通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法技术

本发明专利技术属于中国鲎养殖技术领域，公开了一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法，二氧化氯安全质量浓度为13.8mg·L

Method of improving the survival rate and hatchability of Chinese horseshoe crab by controlling the concentration of chlorine dioxide

The invention belongs to the Chinese crab culture technology field, and discloses a method for improving the embryo survival rate and hatching rate of Chinese Limulus horseshoe by controlling the concentration of chlorine dioxide. The safe mass concentration of chlorine dioxide is 13.8mg. L.

【技术实现步骤摘要】
通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法
本专利技术属于中国鲎养殖
，尤其涉及一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法。
技术介绍
中国鲎(Tachypleustridentatus)，又名三刺鲎，隶属节肢动物门(Arthropoda)、有鳌肢亚门(Chelicerta)，肢口纲(Merostomata)、剑尾目(Xiphosura)、鲎科(Limulidae)，主要分布于日本九州以南，瓜哇岛以北，菲律宾以西的亚洲东岸及东南岸海域，在中国长江以南的浙江、福建、广东、广西、海南均有发现，现以广东、广西为多，俗称公母鲎。它早在3亿年钱的泥盆纪就生活在地球上，至今仍保持其形态，有“活化石”之称。现在地球上生存的鲎有四种：美洲鲎，东方鲎，南方鲎和圆尾鲎。BangF.C.1956年发现鲎的血细胞遇革兰氏阴性细菌产生凝和NakmuraT.1988年发现鲎血细胞提取的阳离子肽——鲎素Tachyplesin)的抗菌病毒机理以来，鲎的经济价值变得越来越大。由于鲎试剂的生产开发，大量的捕杀成体鲎抽取血液，二十多年前已有关于中国鲎数量急剧下降已告急的报道。为了补充这一珍贵的海洋动物，如今已有多地进行中国鲎人工育苗的研究。在人工育苗过程中胚胎发育有较为重要的研究价值，中国鲎的胚胎早期发育可分为卵裂和囊胚形成期、原肠胚和附肢原基形成期、组织分化期、快速生长期。在组织分化期，胚体共进行3次胚内蜕皮，并在第2次蜕皮的同时卵胶膜破裂蜕去，完成3次胚内蜕皮的胚体身体扁平，各组织器官基本成型定位。在快速生长期内，胚体完成最后一次胚内蜕皮，蜕皮后胚体进一步扁平，各组织器官进一步完善。第4次蜕皮后3到5天时间胚体破坏内卵膜而孵化为自由游泳的一龄幼鲎。特别值得注意的是快速生长期的胚胎各组织器官已定型并进一步完善，卵径可达6.0mm左右，约为受精卵的1.8倍，能很清晰地观察到胚胎内的胚体，并且作为胚胎期过度到幼鲎期的一个阶段，对外界环境变化比较敏感，此阶段的胚胎是作为胚胎期的最佳试验材料。在人工育苗及养殖过程中常需要用到药物进行相应疾病的预防及治疗，但药物同时也会对水产动物本身有一定的毒性影响，但迄今为止，药物对鲎的毒性试验的研究报道甚少。水产生产中常用二氧化氯这2种药物进行疾病的预防及治疗。二氧化氯属强氧化剂，它的消毒机理是通过与水体作用用释放出新生态氧，使微生物的蛋白变性而失去活性达到杀灭病原体的目的，是高效广谱的消毒剂，它作用水体后不生成有害物质(卤代有机物)，水生生物又不产生抗药性，无残留，是一种绿色环保消毒剂。综上所述，现有技术存在的问题是：在人工育苗及养殖过程中用到药物进行相应疾病的预防及治疗，药物同时也会对水产动物本身有毒性影响。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法。本专利技术是这样实现的，一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法包括：所述二氧化氯安全质量浓度为13.8mg·L-1；所述二氧化氯对中国鲎胚胎的12h、24h、48h、72h和96h半致死质量浓度分别为84.4mg·L-1、58.9mg·L-1、54.3mg·L-1、52.1mg·L-1、50.6mg·L-1。进一步，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法采用急性毒性试验和SPSS17.0软件的单因素方差分析进行统计分析；用Duncan及LSD法进行组间多重比较，用Probit回归分析，求半致死浓度LC50，计算安全质量浓度。