至纳米级鹿骨颗粒及其制备方法及其药物用途技术

本发明专利技术涉及一种至纳米级鹿骨颗粒及其制备方法及其药物用途，属于中药领域。至纳米级鹿骨颗粒的粒径小于100nm，其中硒元素的含量为48.87％，碳元素的含量为21.84％，氧元素的含量为15.85％，钙元素的含量为4.5％和磷元素的含量为4.41％。以梅花鹿鹿骨为原料，经粗粉碎至粒径0.25mm以下，在纳米研磨机、激光照射作用下，形成至纳米级颗粒。至纳米级鹿骨颗粒在制备改善骨质疏松、提高心脏抗氧化能力、保护心肌的药物中的应用。本发明专利技术能够预防及治疗由雌激素缺乏导致的骨质疏松，对心脏具有保护作用。

Nanoscale deer bone granules and their preparation methods and their drug use

The invention relates to a nanoscale deer bone particle, a preparation method and a drug use, which belongs to the field of traditional Chinese medicine. The particle size of deer bone particles to nanometer level is less than 100nm, the content of selenium is 48.87%, the content of carbon is 21.84%, the content of oxygen is 15.85%, the content of calcium is 4.5%, and the content of phosphorus is 4.41%. The sika deer bone was used as the raw material, and it was crushed to the particle size below 0.25mm. It was formed into nanoscale particles under the action of nano grinding machine and laser irradiation. The use of nanoscale deer bone granules in the preparation of drugs to improve osteoporosis, improve the antioxidant capacity of the heart and protect the myocardium. The invention can prevent and treat the osteoporosis caused by the lack of estrogen, and has a protective effect on the heart.

