The invention relates to a affinity chromatography for separation and purification of glycoprotein, with porous ceramic microspheres as the core, in the pores of porous ceramic microspheres filled with agarose, chitosan, edtmps; the edtmps chelated calcium ion and manganese ion to form the core of the first bridge; the surface with allyl glycidyl ether, allyl glycidyl ether and three amino acid amino acid chelate bond, three calcium ions and manganese ions to form second foundation; the first bridge and second bridge supported by chelation of concanavalin A on the surface of the inner core in coagulation. The prepared affinity chromatography to separation and purification of alpha containing mannose or glucose alpha protein specificity, which adopts double bridge supported ligand A increases the stability of concanavalin A affinity chromatography medium, which has good mechanical properties and separation efficiency.
【技术实现步骤摘要】
一种用于糖蛋白分离纯化的亲和层析介质
本专利技术涉及一种层析介质，具体涉及一种用于糖蛋白分离纯化的亲和层析介质。
技术介绍
蛋白质的糖基化是天然蛋白质的最重要修饰之一，生物体中50％以上的蛋白质是糖基化的，糖蛋白参与了细胞免疫、信号传导、蛋白质的翻译调控、癌症等生理过程，在生命体中起着重要的作用，同时糖蛋白的独特免疫原性使其在抗肿瘤、抗艾滋病等方面具有显著效果。为了精确研究糖蛋白的分子结构、组成、物理化学性质，并应用其生物学功能，必须将目标糖蛋白纯化到足够程度并获得足够的量。分离纯化蛋白质的各种方法主要是利用蛋白质之间各种特性的差异，包括分子的大小和形状、酸碱性质、溶解度、吸附性质和对配体分子的特异生物学亲和性等。研究发现糖蛋白能够被凝集素识别，并且一种凝集素具有只对某一种特异性糖基专一性结合的能力。人们逐渐将凝集素发展成强有力的工具来纯化、分离、分析糖蛋白，并将其用于分析组织、细胞和蛋白质的糖结构。将凝集素作为特异性配基负载于介质表面制备亲和层析介质，是分离纯化糖蛋白的一种有效方式，但是基于亲和层析介质基质与凝集素的键合方式、基质的非特异性吸附、介质表面的电荷作...
【技术保护点】
一种用于糖蛋白分离纯化的亲和层析介质，其特征在于，以多孔陶瓷微球为内核，所述多孔陶瓷微球的孔道中填充有琼脂糖、壳寡糖、乙二胺四甲叉膦酸钠；所述乙二胺四甲叉膦酸钠螯合钙离子和锰离子形成第一桥基；所述内核表面连接烯丙基缩水甘油醚；所述烯丙基缩水甘油醚与氨基三乙酸键合；所述氨基三乙酸螯合钙离子和锰离子形成第二桥基；所述第一桥基和第二桥基通过螯合作用固载刀豆凝集素A于内核表面。
【技术特征摘要】
1.一种用于糖蛋白分离纯化的亲和层析介质，其特征在于，以多孔陶瓷微球为内核，所述多孔陶瓷微球的孔道中填充有琼脂糖、壳寡糖、乙二胺四甲叉膦酸钠；所述乙二胺四甲叉膦酸钠螯合钙离子和锰离子形成第一桥基；所述内核表面连接烯丙基缩水甘油醚；所述烯丙基缩水甘油醚与氨基三乙酸键合；所述氨基三乙酸螯合钙离子和锰离子形成第二桥基；所述第一桥基和第二桥基通过螯合作用固载刀豆凝集素A于内核表面。2.根据权利要求1所述的亲和层析介质，其特征在于，所述琼脂糖、壳寡糖、乙二胺四甲叉磷酸钠三组分的质量分数如下：琼脂糖70～76wt％；壳寡糖16～20wt％；乙二胺四甲叉磷酸钠8～...
【专利技术属性】
技术研发人员：瞿欢欢，朱至放，
申请(专利权)人：苏州博进生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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