进一步，所述计算安全质量浓度的公式为：进一步，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法的二氧化氯不同试验时间下的毒力回归方程为：12hY＝-4.911+0.058X；24hY＝-11.951+0.203X；48hY＝-11.950+0.218X；72hY＝-11.963+0.229X；96hY＝-11.971+0.237X。本专利技术的优点及积极效果为：同种药物不同浓度在相同时间内对中国鲎胚胎的急性毒性效果差异明显，二氧化氯对中国鲎胚胎的12h、24h、48h、72h和96h半致死质量浓度分别为84.4mg·L-1、58.9mg·L-1、54.3mg·L-1、52.1mg·L-1、50.6mg·L-1，安全质量浓度为13.8mg·L-1。2种消毒药物的安全质量浓度均远远高于它们在养殖生产中常用的泼洒浓度和浸浴浓度，二氧化氯在中国鲎胚胎发育中和病害防治中可以按照常规使用浓度放心使用。本试验结果表明二氧化氯对中国鲎胚胎的12h、24h、48h、72h、96h的半致死浓度为别是84.3mg/L、58.9mg/L、54.3mg/L、52.1mg/L、50.6mg/L，安全质量浓度为13.8mg/L。二氧化氯在水产养殖生产中常用泼洒质量浓度为0.2-0.3mg/L，当二氧化氯质量浓度超过0.3mg/L时，不但可以获得良好的抑、杀菌效果，而且对鱼类的水霉病也具有明显的预防作用，很显然二氧化氯对中国鲎胚胎安全质量浓度远高于这两个浓度，二氧化氯在防治中国鲎胚胎病害时可以安全使用，能获得很好的效果；更好地为中国鲎的育苗及养殖的疾病预防和治疗提供参考。附图说明图1是本专利技术实施例提供的通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法流程图。图2是本专利技术实施例提供的二氧化氯不同浓度组在不同试验时间下的平均死亡率示意图。图3是本专利技术实施例提供的二氧化氯对中国鲎胚胎在不同时间的半致死浓度示意图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。下面结合附图对本专利技术的应用原理作详细的描述。如图1所示，本专利技术实施例提供的通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法包括以下步骤：S101：根据预试验的结果，利用等差数列将二氧化氯试验质量浓度设为24、36、48、60、72mg/L共5个梯度对对处于快速生长期的中国鲎胚胎进行试验；S102：通过观察胚胎体在刺激下是否有器官反应，是否发白，作为依据。若在强烈的抖动下胚体五分钟内胚体不再翻滚，各器官均无反应，并且胚体泛白，即说明胚体坏死；若有组织器官出现反应则说明胚体还有活性记录为活的胚胎；S103：用Excel进行数据处理，用SPSS17.0软件的单因素方差分析(One-wayANOVA)进行统计分析；用Duncan及LSD法进行组间多重比较，设置p＜0.05为差异显著，用Probit回归分析，求半致死浓度LC50，然后根据公式计算安全质量浓度。下面结合试验对本专利技术的应用原理作进一步的描述。1材料和方法1.1试验材料1.1.1试验中国鲎胚胎中国鲎的胚胎组织选自湛江硇洲岛宜人海珍种苗养殖场，该养殖场养殖现已成功实现中国鲎规模化的育苗，并进行规模化的放流。因6月中旬至7下旬月为中国鲎产卵的盛期，故试验用的中国鲎胚胎为处于快速生长期内的胚胎。1.1.2试验药品二氧化氯消毒剂(水产养殖专用)购自张家口市绿洁环保化工技术开发有限公司，包装：100g/袋，规格：100g:8g。1.1.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法，其特征在于，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法包括：所述二氧化氯安全质量浓度为13.8mg·L

【技术特征摘要】
1.一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法，其特征在于，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法包括：所述二氧化氯安全质量浓度为13.8mg·L-1；所述二氧化氯对中国鲎胚胎的12h、24h、48h、72h和96h半致死质量浓度分别为84.4mg·L-1、58.9mg·L-1、54.3mg·L-1、52.1mg·L-1、50.6mg·L-1。2.如权利要求1所述的通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法，其特征在于，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法采用急性毒性试验和SPSS17.0软件的单因素方差分析进行统计分析；用Duncan及LSD法进行组间多重比较，用Probit回归分析，求半致死浓度LC50，计算安全质量浓度。3.如权利要求2所述的通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法，其特征在于，所述计算安全质量浓度的公式为：

【专利技术属性】
技术研发人员：廖永岩，关杰耀，方怀义，王鹏良，刘金霞，
申请(专利权)人：钦州学院，
类型：发明
国别省市：广西,45