一种提取高纯度萝卜硫苷的方法技术

本发明专利技术涉及一种提取高纯度萝卜硫苷的方法，包括以下步骤：(1)西兰花籽灭酶；(2)灭酶后西兰花籽粉碎；(3)石油醚萃取西兰花籽脱脂；(4)水提取脱脂后的西兰花籽，得到水提取液；(5)对水提取液进行浓缩、醇沉、过滤，得到滤液；(6)将滤液浓缩、喷雾干燥即得高纯度的萝卜硫苷产品。与现有技术相比，本发明专利技术采用简单的萃取分离方法，工艺简单易行，容易工业化，整个工艺价格便宜，投资少，并且能够得到高纯度的萝卜硫苷产品(纯度大于75％)，最高得率为3.5％。

A method for extracting high purity glucosinolates

The invention relates to a method for extracting high purity gulcoraphanin, which comprises the following steps: (1) broccoli seeds inactivation; (2) after inactivation of broccoli seed crushing; (3) degreasing with petroleum ether extraction of broccoli seed; (4) the water extraction of defatted broccoli seeds, water extract (5;) of water extract solution concentration, alcohol precipitation, filtration, the filtrate was obtained; (6) concentrating and spray drying to obtain high purity gulcoraphanin products. Compared with the existing technology, the invention adopts a simple extraction and separation method, which is simple and easy to operate, and is easy to industrialize. The whole process is cheap and less investment, and it can get high purity radish glucosinolates (purity is more than 75%), and the highest yield is 3.5%.

