诊断应激的药物和方法技术

本发明专利技术公开了定性或定量测定应激对免疫系统影响，因应激导致免疫系统失调而对发生疾病或病症易感性和监测动物对付应激的能力的分子和试验。本发明专利技术可用于检测对免疫调节治疗的应答，和监测在应激状态下对天然疾病的免疫应答。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】 专利
本专利技术总体上涉及测定免疫系统状态的方法和药物。更具体地说，本专利技术 涉及以下用途的分子和试验定量或定性测定应激对免疫系统的影响，因应激 导致免疫系统功能障碍而对疾病或病症易感，与监测动物对付应激的能力。本 专利技术可用于检测对免疫调节治疗的反应，监测在应激状态下对天然疾病的免疫 应答。在某些实施方案中，本专利技术可用于监测径赛动物的训练，检测衰老对应 激和外部应激反应能力的影响，能够对因受应激作用而处于患病危险或易于患 病动物作出更好治疗和处理决定。专利技术背景
技术实现思路
免疫系统有保护生物免遭外来侵袭和攻击的作用。哺乳动物的宿主免疫系 统按功能可分为适应性免疫和先天性免疫。先天免疫力往往是对外部攻击的第 一道防线，由天然屏障组成，例如角质表面、分泌物和化学物质，如皮肤、粘 膜、溶菌酶和急性期蛋白。大多数生物有先天免疫系统，它是非特异性的，作 为先天免疫系统一部分的许多防御分子在广泛物种之间进化上保守(例如，在 无脊椎动物进化早期己出现补体组分)。适应性免疫系统可产生特异性应答并"记住"感染或入侵因子从而使宿主 对以后的攻击产生回忆应答。适应性免疫系统按功能也可分为体液和细胞免 疫。体液免疫由可溶性因子组成，在哺乳动物中是抗体。高等生物的免疫系统细胞由淋巴(细胞)或骨髓(细胞)系组成。淋巴细胞在胸腺(T细胞)或骨髓(B细胞) 中分化。B细胞和T细胞形态学相同。骨髓细胞有吞噬细胞和其它细胞，例如 血小板和肥大细胞。吞噬细胞有单核细胞或多形核细胞。[免疫系统及其细胞和体液组分的概述见《基础免疫学》(Essential Immunology),第十版，Roitt 和Delves, Blackwell Publishing, 2001;《免疫生物学.健康人和病人的免 疫系统》(Immunobiology. The Immune system in Health and Disease), 第四 版，Janeway等，Garland Publishing, 1999〗。哺乳动物免疫系统的功能性研究已有大量文献，可采用许多试验来检测免 疫系统的功能。与细胞免疫系统相比，体液免疫系统更易于进行功能性测试。 例如，抗体与其靶分子特异性结合，可采用诸如抗体扩散与沉淀试验、酶联免 疫吸附测定来直接检测，或可用于抗原捕获试验来检测是否存在侵入性生物。细胞免疫系统的功能更难于检测，往往包括用染色剂或细胞表面蛋白质的 特异性抗体对细胞的不同亚群进行简单计数。例如，医学上最常见的血液检测 之一是检测红细胞、白细胞和血小板数目的全血计数(CBC)。区别性白细胞计 数采用瑞氏(Wright)染色来计数淋巴细胞、嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜 酸性粒细胞与单核细胞。细菌感染往往导致外周血液样品中嗜中性粒细胞数量 增加，寄生虫感染往往导致嗜酸性粒细胞数量增加。然而，对外周血液样品中 白细胞类型的计数往往不是免疫系统功能的良好指标，它是非特异性的(不能 确定感染或攻击的性质)，不能区分B和T细胞谱系的淋巴细胞。B淋巴细胞产生抗体，T淋巴细胞是免疫系统的主要调节(细胞)和效应(细 胞)。根据B和T细胞表面蛋白质的不同(标记)可区分它们的各种亚群。B细胞 在细胞表面表达免疫球蛋白(抗体)，T细胞根据它们的发育和功能阶段表达不 同标记。已开发了许多不同的试剂(往往是抗体)来区分人与实验动物的T和B 细胞不同亚群，许多试剂可购自例如Alexis Corporation(www.alexis-corp.com) 等公司。此外，B和T细胞(包括亚群)简单计数不能提供这些细胞功能的信息。 制备用于检测细胞表面标记的试剂是费力和高度专门化的工作。检测细胞免疫功能有更直接的方法，包括空斑形成、趋化、随机迁移、超 氧化物阴离子释放、测定用植物凝集素体外刺激后循环CD4+细胞中的ATP浓 度、耙细胞的荧光染料释放试验。但许多这些检验费力，需要预先制备细胞和 纯化方法(往往影响随后试验的结果)，并且只能检测细胞某一特定亚组的功能。总之，目前需要更有效地检测免疫系统功能，特别是细胞免疫系统功能的方法。 '竞赛动物不能将它们的健康状况告知它们的主人或训兽师。此外，人类运 动员往往不知晓自己的健康状况(因为高强度训练)或不能将这种情况有效地告 知教练或医师。因此，也需要更有效地监测细胞免疫系统(特别是竞赛动物)的 方法。自从首次发现应激(状态)可激活对身体有益或有害的生理应答几乎已有70年了(SeyleH.， 1936， Atowe， 138:32)。应激是导致机体或精神紧张的一种 物理、化学或情感因素，它可以是致病因素之一。Pedersen等(1994， /W" 5iwrtoM^/.， 15: 5116-5121)发表文章综述了对应激与疾病领域所进行的工作。近年来，免疫学领域的高速发展对社会心理学、营养学和生理因素诱导的 应激状态与免疫系统之间的相互作用产生了强烈兴趣。此工作的主要前提是应 激可通过产生免疫抑制作用而提高对疾病的易感性。这在与免疫学机制，例如 感染、恶性肿瘤和自身免疫疾病密切相关的疾病中尤其如此。证明应激可导致免疫力改变的研究包括许多模型，在这些模型中大多数类 型的实验性和天然产生的应激与免疫系统诸组分的改变相关联。