Through the knockout transformants 2 genes can cultivate the male is the mosquito population, causing X sperm dysfunction, resulting in serious bias in male offspring. Unlike previous approaches, we recently found that Tra 2 knockout also led to female specific zygotic death (XX). This technology is also used to kill early female zygote (XX) that may survive in the previous knockout process. Only when adding an antibacterial substance to food and beverage can all male offspring be produced. Strict restrictions on the exposure time of antibiotics allow the mosquitoes to adapt to the Verba J S body bacteria to survive. The selected Wolbachia bacteria could induce cytoplasmic incompatibility (CI) to 100%. Therefore, in the natural environment, all the transgenic offspring are male, and it is infertile with another female CI infected by the other two species (two-way CI).
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种培育雄性不育库蚊的方法
本专利技术涉及一种培育雄性不育库蚊的方法，以用作防蚊措施。
技术介绍
一种专利技术用于控制昆虫种群的方法被称为“昆虫不育技术”或SIT，该方法一直被视为有效的、具有种属特异性并且环保的害虫种群控制方法。SIT法可通过辐射或不育剂培育雄性不育昆虫，将其释放至自然栖息地，雄性不育昆虫将在自然栖息地本能地寻找雌性进行交配。当长期释放出大量的不育雄性时，可能导致自然昆虫种群崩溃，甚至灭绝1-3。使用SIT法的一个例子是，人们利用该方法已经成功消灭了美国南方各州、墨西哥和中美洲各国的新大陆螺旋蝇(Cochliomyiahominivorax)4。由SIT法培育的昆虫需要接受雌雄鉴别，以排除雌性个体；这是因为，如果释放包含不育雌性的大量昆虫，他们将会寻找血餐，并且可能传播疾病(对于蚊子)或造成水果腐败(对于苍蝇)5。然而以物理方式区分种群中的雄性昆虫非常费力；此外，这样做会导致小型昆虫受伤，例如蚊子(未公布数据)。蚕采用另一种方法进行性别鉴定，易位染色体片段连接在性染色体上为不同卵色进行编码的基因上，但蚊子体内不存在这样的标记6-7。与野生雄性相比，通过辐射或化学药剂产生的突变体通常伴随有雄性交配竞争力显著下降，这可能会导致涉及释放雄蚊的控制策略失效。此刻社会最关心的是，昆虫遗传修饰技术还不够先进，不足以替代SIT法。这是因为通过繁殖交配进入野生蚊子体内的转基因可能导致意外后果。一旦发生这种情况，弥补不良后果变得非常困难，甚至是不可能逆转的5。很多SIT试验都曾经释放过蚊子。在这些情况下，虽然这些方案不足以在非隔离区域产生效果，但一般能够观...
【技术保护点】
一种培育全雄性不育库蚊的方法，其中包括：i)培育库蚊生物品系，所述库蚊品系携带一个或多个插入的Tet‑on+转化子‑2遗传敲除系统，以沉默内源性Tra‑2基因，其中所述敲除效应仅发生在所述饲养条件下(实验室或饲养)，所述敲除系统只能通过添加所述物质激活，所述Tra‑2敲除系统可以在雄性精子形成期间表达，并杀死带有X(m)染色体的精子，当X(m)染色体的精子存活时表达可杀死早期雌性受精卵，所有类型的敲除效应将产生严重的雄性偏向，雄性后代可达100％；ii)在缺乏所述物质的情况下形成所述育种品系，因此在自然环境中的物种沉默，该物质在自然栖息地不存在，只能通过喂养提供给转化昆虫从而诱导敲除系统；iii)所述昆虫品系还携带一个或多个内共生沃尔巴克氏体，其中雌性感染昆虫与Tet‑on+Tra 2 RNAi品系雄性杂交，或通过胚胎细胞质感染昆虫，向目标物种的成年雌性的胸肌中进行微量注射，以生成人工细菌感染蚊子(所述沃尔巴克氏体不同于那些天然种群中可能已经存在的沃尔巴克氏体，如果雄性与自然种群选育的雌性昆虫杂交，可诱导胞质不相容性(Ci))，其中所述添加剂抗生素物质在Tra 2 RNAi的生命周期中...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种培育全雄性不育库蚊的方法，其中包括：i)培育库蚊生物品系，所述库蚊品系携带一个或多个插入的Tet-on+转化子-2遗传敲除系统，以沉默内源性Tra-2基因，其中所述敲除效应仅发生在所述饲养条件下(实验室或饲养)，所述敲除系统只能通过添加所述物质激活，所述Tra-2敲除系统可以在雄性精子形成期间表达，并杀死带有X(m)染色体的精子，当X(m)染色体的精子存活时表达可杀死早期雌性受精卵，所有类型的敲除效应将产生严重的雄性偏向，雄性后代可达100％；ii)在缺乏所述物质的情况下形成所述育种品系，因此在自然环境中的物种沉默，该物质在自然栖息地不存在，只能通过喂养提供给转化昆虫从而诱导敲除系统；iii)所述昆虫品系还携带一个或多个内共生沃尔巴克氏体，其中雌性感染昆虫与Tet-on+Tra2RNAi品系雄性杂交，或通过胚胎细胞质感染昆虫，向目标物种的成年雌性的胸肌中进行微量注射，以生成人工细菌感染蚊子(所述沃尔巴克氏体不同于那些天然种群中可能已经存在的沃尔巴克氏体，如果雄性与自然种群选育的雌性昆虫杂交，可诱导胞质不相容性(Ci))，其中所述添加剂抗生素物质在Tra2RNAi的生命周期中的短暂存在，以允许沃尔巴克氏体可安全地保留在昆虫的品系内；iv)将所述品系的雄性Tet-on+Tra2RNAi/沃尔巴克氏体后代释放至自然种群中，不需要性别鉴定步骤以清除雌性，可以通过喂养野生雌性实现种群控制，通过CI对其进行部分或全部绝育。2.一种根据权利要求1所述的有机体，其中用于创建RNAi基因重组构建物(长dsmRNA、shRNA或miRNA)的任何序列可用于所述有机体...
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