【技术实现步骤摘要】
一种提取高纯度萝卜硫苷的方法
本专利技术涉及一种天然产物纯化方法，尤其是涉及一种提取高纯度萝卜硫苷的方法。
技术介绍
萝卜硫苷(4-甲基亚磺酰基丁烯基硫代葡萄糖苷)广泛存在于十字花科植物中，如西兰花、羽衣甘蓝、抱子甘蓝、花椰菜、辣根、大白菜等[中国农学通报,2008,24(2):335-338；食品科技,2009,34(12):250-252]，其中以西兰花、花椰菜中有效成分最多，特别是西兰花种子中含量最高。萝卜硫苷的降解产物主要萝卜硫素，萝卜硫素腈，嚅唑烷硫酮等，其中含量最高的是萝卜硫素[食品科技,2009,34(12):250-252]。萝卜硫素是迄今为止蔬菜中发现的抗癌活力最强的一类异硫代氰酸盐，是目前公认的防癌和抗癌效果最好的天然产物之一。能够抑制I相酶和诱导Ⅱ相酶的表达，对肝癌、乳腺癌、肺癌、食道癌、前列腺癌、胃癌有明显的阻断作用，并且萝卜硫素还具有保护皮肤、抗菌、提高机体抗氧化能力和免疫力等药理作用[食品发酵与工业，2011,37(7):197-200]。但萝卜硫素很不稳定，而萝卜硫苷比较稳定，并且可以在生物体内水解成萝卜硫素等，因此研究萝卜硫苷的分离提纯是非常必要的。我国对萝卜硫苷的分离进行了一些的研究，但通过简单的方法得到高纯度的萝卜硫苷研究不多，大部分得到高纯度的萝卜硫苷都需要进行树脂柱或者色谱柱分离。如专利CN103709211先后通过大孔树脂、硅胶柱分离才能得到高纯度的萝卜硫苷。专利CN102295667经过多次萃取和制备色谱柱分离后，才能得到了高纯度萝卜硫苷。采用树脂分离或者色谱柱分离都会导致成本增加，工艺流程变长。中国专利CN105566409A公开了一种从西兰花种子中提取分离萝卜硫苷的方法，包括以下步骤：(1)从西兰花种子中提取萝卜硫苷溶液，并将其进行浓缩得到萝卜硫苷浓缩液；(2)将萝卜硫苷浓缩液用大孔吸附树脂进行吸附；(3)用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，得到树脂洗脱液；(4)将树脂洗脱液进行浓缩后，加入硅胶混合，挥发乙醇，得到吸附萝卜硫苷的硅胶，并将其加至由硅胶填柱所得的硅胶柱上层；(5)用洗脱剂对硅胶柱进行洗脱，收集洗脱液，并将洗脱液进行浓缩、干燥，即得萝卜硫苷产品。虽然该专利得到的萝卜硫苷纯度较高，但是通过大孔吸附树脂和硅胶柱分离，需要通过2次上柱和溶剂洗脱，过程相对繁琐，溶剂消耗多，操作周期比较长。因此，寻找一种通过简单廉价的分离提纯方法得到高含量的萝卜硫苷产品，将对开发以萝卜硫苷为主要活性成分的药品和保健品的发展具有积极推动作用。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种操作简单、成本低廉的提取高纯度萝卜硫苷的方法。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：一种提取高纯度萝卜硫苷的方法，包括以下步骤：(1)西兰花籽灭酶；(2)灭酶后西兰花籽粉碎；(3)石油醚萃取西兰花籽脱脂；(4)水提取脱脂后的西兰花籽，得到水提取液；(5)对水提取液进行浓缩、醇沉、过滤，得到滤液；(6)将滤液浓缩、喷雾干燥即得高纯度的萝卜硫苷产品。步骤(1)所述西兰花籽灭酶的方法为：取干燥的西兰花种子，于80-110℃烘箱处理20min-60min。步骤(2)所述灭酶后西兰花籽粉碎的方法为：采用粉碎机对灭酶后西兰花籽进行粉碎，使其粒度为5-100目。步骤(3)所述石油醚萃取西兰花籽脱脂的方法为：将粉碎的西兰花籽加入石油醚于40-68℃加热脱脂0.5-2h，石油醚与西兰花籽的质量比为2-10:1。步骤(4)所述水提取脱脂后的西兰花籽的方法为：将脱脂后的西兰花籽用去离子水于60-100℃提取，提取次数为1-3次，每次0.5-2h，去离子水与西兰花籽的质量比为2-8:1，得到水提取液。步骤(5)所述水提取液进行浓缩、醇沉、过滤的方法为：萝卜硫苷水提取液于旋转蒸发仪进行浓缩，得到浓缩液，浓缩液中加入95％乙醇，静止2-24h，过滤，得到滤液，其中萝卜硫苷提取液体积：浓缩液体积：95％乙醇体积为3-10:0.5-3:1。步骤(6)中干燥的方法为：将滤液浓缩至原来体积0.1-0.5倍，喷雾干燥，即得到高纯度萝卜硫苷产品，纯度大于75％。本专利技术无需通过柱分离，无需考虑可能的树脂等填料的溶剂残留，采用简单的萃取分离，通过石油醚脱去西兰花籽的油脂后，水萃取萝卜硫苷，再次醇沉去除杂质，整个过程分离规模比较大，操作简便，周期短，采用溶剂的是石油醚、乙醇和水，溶剂使用量少，价格便宜，成本低，并且产品纯度也比较高，达到75％以上，能够满足一般的药品和食品方面的需求，并且有很高的得率，最高可以达到3.5％，比专利CN105566409A最高收率(得率)1.2％要高很多。与现有技术相比，本专利技术采用简单的萃取分离方法，工艺简单易行，容易工业化，整个工艺价格便宜，投资少，并且能够得到高纯度的萝卜硫苷产品(纯度大于75％)，最高得率为3.5％。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。实施例1(1)取干燥的西兰花籽200g，于105℃烘箱处理30min，然后用粉碎机粉碎至20目，加入500g石油醚，加热至60℃提取1h，过滤，得到脱脂的西兰花籽。(2)将脱脂后的西兰花籽加入1000g去离子水于80℃提取2h，过滤，重复提取1次，合并提取液。(3)萝卜硫苷提取液于旋转蒸发仪进行浓缩，浓缩至200mL，加入200mL95％乙醇进行醇沉，静止12h后，过滤，得到滤液。(4)滤液浓缩至100mL，喷雾干燥，得到萝卜硫苷产品，纯度为76.3％，得率为3.4％。实施例2(1)取干燥的西兰花籽200g，于100℃烘箱处理50min，然后用粉碎机粉碎至20目，加入600g石油醚，加热至60℃提取1h，过滤，得到脱脂的西兰花籽。(2)将脱脂后的西兰花籽加入1000g去离子水于80℃提取2h，过滤，得到提取液。(3)萝卜硫苷提取液于旋转蒸发仪进行浓缩，浓缩至150mL，加入200mL95％乙醇进行醇沉，静止24h后，过滤，得到滤液。(4)滤液浓缩至100mL，喷雾干燥，得到萝卜硫苷产品，纯度为78.6％，得率为3.1％。上述的对实施例的描述是为便于该
的普通技术人员能理解和使用专利技术。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本专利技术不限于上述实施例，本领域技术人员根据本专利技术的揭示，不脱离本专利技术范畴所做出的改进和修改都应该在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取高纯度萝卜硫苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)西兰花籽灭酶；(2)灭酶后西兰花籽粉碎；(3)石油醚萃取西兰花籽脱脂；(4)水提取脱脂后的西兰花籽，得到水提取液；(5)对水提取液进行浓缩、醇沉、过滤，得到滤液；(6)将滤液浓缩、喷雾干燥即得高纯度的萝卜硫苷产品。

【技术特征摘要】
1.一种提取高纯度萝卜硫苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)西兰花籽灭酶；(2)灭酶后西兰花籽粉碎；(3)石油醚萃取西兰花籽脱脂；(4)水提取脱脂后的西兰花籽，得到水提取液；(5)对水提取液进行浓缩、醇沉、过滤，得到滤液；(6)将滤液浓缩、喷雾干燥即得高纯度的萝卜硫苷产品。2.根据权利要求1所述的一种提取高纯度萝卜硫苷的方法，其特征在于，步骤(1)所述西兰花籽灭酶的方法为：取干燥的西兰花种子，于80-110℃烘箱处理20min-60min。3.根据权利要求1所述的一种提取高纯度萝卜硫苷的方法，其特征在于，步骤(2)所述灭酶后西兰花籽粉碎的方法为：采用粉碎机对灭酶后西兰花籽进行粉碎，使其粒度为5-100目。4.根据权利要求1所述的一种提取高纯度萝卜硫苷的方法，其特征在于，步骤(3)所述石油醚萃取西兰花籽脱脂的方法为：将粉碎的西兰花籽加入石油醚于40-68℃加热脱脂0.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘儒华，
申请(专利权)人：赣州华汉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江西,36