The invention discloses a method for identification of disease resistance gene in pepper, which comprises the following steps: S1: screening and breeding of pepper varieties tested on disease; S2: with fluorescence labeled toxin vaccine preparation; S3: take the pepper seedling leaves, using the vaccine with fluorescent labeled toxin of whole leaf in vitro inoculation; S4 after inoculation with fluorescence labeling of toxin in different varieties of pepper leaf extract DNA and sequenced, and the relationship between the establishment of Phytophthora Blight toxin fluorescence marker identification and Phytophthora Blight gene fragment by correlation analysis method, DNA Duan Jiancheng will pepper phytophthora blight gene database; S5: the test sequence and the chili pepper DNA the resistance gene database Blast comparison analysis, that can be seized pepper varieties whether it contains anti disease genes that are resistant to Phytophthora Blight resistance. The identification method of pepper epidemic resistance gene is accurate, reliable, intuitive and easy to operate. The identification time is short, manpower and material consumption are few, and the environment is eco-friendly.
【技术实现步骤摘要】
一种辣椒抗病基因鉴定方法
本专利技术涉及植物分子生物学
，具体涉及一种辣椒抗疫病基因鉴定方法。
技术介绍
辣椒疫病在我国于20世纪50年代发现以来，已在全国各省普遍发生危害，使辣椒产量和品质降低，严重时导致植株死亡绝产。而防御辣椒疫病最根本的办法是培育出抗疫病辣椒品种，在育种和生产过程中，最常见的鉴定辣椒抗疫病性能的方法是对田间种植辣椒进行模拟疫菌毒素的接种试验，观察被检测辣椒的发病或抗病情况，但这种传统田间鉴定方法耗费时间较长，而且受田间土壤、气候环境因素和人为经验影响较大，鉴定结果容易出现随机性，导致准确率不高。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺陷或不足，创建一种辣椒抗疫病基因鉴定新方法。一种辣椒抗疫病基因鉴定方法，包括以下步骤：S1：供试抗疫病辣椒品种和幼苗的准备。搜集不同产地抗疫病共20个品种的辣椒种子，选取每种辣椒种子100粒，然后播种于温室盘钵中进行育苗（20～30℃），待生长至3～4片幼叶时，将其移栽至营养盆中继续进行培养，待再生长至7～8片叶片时即获得辣椒壮苗材料；S2：供试疫病菌株的收集和荧光素标记毒素的制备。辣椒疫病...
【技术保护点】
一种辣椒抗疫病基因鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：供试抗疫病辣椒品种和幼苗的准备，搜集来源于不同产地抗疫病的20个辣椒品种种子，每品种取辣椒种子100粒，将其播种于育苗钵基质中，然后放置于温室中进行育苗（20～30℃），待生长至3～4片幼叶时，将其移栽至营养盆中继续进行培养，待再生长至7～8片叶时即获得辣椒壮苗材料；S2：供试疫病菌株的收集和荧光素标记毒素的制备，辣椒疫病菌株由淮安市农科院辣椒课题组馈赠，将荧光素与所述疫病菌株在培养皿中共浸染40min，然后于25℃光照培养5～6 d后即获得含有荧光标记毒素作接种用的疫病菌株；S3：用带荧光标记毒素的疫菌离体接种辣...
【技术特征摘要】
1.一种辣椒抗疫病基因鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：供试抗疫病辣椒品种和幼苗的准备，搜集来源于不同产地抗疫病的20个辣椒品种种子，每品种取辣椒种子100粒，将其播种于育苗钵基质中，然后放置于温室中进行育苗（20～30℃），待生长至3～4片幼叶时，将其移栽至营养盆中继续进行培养，待再生长至7～8片叶时即获得辣椒壮苗材料；S2：供试疫病菌株的收集和荧光素标记毒素的制备，辣椒疫病菌株由淮安市农科院辣椒课题组馈赠，将荧光素与所述疫病菌株在培养皿中共浸染40min，然后于25℃光照培养5～6d后即获得含有荧光标记毒素作接种用的疫病菌株；S3：用带荧光标记毒素的疫菌离体接种辣椒叶片，从培育的20个品种辣椒幼苗中，每个品种选取10株壮苗，取叶片，采用离体叶片全叶接种法接种含有荧光标记毒素的疫菌（浸菌处理24h），PBS漂洗残留菌液，然后将接种后的辣椒叶片在培养基上培养10d，每品种幼苗设置3个重复实验组；S4：辣椒抗疫病基因数据库的构建，取上述离体接种并培养10d后的每个供试辣椒品种幼叶，用试剂盒提取辣椒叶片DNA，琼脂糖凝胶电泳进行质量检测，然后委托有关公司进行DNA测序，同时根据上述辣椒品种在荧光显微镜下抗疫菌毒素荧光标记与辣椒抗疫病表现型鉴定结果，通过表型与基因关联分析法确立辣椒抗疫病毒素荧光标记鉴定与辣椒抗疫病基因之间对应关系，将荧光显示抗疫病辣椒品种中所获得的抗疫病相关基因片段登记入Genbank数据库上，从而建成辣椒抗疫病基因数据库；S5：待检辣椒抗疫病基因的鉴定，提取待检测辣椒植株叶片DNA并委托公司进行测序，然后与S4步骤中建立的辣椒抗疫病基因...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋虎卫，罗德旭，王新风，胡卫成，沈婷，强倩，
申请(专利权)人：淮阴师范学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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