美国国家宇航 局(NASA)进行了一些最早期的工作。NASA的研究显示在空间飞行急降落阶 段(splash-down phase)白细胞和T淋巴细胞升高。然而，在回到地球后的前3 天内促分裂原刺激的淋巴细胞增殖应答反应受损。在发射前，可能由于期待的 原因也观察到淋巴细胞对这种刺激的应答略微降低。应激与免疫功能的概述见 "应激、免疫力与疾病一综述"(Stress, Immunity and Illness—A Review), Dorian 和Garfmkel著，Psychological Medicine, 17:393-407， (1987)。也已知身体活动与锻炼可产生免疫系统的各种改变。剧烈锻炼的作用看来 可抑制免疫功能，损伤宿主对上呼吸道感染的防护能力。流行病学研究普遍显 示运动越剧烈对上呼吸道感染的危险越大。参见Heath等，1992， S; oW MW"'we， 14(6) 353-365。除了身体活动和锻炼之外，外部因素例如创伤(身体的)、主要生命活动、 身体健康状况和生活方式可导致应激状态。感知这些外部因素的作用方式与身 体调整方式可影响最终的生理应答。主要由交感神经系统和下丘脑、垂体、肾上腺轴(HPA轴)组成的始停静止(allostatic)系统应对机体对应激的反应 (McEwenB.， 1998， Wew Ewg/am/Jowma/o/Me^"'"e， 338:171-179)。术语"始停静止负荷"指启动复杂应答与停止此应答之间的平衡所致的生理应答量。不 断的应激、对应激不适应、不能关闭始停静止应答与某一系统中缺乏始停静止 应答导致另一系统应答增加可产生始停静止负荷。有强有力的证据表明始停静止负荷可导致对疾病的易感性、患病风险和发 病率增加。例如，应激诱导的血压升高可激发人心肌梗塞与灵长类动物动脉粥样硬化(Muller等，1989， C7簡/加.o"， 79:733-743， Kaplan等，1991 C〖腦/油本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定测试对象中对应激的生理学应答或相关疾病的存在或程度的方法，包括检测测试对象中至少一种选自以下的应激标记基因的异常表达：（ａ）其具有的多核苷酸表达产物含有与以下任一序列至少有５０％序列相同性的核苷酸序列的基因：ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１、３、４、５、７、９、１１、１３、１５、１６、１７、１９、２１、２３、２４、２５、２６、２８、２９、３０、３２、３３、３４、３５、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４４、４６、４８、５０、５１、５２、５４、５５、５６、５７、５９、６２、６３、６４、６６、６８、７０、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９０、９１、９２、９３、９５、９６、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０８、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１８、１１９、１２１、１２３、１２５、１２６、１２７、１２９、１３０、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４４、１４５、１４７、１４８、１５０、１５１、１５３、１５５、１５６、１５８、１６０、１６１、１６３、１６４、１６５、１６７、１６９、１７０、１７１、１７３、１７５、１７６、１７８、１８０、１８２、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、１９０、１９２、１９４、１９５、１９６、１９８、２００、２０２、２０４、２０６、２０８、２１０、２１２、２１４、２１６、２１８、２２０、２２２、２２４、２２６、２２８、２３０、２３２、２３３、２３４、２３６、２３８、２３９、２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、２４６或２４８，或其互补序列；（ｂ）其具有的多核苷酸表达产物含有编码包含以下任一氨基酸序列的多肽的核苷酸序列的基因：ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２、６、８、１０、１２、１４、１８、２０、２２、２７、３１、３６、４３、４５、４７、４９、５３、５８、６０、６１、６５、６７、６９、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９４、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１１０、１１２、１１４、１１６、１２０、１２２、１２４、１２８、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４６、１４９、１５２、１５４、１５７、１５９、１６２、１６６、１６８、１７２、１７４、１７７、１７９、１８１、１８３、１８９、１９１、１９３、１９７、１９９、２０１、２０３、２０５、２０７、２０９、２１１、２１３、２１５、２１７、２...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：RB布兰登，MR托马斯，
申请(专利权)人：阿什洛米克斯控股有限公司，
类型：发明
国别省市：AU[]