miR-339-5p在抑制前列腺癌骨转移及TGF-β信号通路中的应用制造技术

本发明专利技术公开了miR‑339‑5p在抑制前列腺癌骨转移及TGF‑β信号通路中的应用。本发明专利技术研究发现miR‑339‑5p在前列腺癌骨转移中低表达，进一步研究发现，miR‑339‑5p通过靶向TGF‑β信号通路中SMAD2、SMAD3和TGFBRI，抑制TGF‑β信号通路活性，从而抑制骨转移前例腺癌细胞的迁移和侵袭，因此，miR‑339‑5p有望应用于制备前列腺癌骨转移诊断试剂、抑制骨转移药物、TGF‑β/smad抑制剂、SMAD2抑制剂、SMAD3抑制剂及TGFBRI抑制剂。

MiR 339 5p on the inhibition of prostate cancer bone metastasis and TGF beta signaling pathway in

The invention discloses a miR 339 5p on the inhibition of prostate cancer bone metastasis and TGF beta signaling pathway in. The present study found that low expression of miR 339 5p in bone metastasis of prostate carcinoma. Further studies showed that miR 339 5p SMAD2, to TGF beta signaling pathway by targeting SMAD3 and TGFBRI, inhibition of TGF beta signaling pathway activity, thereby inhibiting the migration and invasion of bone metastasis, prostate cancer cells therefore. MiR 339 5P is expected to be applied to the preparation of bone metastasis of prostate cancer diagnosis reagent, inhibit bone metastasis, drug TGF beta /smad inhibitors, SMAD2 inhibitors, SMAD3 inhibitors and TGFBRI inhibitors.

