一种鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，具体涉及一种鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒及其应用。本发明专利技术所述鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的检测试剂盒，利用PCR技术快速、准确、敏感性高的特点，利用设计的三对特异性引物在同一个体系中能区分8a型、8b型和11型这三种国内主要流行的鸡包涵体肝炎，能快速的区分鸡包涵体肝炎血清8a型、8b型和11型病毒的感染或是上述病毒的混合感染，在临床上尚属首次报道，并具有省时、省力、成本低等优点，具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒及其应用
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒及其应用。
技术介绍
鸡包涵体肝炎(Inclusionbodyhepatitisinchicken，IBH)是由Ⅰ群禽腺病毒引起鸡的急性传染病，多发于2-5周龄的鸡群，其中又以3-4周龄最多发，主要症状是鸡群死亡率突然增加，发病率可达到10-20％，但死亡率较低，一般不超过5％，通常发病后5-7天又恢复正常。感染患病鸡主要的表现为精神沉郁、食欲不振、嗜睡、鸡冠发白、羽毛杂乱等状；剖检可见以肝脏发黄、肿大、变脆等为主要病变特征的包涵体肝炎，较少出现心包积液，部分肾脏肿大，呈淡黄色，脾脏也伴有肿大，骨髓呈淡红色至淡黄色；而最显著的病理变化是肝细胞核内有包涵体。近几年来该病在我国肉鸡中流行并有上升的趋势，目前，在我国由Ⅰ群禽腺病毒导致的疾病主要有两种：一是心包积液-肝炎综合征，主要由血清4型引起；二是包涵体肝炎，其主要由血清8a型(FAV-8a)、8b(FAV-8b)型和11型(FAV-11)病毒引起，但这3种血清型交叉保护性非常低，且从临床症状和病变上无法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒以100次用量计，包括如下组分：PCR反应液体系    4800μL：阳性质粒         200μL；所述阳性质粒为终浓度均为0.1ng/μL的重组质粒T‑8a、T‑8b和T‑11的混合物。

【技术特征摘要】
1.一种鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒以100次用量计，包括如下组分：PCR反应液体系4800μL：阳性质粒200μL；所述阳性质粒为终浓度均为0.1ng/μL的重组质粒T-8a、T-8b和T-11的混合物。2.根据权利要求1所述的鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒，其特征在于，PCR反应液体系包括如下组分：3.根据权利要求2所述的鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒，其特征在于，所述检测引物FAV8a-1/FAV8a-2用于检测血清8a型Ⅰ群禽腺病毒，扩增片段大小为292bp；所述检测引物FAV8a-1/FAV8a-2具有如下序列结构：FAV8a-1：5'-AACCCCTATGAGAATACCACT-3'；FAV8a-2：5'-CCAAATATTTCGTGCTCCC-3'。4.根据权利要求2或3所述的鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒，其特征在于，所述检测引物FAV8b-1/FAV8b-2用于检测血清8b型Ⅰ群禽腺病毒，扩增片段大小为208bp；所述检测引物FAV8b-1/FAV8b-2具有如下序列结构：FAV8b-1：5'-GCCAGCGTTTCAGGCTCT-3'；FAV8b-2：5'-CGTAGTAAGGCGTTGTTCCA-3'。5.根据权利要求2-4任一项所述的鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒，其特征在于，所述检测引物FAV11-1/FAV11-2用于检测血清11型Ⅰ群禽腺病毒，扩增片段大小为474bp；所述检测引物FAV11-1/FAV11-2分别具有如下序列结构：FAV11-1：5'-GAAGACTTTAGCGCCTCG-3'；FAV11-2：5'-CTCGGTTCCCTTATCACCC-3'。6.根据权利要求2-5任一项所述的鉴别常见血清型鸡包涵体肝炎感染的试剂盒，其特征在于，所述重组质粒T-8a、T-8b和T-11按照如下方法制备：分别提取FAV-8a、FAV-8b和FAV11病毒核酸，并分别利用引物FAV8a-1/FAV8a-2、FAV8b-1/FAV8b-2、FAV11-1/FAV11-2进行阳性PCR扩增目的条带，回收目的...

【专利技术属性】
技术研发人员：于可响，宋敏训，胡峰，亓丽红，蔡清秀，田雪，黄兵，李玉峰，马秀丽，刘存霞，
申请(专利权)人：山东省农业科学院家禽研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37