂肪组织的方法，但是抽取包含太少的细胞，无法确保能对这些细胞进行可靠的分子分析。特别是，皮下脂肪组织弱表达的基因并不能始终被可靠的检测到。以下将描述生物标记物及方法，能够鉴定带有未成熟脂肪组织的个体，特别是基于皮下脂肪组织样本中定量的基因表达。HMGA2蛋白在生长、增值和分化等诸多生物过程中起着重要的作用。重新排列的染色体区12q13～15与激活失去活性的HMGA2蛋白有关，能导致脂肪瘤、脂肪组织中的良性肿瘤。在正常细胞方面，研究已经证实了HMGA2在脂肪细胞生长发育过程中的重要影响。EP2682752A1显示，基于HMGA2的表达水平，可以对糖尿病进行预测和/或检测。本文献还指出，HMGA2的表达水平和PPAR-γ的表达水平是交互的。但申请人的研究表明，在此文献中公开的分类模式过于粗糙。
技术实现思路
因此这是本专利技术的任务，在已有技术的基础上，特别是EP2682752A1基础上，改进预测和/或诊断方法。通过预测糖尿病的方法和预测和/或诊断从糖尿病、心血管疾病和代谢综合征群体中选定的疾病，此任务已经解决。综合步骤如下：a)确定一份来自捐献者的脂肪组织样本，b)确定HMGA2和PPAR-γ基因的基因表达水平，在样本和c)根据样本中HMGA2和PPAR-γ基因的基因表达水平和体内脂肪百分比，特别是捐献者的BMI，将捐献者分类到某一组别，从组成的组别中选择，将捐献者的样本分成至少四个风险组别。a)提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR-γ的相对基因表达水平，较高体内脂肪比例，平均BMI≥25b)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR-γ的相对基因表达水平，较高体内脂肪比例，平均BMI≥25c)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR-γ的相对基因表达水平，并不高的体内脂肪比例，平均BMI<25d)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，提高PPAR-γ的相对基因表达水平，并不高的体内脂肪比例，平均BMI<25优先情况是使用的脂肪组织包括白色的脂肪组织，进一步优选的情况是使用的脂肪组织由白色脂肪组织构成。在本专利技术的方法中，根据基因表达图谱，确定未成熟脂肪组织的个体，也就是较低的PPAR-γ表达水平及较高的HMGA2表达水平，脂肪组织中未成熟的脂肪细胞的比例较高。相反的是较高的PPAR-γ表达水平及较低的HMGA2表达水平，脂肪组织中成熟脂肪细胞的比例较高。通过将这两种基因的基因表达结合起来,就可以描述个体脂肪组织的组成情况。根据这些数值的组合可以得出糖尿病致病的风险。令人惊讶的是，在此专利技术方法的基础上不仅只有两个风险群组，如从EP2682752A1中证实的，可以得出结论，而且至少4个风险群组：从所谓的公开文献中得出，HMGA2和PPAR-γ的表达水平处于显著的反比关系。这可以得出结论，标记物表达水平的测量能够得出可能的结果，也能从测量其他标记物的表达水平中得出。所以，出于经济原因，专业人员被阻止利用相应的方法同时测量这两个标记物。然而令人惊讶的是，在公开文献中断定的相关性与风险相关，能够引起所谓的疾病，其他表述：存在情况，两种标记物的表达水平并非反比关系。已有例证证明这一点。本文中“诊断”概念的意义是指预测临床状况或疾病出现和发展的较大可能性。本文中“确定”一种疾病的概念是指，一种已本文档来自技高网...

【技术保护点】
肥胖的诊断方法和/或从糖尿病、心血管疾病和代谢综合征群体中选定疾病的预测和/或诊断方法，总结步骤如下：a)确定一份来自捐献者的脂肪组织样本，b)确定HMGA2和PPAR‑γ基因的基因表达水平，在样本和c)根据样本中HMGA2和PPAR‑γ基因的基因表达水平和体内脂肪百分比，特别是捐献者的BMI，将捐献者分类到某一组别，从组成的组别中选择，将捐献者的样本分成至少四个风险组别。a)提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR‑γ的相对基因表达水平，较高体内脂肪比例，平均BMI≥25b)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR‑γ的相对基因表达水平，较高体内脂肪比例，平均BMI≥25c)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR‑γ的相对基因表达水平，并不高的体内脂肪比例，平均BMI<25d)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，提高PPAR‑γ的相对基因表达水平，并不高的体内脂肪比例，平均BMI<25。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.30 DE 102015208083.81.肥胖的诊断方法和/或从糖尿病、心血管疾病和代谢综合征群体中选定疾病的预测和/或诊断方法，总结步骤如下：a)确定一份来自捐献者的脂肪组织样本，b)确定HMGA2和PPAR-γ基因的基因表达水平，在样本和c)根据样本中HMGA2和PPAR-γ基因的基因表达水平和体内脂肪百分比，特别是捐献者的BMI，将捐献者分类到某一组别，从组成的组别中选择，将捐献者的样本分成至少四个风险组别。a)提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR-γ的相对基因表达水平，较高体内脂肪比例，平均BMI≥25b)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR-γ的相对基因表达水平，较高体内脂肪比例，平均BMI≥25c)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，并不提高PPAR-γ的相对基因表达水平，并不高的体内脂肪比例，平均BMI&lt;25d)并不提高HMGA2的相对基因表达水平，提高PPAR-γ的相对基因表达水平，并不高的体内脂肪比例，平均BMI&lt;...

【专利技术属性】
技术研发人员：黑尔格·威廉·蒂埃斯，马库斯·克勒姆克，
申请(专利权)人：利波日特标记公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE