The invention discloses a method for building the rat model of Parkinson disease by unilateral two-point injection method, the method comprises the following steps: 1, the rats were anesthetized by intraperitoneal injection, cut off the head hair, scalp incision, subcutaneous tissue and periosteum; step 2, using a dental drill or syringe needle be careful not to damage the skull drill through the dura positioning, determine the coordinates of the suction syringe connected to the drug pusher to trace, SNc and VTA 6 OHDA injection configured 5 L, vertical cranial suture; step 3, after three days of continuous intraperitoneal injection of penicillin 50 thousand units to prevent infection, build animal model; step 4, 10 days after intraperitoneal injection of APO induced rat rotational behavior to the left. In the process of model making, needle puncture is used to puncture rat skull, and it can save time for modeling, convenient and quick, and is simple and convenient for instruments.
【技术实现步骤摘要】
一种采用单侧两点注射法建造帕金森病模型鼠的方法
本专利技术属于生物
,涉及一种采用单侧两点注射法建造帕金森病模型鼠的方法。
技术介绍
帕金森病(Parkinsondisease,PD)作为神经系统退行性病变,其典型的病理特征为中脑黑质多巴胺(dopamineDA)能神经元缺失以及黑质纹状体通路DA数量降低。帕金森动物模型的建立方法有多种,目前最常用的是6-OHDA(6羟基多巴胺)制备的大鼠模型和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)制作的小鼠或灵长类动物模型。通常以选择大鼠制作动物模型居多。6-OHDA诱发的PD动物模型在神经生化、病理和行为学方面与人类PD具有很大相似性,已被广泛用于PD的研究。然而,6-0HDA诱导PD神经退行性变性的程度和特点明显受注射部位的影响口。6-OHDA建造PD大鼠模型目前多采用黑质致密部(SNc)、中脑腹侧被盖(VTA)、纹状体及前脑内侧束(medialforebrainbundleMFB)单点或双点注射法来制作单侧或双侧损毁PD模型。SNc区域小,一般造模成功率低。VTA作为另一个重要靶点与躯体运动密切相关,与PD病理有关的重要区域,如果单独损伤,也会出现造模率低的情况。采用SNc与VTA的双点联合毁损法,可以使损伤范围较大,缩短造模周期,有效提高造模成功率建立稳定的模拟PD中晚期的大鼠模型,为疾病的研究治疗提供实验室基础研究平台。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种采用单侧两点注射法建造帕金森病模型鼠的方法 ...
【技术保护点】
一种采用单侧两点注射法建造帕金森病模型鼠的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、将大鼠腹腔注射麻醉后,剪去头顶部毛发,固定于脑立体定位仪上,双侧耳杆尖端插入外耳道,使头部固定保持水平,并尽量使前、后囟保持同一平面上,碘酒消毒,切开头皮、皮下组织和骨膜;步骤2、采用牙科钻或注射器针头小心钻透定位处的颅骨不要损伤硬脑膜,按确定右侧、SNc:前囟后5.4±0.1mm,矢状缝右侧1.4±0.1mm,硬脑膜下7.8±0.1mm;VTA:前囟后5.0±0.1mm,中线右侧0.9±0.1mm,硬脑膜下7.2±0.1mm,确定好的坐标将吸入药物的微量注射器连接于微量推进器上,向SNc和VTA注射配置好的6‑OHDA 5μl,垂直入颅,缓慢进针,注射保持速度为1μl/min,留针10min,缓慢退针1mm/min,术中观察大鼠生命体征;步骤3、缝合后,三天连续腹腔注射青霉素5万单位以防治感染,建造动物模型;步骤4、在10天后腹腔注射APO诱发大鼠向左侧的旋转行为,注射后10min大鼠就出现行为学改变,连续记录40min:旋转时多数以左侧后肢为支点,身体环曲呈“C”状,首尾相接,伴探嗅觅食样动作,有的旋 ...
【技术特征摘要】
1.一种采用单侧两点注射法建造帕金森病模型鼠的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、将大鼠腹腔注射麻醉后,剪去头顶部毛发,固定于脑立体定位仪上,双侧耳杆尖端插入外耳道,使头部固定保持水平,并尽量使前、后囟保持同一平面上,碘酒消毒,切开头皮、皮下组织和骨膜;步骤2、采用牙科钻或注射器针头小心钻透定位处的颅骨不要损伤硬脑膜,按确定右侧、SNc:前囟后5.4±0.1mm,矢状缝右侧1.4±0.1mm,硬脑膜下7.8±0.1mm;VTA:前囟后5.0±0.1mm,中线右侧0.9±0.1mm,硬脑膜下7.2±0.1mm,确定好的坐标将吸入药物的微量注射器连接于微量推进器上,向SNc和VTA注射配置好的6-OHDA5μl,垂直入颅,缓慢进针,...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨新玲,高华,贾丛康,姜涛,王玉玲,罗琴,毛洁萍,李艳霞,夏欢,姚亚妮,
申请(专利权)人:新疆医科大学第二附属医院,
类型:发明
国别省市:新疆,65
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