一株携带EB病毒潜伏膜抗原2基因的重组痘苗病毒及其应用制造技术

本发明专利技术提供一株携带EB病毒潜伏膜抗原2基因的重组痘苗病毒及其应用，所述重组病毒的制备方法为：构建携带EBV LMP2、绿色荧光蛋白外源基因的重组质粒与MVA共同感染BHK‑21细胞，通过同源重组获得只携带EBV LMP2外源基因的MVA重组病毒(MVA‑LMP2A)。IFN‑γ免疫斑点法检测MVA‑LMP2A免疫过的小鼠脾淋巴细胞，表明MVA‑LMP2A可以很好的诱导小鼠体内产生EBV LMP2特异性免疫应答。

A strain of recombinant vaccinia virus carrying EB virus latent membrane protein 2 gene and its application

The invention provides a strain carrying the EB virus latent membrane protein 2 gene recombinant vaccinia virus and its application, the preparation method is as follows: to construct recombinant virus recombinant plasmid carrying EBV LMP2 and MVA, green fluorescent protein gene BHK co infected 21 cells, only carrying EBV LMP2 gene recombinant MVA the virus by homologous recombination (MVA LMP2A). Detection of MVA LMP2A mice spleen lymphocyte immune IFN gamma Dot-ELISA in the show that MVA LMP2A can induce the mice generated a good EBV LMP2 specific immune response.

【技术实现步骤摘要】
一株携带EB病毒潜伏膜抗原2基因的重组痘苗病毒及其应用
本专利技术涉及动物疫苗领域，具体涉及仅一种携带EBVLMP2外源基因的MVA-LMP2A重组病毒及其应用。专利技术背景Epstein-Barr病毒(EBV)属于疱疹病毒γ亚科，大多数初次感染为儿童时期，无明显临床症状，且终身携带。EBV在人类中广泛传播，与许多人类的肿瘤相关，包括Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌NPC、何杰金病HD和多种免疫抑制患者和移植患者的淋巴细胞增生紊乱引起的淋巴瘤(PTLD)等疾病[1]。因此该病毒的存在为基于CTL的肿瘤治疗提供了一个重要的潜在靶位。EBV表达的潜伏膜蛋白LMP1、LMP2发挥多重致瘤作用，可通过激活多重信号转导以及调控各种致瘤基因的表达发挥作用[2]。其中LMP2可以诱发较强的CD8+CTL，且一些抗原表位已经确定，EBV携带者体内的LMP2细胞免疫水平的高低与NPC的发生相关[3]。因此,目前许多EBV相关肿瘤治疗研究都是针对LMP2。LMP2是第8个被确认的潜伏膜蛋白，具有持续表达，不引起B淋巴细胞转化，无致癌性的特点，可以很好的可以诱发CTL反应磷酸化。此外，相关研究结果表明，该本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株携带EB病毒潜伏膜抗原2基因的重组痘苗病毒，其特征在于所述的重组痘苗病毒携带EB病毒潜伏膜蛋白2(EBVLMP2)外源基因，且不携带除EBVLMP2以外任何外源基因。

【技术特征摘要】
1.一株携带EB病毒潜伏膜抗原2基因的重组痘苗病毒，其特征在于所述的重组痘苗病毒携带EB病毒潜伏膜蛋白2(EBVLMP2)外源基因，且不携带除EBVLMP2以外任何外源基因。2.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其特征在于所述的重组痘苗病毒选用高度减毒、复制缺陷型的安卡拉株痘苗病毒株构建。3.如权利要求1所述的重组痘苗病毒，其特征在于所述的携带的EBVLMP2为EBVLMP2全长基因，长度大小为1.5kb的基因序列(SEQIDNO.7)。4.一种制备携带EB病毒潜伏膜抗原2基因的重组痘苗病毒的方法，利用PZL-GFP-LMP2重组质粒系统，获得脱去G...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾毅，王湛，孙立莹，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，
类型：发明
国别省市：北京,11