一种检测中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E方法技术

本发明专利技术公开了一种检测中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E方法，属于材料与生物医学交叉领域。本发明专利技术采用荧光中空介孔二氧化硅FHMNs作为抗IgE抗体的载体，二氧化硅包覆四氧化三铁制备所得的Fe3O4@SiO2作为过敏原载体，两种材料同时捕获靶标中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E(IgE)，利用抗原抗体特异性反应富集和分离靶标sIgE，利用FHMNs中的荧光分子信号放大低浓度靶标sIgE的信号，将荧光强度与IgE浓度相关联，快速灵敏的检测人血中中华绒螯蟹的特异性IgE。本发明专利技术有效降低了IgE检测限，缩短了检测时间。

A specific immunoglobulin E method for the detection of Eriocheir sinensis

The invention discloses a method for detecting the specific immunoglobulin E of Eriocheir sinensis, which belongs to the cross field of material and biomedicine. The invention adopts fluorescent hollow mesoporous silica FHMNs as the carrier of anti IgE antibody, silica coated Fe3O4 prepared Fe3O4@SiO2 as allergen carrier, two kinds of materials at the same time to capture the target of Chinese mitten crab specific immunoglobulin E (IgE), the use of anti antibody specific reactions of preconcentration and separation of target sIgE, signal amplification low concentration of sIgE using fluorescence molecular target signal in FHMNs, the fluorescence intensity and the concentration of IgE associated with specific IgE of Chinese mitten crab, rapid and sensitive detection of human blood. The invention effectively reduces the detection limit of IgE and shortens the detection time.

【技术实现步骤摘要】
一种检测中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E方法
本专利技术涉及一种检测中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E方法，属于材料与生物医学交叉领域。
技术介绍
虾、蟹是我国水产品市场上最常见的甲壳类食品，属于高蛋白、高营养类食物。但同时也是八大类高致敏性食物之一，发生率为15.6％-35％，导致过敏性哮喘、过敏性休克等疾病的发生。目前，我国在过敏相关研究领域处于起步阶段，尚无虾、蟹类食物过敏症的相关诊断试剂。临床上使用的检测试剂主要依赖进口，如美国FDA认证的ImmunoCAPsystem自动检测系统，其公认的检测限为0.24ng/mL，且检测费用较昂贵，大多数过敏患者不能负担；临床上使用较广的ELISA检测试剂盒，其检测限较高，并不能准确鉴定是否为过敏患者。且目前过敏检测所用过敏原为生物材料粗提产物，粗提产物包含过敏原与非特异性过敏原以及目前尚未定性的疑似过敏原，对过敏检测结果存在干扰性，且其致敏效率无法达到标准化。同时，过敏性疾病的发生，与个体的遗传背景、患者的生活居住环境、变应原物种、过敏原接触史等因素密切相关。因此，很有必要使用纯化的甲壳类水产品中主要过敏原开发快速灵敏的检测方法。
技术实现思路
为解本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中华绒螯蟹特异性过敏检测方法，其特征在于，所述过敏检测方法包括以下步骤：(1)由内含荧光分子的中空介孔二氧化硅连接抗免疫球蛋白E抗体作为荧光探针；(2)由二氧化硅包覆四氧化三铁制备所得的Fe3O4@SiO2连接过敏原作为磁性探针；(3)将步骤(1)的荧光探针和步骤(2)的磁性探针同时加入含有中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E的离体血清中；(4)孵育，离心去上清，采用缓冲液冲洗后加入碱液，然后超声释放荧光分子，检测荧光强度；(5)构建中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E浓度与荧光强度的回归方程；(6)将待检测离体血清采用相同的方法检测荧光强度，带入步骤(5)中的回归方程，计算待检测离体血清中特异性免疫球蛋...

【技术特征摘要】
1.一种中华绒螯蟹特异性过敏检测方法，其特征在于，所述过敏检测方法包括以下步骤：(1)由内含荧光分子的中空介孔二氧化硅连接抗免疫球蛋白E抗体作为荧光探针；(2)由二氧化硅包覆四氧化三铁制备所得的Fe3O4@SiO2连接过敏原作为磁性探针；(3)将步骤(1)的荧光探针和步骤(2)的磁性探针同时加入含有中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E的离体血清中；(4)孵育，离心去上清，采用缓冲液冲洗后加入碱液，然后超声释放荧光分子，检测荧光强度；(5)构建中华绒螯蟹特异性免疫球蛋白E浓度与荧光强度的回归方程；(6)将待检测离体血清采用相同的方法检测荧光强度，带入步骤(5)中的回归方程，计算待检测离体血清中特异性免疫球蛋白E浓度。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述荧光探针为粒径为195-205nm，内径为120-130nm。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述磁性探针的粒径为100-120nm。4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述方法中离体血清溶液pH11，孵育时间为60min，孵育温度为37℃。5.根据权利要求1所述方...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴静，云建荣，姚瑞，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32