微生物和其用于生产二酸的用途制造技术

本发明专利技术涉及过表达至少以下基因的酵母菌株用于发酵基生产二羧酸的用途：ALK3基因，ADH2和ADH5基因中的至少一个和FALDH3和FALDH4基因中的至少一个，或FAO1基因。

The use of microbes and its use in the production of diacid

The invention relates to a yeast strain over expressing at least the following genes, which is used for the production of two carboxylic acid by fermentation base: at least one ALK3 gene, ADH2 and ADH5 genes, at least one of FALDH3 and FALDH4 genes, or FAO1 gene.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】微生物和其用于生产二酸的用途
本专利技术涉及微生物及其用于生产二羧酸的用途。
技术介绍
二羧酸(也称为“二酸”)用作为原料，例如作为在聚酰胺和聚酯、润滑油、增塑剂或香料合成中的原料。生产二酰胺的方法根据所讨论的二酸碳骨架的碳原子数而变化。例如，壬二酸(C9二酸)通常是通过油酸与臭氧的化学氧化获得的，而癸二酸(C10二酸)是通过蓖麻醇酸的碱性氧化生产的。十二烷二酸(C12二酸)是石油化学的产物。微生物途径用于从十三烷生产芸苔酸(C13二酸)。鉴于在各种应用中使用的二酸的多样性，期望适用于最广泛的二酸的生产途径的优点。虽然其反应速度比化学途径慢，但生物学途径具有适用于各种底物的优点。虽然许多野生型微生物物种诸如新型隐球菌(Cryptococcusneoformans)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、阴沟肠假丝酵母(Candidacloacae)等能够生物合成二酸，但其生产水平仍然相对较低。因此，为了获得二酸的大量排泄，应该使用在β-氧化水平被阻断的突变体。已经开发了使用定点突变技术的另一个更严格的技术，用于热带假丝酵母(Candidatropicalis)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
不能降解脂肪酸的酵母菌株的用途，特别是解脂耶氏酵母菌株，其至少过表达以下基因：‑ALK3基因，其编码细胞色素P450单加氧酶，‑ADH2和ADH5基因中的至少一个，每个编码醇脱氢酶，和‑FALDH3和FALDH4基因中的至少一个，每个编码脂肪醛脱氢酶，或FAO1基因，其编码脂肪醇氧化酶，用于从脂肪酸，特别是衍生自植物油的脂肪酸中发酵基制备至少一种二羧酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.27 EP 15305452.31.不能降解脂肪酸的酵母菌株的用途，特别是解脂耶氏酵母菌株，其至少过表达以下基因：-ALK3基因，其编码细胞色素P450单加氧酶，-ADH2和ADH5基因中的至少一个，每个编码醇脱氢酶，和-FALDH3和FALDH4基因中的至少一个，每个编码脂肪醛脱氢酶，或FAO1基因，其编码脂肪醇氧化酶，用于从脂肪酸，特别是衍生自植物油的脂肪酸中发酵基制备至少一种二羧酸。2.如权利要求1所述的用途，其中所述酵母菌株也过表达编码NADPH-细胞色素还原酶的CPR1基因。3.如权利要求1或权利要求2所述的用途，其中所述酵母对于编码酰基辅酶A氧化酶同工酶POX1，POX2，POX3，POX4，POX5和POX6的基因也进行破坏。4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中所述酵母对于DGA1，DGA2和/或LRO1基因也进行破坏。5.一种生产至少一种二羧酸的方法，包括以下步骤：a)生长阶段，其中放置培养不能降解脂肪酸的酵母菌株，其至少过表达以下基因：-ALK3基因，其编码细胞色素P450单加氧酶，-ADH2和ADH5基因中的至少一个，每个编码醇脱氢酶，和-FALDH3或FALDH4基因中的至少一个，其编码脂肪醛脱氢酶，或FAO1基因，其编码脂肪醇氧化酶在基本上由包含至少一种碳源和一种氮源的能量底物组成的培养基中，b)生物转化期，其中所述酵母菌株与至少一种脂肪酸或烃接触，优选在能量底物存在下。6.如权利要求5所述的方法，还包括回收所形成的所述至少一种二羧酸的步骤。7.根据权利要求5或6所述的方法，其中所述脂肪酸为混合物的形式，特别是植物油或烷烃混合物形式，特别是油选自菜籽油，油酸菜籽油，向日葵油，油酸向日葵油，椰子油，棕榈油，棕榈仁油，橄榄油，花生油，大豆油，玉米油，芥子油，蓖麻油，棕榈油精，棕榈硬脂精，红花油，芝麻油，亚麻子油，榛子油，葡萄籽油，大麻油，或其提取物的副产物，或鱼油，或来自自酵母、细菌或微藻的油。8.根据权利要求5至7中任一项所述的方法，其中所述酵母对于编码酰基辅酶A氧化酶同工酶POX1，POX2，POX3，POX4，POX5和POX6的基因也进行破坏。9.根据权利要求5至8中任一项所述的方法，其中所述至少一种脂肪酸是脂肪酸的混合物，所述混合物按重量计，相对于混合物的总重量，油酸的含量超过30％。10.一种组合物，其包含可以通过权利要求6至9中任一项所述的方法可获得的二羧酸的混合物。11.一种组合物，包含：-第一核酸分子，其对应于ALK3基因，编码细胞色素P450单加氧酶-至少一种第二核酸分子，其对应于ADH2和ADH5基因中的至少一个，每个编码醇脱氢酶，和-至少一种第三核酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗朗斯·塞维尼奥，让马克·尼高，文森特·索弗普，希伯·甘博亚梅伦德斯，尼古拉·莫兰，
申请(专利权)人：油料作物与高蛋白作物领域发展基金会，国家农业研究院，
类型：发明
国别省市：法国,FR