一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液及感受态细胞和冻存悬液的制备方法技术

本发明专利技术涉及细菌冻存转化技术领域，具体为一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液及感受态细胞和冻存悬液的制备方法。本发明专利技术通过将芽孢杆菌目的菌株感受态细胞保存在特定的冻存液中制成冻存悬液，能够实现感受态细胞在低温环境中长期保存，感受态细胞的活力可以维持高达180天，冻存后感受态细胞的转化效率最高可达1800cfu/μg，达到常规分子生物学转化效率的需求，实现随取随用，改变了现有技术有关短芽孢杆菌和芽孢杆菌化学转化感受态细胞不能冻存的现状。应用本发明专利技术方法可将现有的感受态制备和转化技术需连续操作48h以上缩短至每次操作仅需不到16h，极大的提高了工作便利性及工作效率。

【技术实现步骤摘要】
一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液及感受态细胞和冻存悬液的制备方法
本专利技术涉及生物工程和生物
，尤其涉及一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液及感受态细胞和冻存悬液的制备方法。
技术介绍
随着现代生物学技术的发展，我们已经可以通过发酵得到丰富多样的产品，如益生菌、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、青霉素、卡那霉素等，极大改善了我们的生活。发酵技术除了需要特定的发酵生产工艺外，还需要特定的生产菌株。通过基因工程改造菌株，可以快速高效地获得拥有独特性质的菌株。细菌转化方法是指将外源DNA导入到目标菌株，使其遗传性状发生改变的方法。细菌转化是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。通过细菌转化方法，可快速改变菌株性质，分泌外源基因编码的目标蛋白，是构建工程菌的技术基础。细菌转化方法最常用的工程菌是大肠杆菌(EscherichiaColi)其生长条件简单、生长迅速、遗传背景清楚。大肠杆菌的转化策略研究得比较成熟，氯化钙转化法、超级感受态制备法和电击转化法都已经运用成熟(详见分子克隆实验指南，第三版)。在感受态制备完成后，可使用含二甲基亚枫(Dimethylsulfoxide本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液，其特征在于，包括芽孢杆菌目的菌株感受态细胞和冻存液，所述冻存液包括含磷酸盐的培养基和DMSO，所述DMSO的体积占培养基体积的2.0‑5.0％。

【技术特征摘要】
1.一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液，其特征在于，包括芽孢杆菌目的菌株感受态细胞和冻存液，所述冻存液包括含磷酸盐的培养基和DMSO，所述DMSO的体积占培养基体积的2.0-5.0％。2.根据权利要求1所述一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液，其特征在于，所述DMSO的体积占培养基体积的3.0-4.0％。3.根据权利要求1所述一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液，其特征在于，冻存液中还包括蔗糖，所述蔗糖的质量占培养基质量的10.0％以内。4.根据权利要求3所述一种芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液，其特征在于，所述蔗糖的质量占培养基质量的3.0％以内。5.一种如权利要求1所述芽孢杆菌目的菌株感受态细胞冻存悬液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)配制冻存液：将酸式磷酸盐溶液与T2培养基按体积比1:1混合，得含酸式磷酸盐的培养基，对含酸式磷酸盐的培养基进行灭菌处理后，加入体积比为2.0-5.0％的DMSO，得到冻存液。(2)冻存：将芽孢杆菌目的菌株感受态细胞置于冻存液中，形成冻存悬液，冻存悬液置于低温...

【专利技术属性】
技术研发人员：周雨叶，王俊，冯甲，安群，
申请(专利权)人：广州立白企业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44