【技术实现步骤摘要】
miR-339-5p在抑制前列腺癌骨转移及TGF-β信号通路中的应用
本专利技术属于分子生物学领域，更具体地涉及miR-339-5p在抑制前列腺癌骨转移及TGF-β信号通路中的应用。
技术介绍
前列腺癌(ProstateCancer、PCa)是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一。癌症转移会大大增加前列腺癌患者的死亡率，骨是癌症转移的第二最常见部位，在我国超过80％的前列腺癌患者在确诊时已经发生骨转移，而骨转移是导致前列腺癌患者死亡的重要原因，因此，对骨转移的早期诊断，是临床诊疗和预后的关键。此外，对于中晚期前列腺癌患者，手术治疗的效果差，大多数采用药物治疗。根据不同的病情可以采用化学药物治疗、外放射治疗、放射性核素内放射治疗以及各种疗法的综合应用等。然而，放化疗药物不仅作用于肿瘤，还可以作用于肿瘤周围健康的组织，因而在杀伤肿瘤的同时，也给机体带来了很大的副作用，最终影响对肿瘤的治疗效果。因此，本领域迫切需要开发早期判断前列腺癌骨转移的特异性标志物，并开发前列腺癌骨转移的靶向药物。TGF-β信号通路在癌症中常表现出复杂甚至矛盾的作用，如癌症早期，TGF-β信号通路能抑制癌细胞生长，而在癌症后期，却能促进癌细胞的转移和侵袭，特别是骨转移，现有研究已经证实TGF-β信号通路的激活能促进前列腺癌细胞的骨转移。miRNA是具有18～24个核苷酸的非编码RNA，其结合信使RNA的3’未翻译区域中的互补性位点且抑制它们的翻译。单一miRNA能够靶向若干mRNA且调控细胞通路和细胞命运。已有研究表明，一些miRNA会促进肿瘤细胞转移，如脑癌中的miR-10b、结肠直肠癌中的miR-21、前列腺癌中的miR-184。也有发现抑制前列腺癌骨转移的一些miRNA，如miR-143、miR-145和miR-203。目前尚没有miR-339-5p与前列腺癌骨转移及TGF-β信号通路之间的研究报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供miR-339-5p在制备前列腺癌骨转移诊断试剂、抑制骨转移药物、TGF-β/smad抑制剂、SMAD2抑制剂、SMAD3抑制剂及TGFBRI抑制剂中的应用。本专利技术所采取的技术方案是：miR-339-5p在制备前列腺癌骨转移诊断试剂和/或抑制前列腺癌骨转移药物中的应用。作为上述应用的优选，所述前列腺癌骨转移诊断试剂含有能定量检测miR-339-5p和/或其编码基因的试剂。作为上述应用的优选，所述前列腺癌骨转移诊断试剂含有miR-339-5p的特异性引物、探针及芯片中的一种或多种。作为上述应用的优选，所述抑制前列腺癌骨转移药物含有以下物质中的一种或多种：1)能促进miR-339-5p表达的物质；2)能增强miR-339-5p活性的物质；3)能增长miR-339-5p有效作用时间的物质；4)能增强miR-339-5p稳定性的物质；5)模拟miR-339-5p结构的物质。作为上述应用的优选，所述抑制前列腺癌骨转移药物含有以下物质中的一种或多种：1)miR-339-5p分子；2)miR-339-5p修饰物；3)miR-339-5p模拟物；4)编码miR-339-5p的DNA；5)表达miR-339-5p的载体或病毒。作为上述应用的优选，所述miR-339-5p选自pri-miRNA、pre-miRNA、成熟miRNA、dsmiRNA及其片段或变体中的一种或几种。miR-339-5p在制备抑制剂中的应用，所述抑制剂选自TGF-β/smad抑制剂、SMAD2抑制剂、SMAD3抑制剂、TGFBRI抑制剂中的一种或多种。作为上述应用的优选，所述抑制剂含有以下物质中的一种或多种：1)能促进miR-339-5p表达的物质；2)能增强miR-339-5p活性的物质；3)能增长miR-339-5p有效作用时间的物质；4)能增强miR-339-5p稳定性的物质；5)模拟miR-339-5p结构的物质。作为上述应用的优选，所述抑制剂含有以下物质中的一种或多种：1)miR-339-5p分子；2)miR-339-5p修饰物；3)miR-339-5p模拟物；4)编码miR-339-5p的DNA；5)表达miR-339-5p的载体或病毒。作为上述应用的优选，所述miR-339-5p选自pri-miRNA、pre-miRNA、成熟miRNA、dsmiRNA及其片段或变体中的一种或几种。本专利技术的有益效果是：本专利技术研究发现miR-339-5p在前列腺癌骨转移中低表达，进一步研究发现，miR-339-5p通过靶向TGF-β信号通路中SMAD2、SMAD3和TGFBRI，抑制TGF-β信号通路活性，从而抑制骨转移前例腺癌细胞的迁移和侵袭，因此，miR-339-5p有望应用于制备前列腺癌骨转移诊断试剂、抑制骨转移药物、TGF-β/smad抑制剂、SMAD2抑制剂、SMAD3抑制剂及TGFBRI抑制剂。附图说明图1：TCGA数据库中前列腺癌及癌旁组织/良性组织中miR-339-5p表达量，图A为TCGA中前列腺癌与良性组织中miR-339-5p表达量；图B为TCGA中前列腺癌与配对的癌旁组织中miR-339-5p表达量；图2：临床样品及细胞系中miR-339-5p的表达情况；其中，图A为前列腺癌骨转移组织和无骨转移组织中miR-339-5p的表达情况；图B为miR-339-5p表达量与骨转移状态的病例统计图，图C为良性前列腺细胞及前列腺癌细胞中miR-339-5p的表达情况；图中，miR-339-5p-H为miR-339-5p高表达组，miR-339-5p-L为miR-339-5p低表达组；图3：不同前列腺癌细胞中上调或下调miR-339-5p后miR-339-5p的表达量；图4：不同前列腺癌细胞中上调或下调miR-339-5p后TGF-β/Smad荧光酶素表达强度；图5：不同前列腺癌细胞中上调或下调miR-339-5p后SMAD2、SMAD3和TGFBRI的mRNA表达量；图6：不同前列腺癌细胞中上调或下调miR-339-5p后SMAD2、SMAD3和TGFBRI的蛋白表达量；图7：不同前列腺癌细胞中miR-339-5p靶向SMAD2、SMAD3和TGFBRI验证结果，图A为VCaP细胞情况，图B为PC-3细胞情况，图C为C4-2B细胞情况；图8：不同前列腺癌细胞中上调或下调miR-339-5p对前列腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响；图9：前列腺癌VCaP细胞中，anti-miR-339-5p与SD208共同处理对细胞迁移和侵袭能力的影响。具体实施方式现结合具体实验例进一步阐述本专利技术，但并不局限于此。下述实验例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法，具体条件未注明的，按常规操作或厂家所建议的条件，下述实验例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。本专利技术的人前列腺癌细胞系22RV1、PC-3、VCaP、DU145、LNCaP和正常的人前列腺上皮细胞RWPE-1由ATCC细胞库提供；人前列腺癌细胞C4-2B购自MD安德森癌症中心；以上细胞系培养方法按本领域常规操作；115例前列腺癌组织(包括73例无骨转移和42例骨转移)由广州市第一人民医院提供，以上临床标本均来自手术过程或穿刺活检，经临床病理学确诊。实验例1、miR-339本文档来自技高网...

【技术保护点】
miR‑339‑5p在制备前列腺癌骨转移诊断试剂和/或抑制前列腺癌骨转移药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.miR-339-5p在制备前列腺癌骨转移诊断试剂和/或抑制前列腺癌骨转移药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述前列腺癌骨转移诊断试剂含有能定量检测miR-339-5p和/或其编码基因的试剂。3.根据权利要求1所述的应用，所述前列腺癌骨转移诊断试剂含有miR-339-5p的特异性引物、探针及芯片中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的应用，所述抑制前列腺癌骨转移药物含有以下物质中的一种或多种：1)能促进miR-339-5p表达的物质；2)能增强miR-339-5p活性的物质；3)能增长miR-339-5p有效作用时间的物质；4)能增强miR-339-5p稳定性的物质；5)模拟miR-339-5p结构的物质。5.根据权利要求1所述的应用，所述抑制前列腺癌骨转移药物含有以下物质中的一种或多种：1)miR-339-5p分子；2)miR-339-5p修饰物；3)miR-339-5p模拟物；4)编码miR-339-5p的DNA；5)表达miR-339-5p的载体或病毒。6.根据权利要求1所述的应用，所述miR-339-5p选自p...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄帅，唐欲博，瓦庆德，彭新生，郭远清，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：广东,44