【技术实现步骤摘要】
至纳米级鹿骨颗粒及其制备方法及其药物用途
本专利技术属于中药领域，尤其是指至纳米级鹿骨颗粒及其制备方法及其药物用途。
技术介绍
骨质疏松症(Osteoporosis，OP)是一种骨密度降低、骨小梁密度减少、骨密质减少为特征，骨脆性增加而易于骨折的代谢性疾病。骨质疏松症是继高血压、冠心病后糖尿病后，引起学者们关注的中老年高发病之一。绝经后引起的骨质疏松症是原发性骨质疏松症的一种，以骨质改变为主，以股骨改变最为明显。绝经后雌激素水平逐渐降低，表现为高转换型骨质代谢改变，引起破骨、成骨趋于重新构建动态平衡，终而引起影像学上可见的骨密质减少、骨松质增多的骨组织微结构改变，以及骨密度的变化。鹿骨是常用的中草药之一，《唐本草》记载，鹿骨具有“主虚劳，可为酒；主风虚，补骨髓”等功效。鹿骨中含有大量蛋白质、骨胶原、磷脂质、软骨素和磷蛋白，有益于骨形成，促进体内胶原蛋白及弹性蛋白的更新，延缓骨吸收，促进软骨内骨化等过程。此外，鹿骨中亦含有大量矿物质，如钙、镁、铁、锌、钾、铜、磷、硒等，以维持血清中钙、磷、镁等离子的浓度和比例，为骨的再生提供一个适宜的微环境。
技术实现思路
本专利技术提供一种至纳米级鹿骨颗粒及其制备方法及其药物用途。本专利技术采取的技术方案是：至纳米级鹿骨颗粒的粒径小于100nm，其中硒元素的含量为48.87％，碳元素的含量为21.84％，氧元素的含量为15.85％，钙元素的含量为4.5％和磷元素的含量为4.41％。本专利技术至纳米级鹿骨颗粒的制备方法如下：以梅花鹿鹿骨为原料，经粗粉碎至粒径0.25mm以下，在纳米研磨机、激光照射作用下，形成至纳米级颗粒。本专利技术至纳米级鹿骨颗粒在制备改善骨质疏松的药物中的应用。本专利技术至纳米级鹿骨颗粒在制备提高心脏抗氧化能力的药物中的应用。本专利技术至纳米级鹿骨颗粒在制备保护心肌的药物中的应用。本专利技术至纳米级鹿骨颗粒，对Wistar大鼠行卵巢摘除术的骨质疏松模型的预防及治疗作用，首先我们采用卵巢摘除术建立大鼠骨质疏松模型，证明鹿骨粉低剂量组、中剂量组、高剂量组均能使骨密质和骨小梁增多、股骨各段骨密度(BMD)均增高，股骨骨松质减少，钙、镁离子浓度增高、磷离子浓度以及碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)含量降低，说明鹿骨粉能够预防及治疗由雌激素缺乏导致的骨质疏松。进一步的研究表明，鹿骨粉还能够促进去卵巢大鼠心肌细胞中Sirt-3、SOD-2、HO-1、NQO-1等抗氧化蛋白的表达，提高心脏的抗氧化能力。此外，我们还证明鹿骨粉能够促进卵巢摘除后心肌细胞中己糖激酶－2(HK－2)和丙酮酸脱氢酶复合体(PDHc)蛋白表达增高，维持心肌结构完整，对心脏具有保护作用。具体实施方式至纳米级鹿骨颗粒的粒径小于100nm，其中硒元素的含量为48.87％，碳元素的含量为21.84％，氧元素的含量为15.85％，钙元素的含量为4.5％和磷元素的含量为4.41％。本专利技术至纳米级鹿骨颗粒的制备方法如下：以梅花鹿鹿骨为原料，经粗粉碎至粒径0.25mm以下，在纳米研磨机、激光照射作用下，形成至纳米级颗粒。下边通过药效学实验来进一步说明本专利技术。实验例1至纳米级鹿骨颗粒骨质疏松的影响(一)材料与方法1.实验材料1.1实验仪器1.2实验试剂2.实验动物雌性Wistar大鼠110只，体重180-220g，由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供，合格证编号SCXK-(吉)2008-0005。大鼠饲养在标准实验动物室，食物和水随意喂养，饲养室温度控制在25±1.4℃，光线控制模拟12小时白天、12小时黑夜的昼夜交替。Wistar大鼠行双侧卵巢摘除术，采用X线摄片确认发生OP之后，将模型大鼠随机分为假手术组、模型组、鹿骨粉200mg/kg组(鹿骨粉低剂量组)、鹿骨粉400mg/kg组(鹿骨粉中剂量组)、鹿骨粉800mg/kg组(鹿骨粉高剂量组)、葡萄糖酸钙(160mg/kg)组(葡萄糖酸钙组)。3.卵巢摘除模型的建立给予10％水合氯醛麻醉剂3mL/kg腹腔内注射麻醉大鼠后，手术台仰卧保定，确实固定四肢及头部，术部在腹底壁脐后正中线上；在脐与耻骨前缘中点向后沿腹底壁正中线切开皮肤2-3cm。皱襞切开腹白线及腹膜，打开腹腔；用2把镊子在切口下方找到子宫体及一侧子宫角，沿子宫角向前导出卵巢，用4号丝线结扎卵巢系膜血管后摘除卵巢；同法摘除另侧卵巢；将子宫复位后关腹。术后肌注青霉素40万U/只。4.大鼠股骨X线正位片及骨密度的测量给予10％水合氯醛麻醉剂3mL/kg腹腔注射麻醉，放置于多功能小动物活体成像系统(KODAKin-VivoImagingSystemFX)进行X射线成像，并应用小动物软件进行股骨扫描，测定骨密度值(mg/cm2)。5.血清Ca2+，Mg2+，P3+，碱性磷酸酶(ALP)，抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的测量末次给药结束后，腹主动脉采血分离血清，利用自动生化分析仪测定Ca2+，Mg2+，P3+浓度，试剂盒测定ALP(E02S0131，RatSynuclein,AlphaELISA，上海蓝基)，TRACP浓度(E02T0538，RatTartrateresistantacidphosphatase5bELISA，上海蓝基)。6.统计学分析采用SPSS17.0软件对数据进行分析。所有数据是用Mean±SD表示。对多个样本进行单因素方差分析(ANOVA)和Student’sttest进行组间比较。P<0.05认为有统计学意义。(二)实验结果1.卵巢摘除对大鼠股骨骨密度的影响及X线的改变Wistar大鼠在卵巢摘除后，X线检测股骨逐渐呈现骨小梁减少，骨松质增多，骨密质减少，且在4个月时这种骨质疏松症的改变最明显。同时，骨密度也随着卵巢摘除逐渐降低，股骨近端、中段和远端的骨密度在卵巢摘除后2个月均呈现降低趋势，在4个月时降低的最明显。结果见表2。表1.双侧卵巢摘除后大鼠股骨各段的骨密度的改变(mg/cm2)2鹿骨粉对卵巢摘除大鼠所致股骨骨密度的影响以及X线的改变在卵巢摘除后4个月，大鼠股骨表现出骨密质、骨小梁减少，骨松质增多，股骨近段、中段、远端的骨密度均减低的显示，提示了卵巢摘除大鼠而致的骨质疏松症发生。在卵巢摘除后即刻给予鹿骨粉和葡萄糖酸钙治疗4个月后，X线结果显示，正位摄片呈现了与空白对照组相似的骨结构。与模型组比较，4个治疗组中股骨的骨密质和骨小梁有所增加，骨松质减少，骨密度均呈现了增高的趋势。明显的是，随着鹿骨粉给药剂量的增加，骨密度增高的更加明显，X线结果亦是如此。表2.鹿骨粉对双侧卵巢摘除后大鼠股骨各段骨密度的影响(mg/cm2)3、鹿骨粉对卵巢摘除大鼠血清Ca2+、Mg2+、P3+及ALP、TRACP浓度的影响卵巢摘除后4个月，于腹主动脉采取动脉血进行生化检验，结果显示Ca2+、Mg2+浓度均有所降低，而P3+浓度增高。试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)浓度，也呈现出不同程度的增高。在卵巢摘除后即刻给予鹿骨粉和葡萄糖酸钙治疗4个月后，Ca2+、Mg2+浓度增高，P3+、ALP和TRACP浓度降低，并且这种改变随着鹿骨粉给药剂量不同表现出剂量依赖性的变化。表3鹿骨粉对卵巢摘除大鼠血清钙、镁、磷离子的影响表4鹿骨粉对卵巢摘除大鼠血清ALP、TRAC本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种至纳米级鹿骨颗粒，其特征在于：至纳米级鹿骨颗粒的粒径小于100nm，其中硒元素的含量为48.87％，碳元素的含量为21.84％，氧元素的含量为15.85％，钙元素的含量为4.5％和磷元素的含量为4.41％。

【技术特征摘要】
1.一种至纳米级鹿骨颗粒，其特征在于：至纳米级鹿骨颗粒的粒径小于100nm，其中硒元素的含量为48.87％，碳元素的含量为21.84％，氧元素的含量为15.85％，钙元素的含量为4.5％和磷元素的含量为4.41％。2.如权利要求1所述的至纳米级鹿骨颗粒的制备方法，其特征在于包...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙连坤，康劲松，苏静，张勇，刘亚男，姜现瑞，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22