The present invention relates to pharmaceutical analysis field, in particular to a method for rapid determination of drug resistant Candida albicans, comprises the following steps: the collection of dynamic surface enhanced Raman spectroscopy; step two: spectral preprocessing; step three: according to the characteristic peak and the peak of the peak intensity ratio range to determine the sensitivity of unknown white candida. The invention has the advantages of simple steps, the technical scheme of the invention without damage to the samples and shorter time; high sensitivity, with conventional Raman spectroscopy even compared to traditional surface enhanced Raman spectroscopy can detect analytes with lower content; discriminant is simple and more suitable for clinical first-line.
【技术实现步骤摘要】
一种快速判定耐药型白色念珠菌的方法
本专利技术涉及医药分析
,具体地说,是一种快速判定耐药型白色念珠菌的方法。
技术介绍
近年来,抗真菌药物的大量滥用导致了越来越严重的真菌耐药性。白色念珠菌,作为最常见的真菌,其产生的耐药型菌株引起的感染直接威胁着患者的生命。因此,亟需一种快速判定耐药型白色念珠菌的方法。传统的细胞生物学方法包括酶联免疫组化,聚合酶链式反应等,这些方法需要复杂的样品前处理,如需将细胞破坏,提取其中的蛋白或核酸序列进行分析。而相对简单的药敏试验法虽然无需破坏细胞,但经16h传代后继续与药物培养24h甚至48h显得耗时较长。综上,这些方法无法快速又简单地对耐药型白色念珠菌进行判定。拉曼光谱法由于具备几乎无样品处理(无需破坏细胞)、快速检测(几分钟)的特点,最近几年常常被用于微生物的鉴别与区分。但由于拉曼信号的微弱,导致该方法的区分准确度不够。若要增强信号需要耗费较大用量的样品。而表面增强拉曼光谱(SERS)技术因其较高的检测灵敏度(相对于常规的拉曼光谱,SERS信号可以增加好几个数量级,因此仅需要较少的细胞用量),可以克服这一缺陷。同时光谱信号得 ...
【技术保护点】
一种快速判定耐药型白色念珠菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:动态表面增强拉曼光谱的采集将待测白色念珠菌与等体积的表面增强试剂混合,取混合液滴于硅片上;采用拉曼光谱仪,对硅片上的液滴进行连续的拉曼光谱采集,直到液滴由湿态挥发至干态,得到一系列一维动态表面增强拉曼光谱图;步骤二:光谱的预处理对步骤一获取的光谱图进行预处理,预处理包括选取600~1800cm
【技术特征摘要】
1.一种快速判定耐药型白色念珠菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:动态表面增强拉曼光谱的采集将待测白色念珠菌与等体积的表面增强试剂混合,取混合液滴于硅片上;采用拉曼光谱仪,对硅片上的液滴进行连续的拉曼光谱采集,直到液滴由湿态挥发至干态,得到一系列一维动态表面增强拉曼光谱图;步骤二:光谱的预处理对步骤一获取的光谱图进行预处理,预处理包括选取600~1800cm-1光谱范围,在选取范围内对光谱进行airPLS法基线校正,Whittaker-Smooth法平滑;选取预处理后待测白色念珠菌连续采集得到的最大强度的光谱进行后续的判别,最大强度以最高峰656cm-1为标准;步骤三:根据特征峰与最高峰的峰强比范围来判定未知敏感度的白色念珠菌通过以下3个特征峰,分别为724cm-1、1094cm-1、1465cm-1与最高峰656cm-1的比值及相应的判别标准,鉴定待测白色念珠菌为敏感型还是耐...
【专利技术属性】
技术研发人员:陆峰,李皓,柳艳,崔晓林,范加腾,陈秀娟,柴逸峰,
申请(专利权)人:中国人民解放军第二军医大学,
类型:发明
国别省市:上海,31
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