一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法技术

本发明专利技术公开了一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，包括以下步骤：以长出真叶的蔬菜为寄主植物；将侵染性克隆菌液接种到寄主植物中；继续培养，筛选出已感病的植株和无毒植株；分别将B烟粉虱和Q烟粉虱接种到已感病的植株和无毒植物上得到接种有B烟粉虱的已感病植株、接种有Q烟粉虱的已感病植株、接种有B烟粉虱的无毒植株、接种有Q烟粉虱的无毒植株；单独饲养，使烟粉虱进行繁育；饲养6代后，进行烟粉虱取虫。本发明专利技术的人工饲养方法可缩短昆虫的发育时间，提高产卵量，保证存活率和稳定性，保证烟粉虱的持续、稳定供应。

The artificial breeding method of a virus vector insect Bemisia tabaci

The invention discloses a method for breeding a virus vector insect whitefly, which comprises the following steps: to grow the leaf vegetables for the host plant; the infectious clone inoculation to host plants; to continue training, screening out the diseased plants and non-toxic plants respectively; B and Q of Bemisia tabaci the whitefly inoculated into diseased plants and non-toxic plants inoculated with B on whitefly has infected plants, inoculated with Q whitefly has infected plants inoculated with B, whitefly, non-toxic plants inoculated with Q whitefly non-toxic plants; feeding alone, to smoke powder louse breeding; feeding after 6 generations of whitefly capturing. The artificial feeding method of the invention can shorten the development time of insects, increase the egg production, ensure the survival rate and stability, and ensure the continuous and stable supply of Bemisia tabaci.

【技术实现步骤摘要】
一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法
本专利技术涉及昆虫饲养
，尤其涉及一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法。
技术介绍
烟粉虱Bemisiatabaci，给蔬菜和粮食作物等带来了非常严重的损失，我国主要有B和Q两种烟粉虱。烟粉虱可传播多种植物病毒，其传播病毒造成的危害远远高于自身取食造成的危害。要想控制烟粉虱传播病毒，首先要研究烟粉虱传播病毒的机制，因此便需要建立能够持续供应的携带病毒且种群稳定的烟粉虱，并有相同条件下饲养的不带毒的烟粉虱作为对照。同时，为了消除田间植物病毒复合侵染的影响，必须用病毒的侵染性克隆对植物进行接种，保证毒源的单一性。此外，需要对烟粉虱和病毒的寄主植物进行筛选，使其能在病毒侵染和烟粉虱取食的双重压力下仍保持活力。由于涉及寄主植物、病毒和烟粉虱三个重要因素，导致目前该技术发展缓慢，只要有一个环节出错，便会延长试验时间，阻碍试验进程。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种能够同时获得不同种群的携带病毒的烟粉虱以及不带毒的烟粉虱的人工饲养方法，具有昆虫的发育时间短，产卵量高，存活率高，保证供试材料的持续、稳定供应等优势。为了实现上述技术效果，本专利技术提供了一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，包括以下步骤：S1、以长出真叶的蔬菜为寄主植物；将侵染性克隆菌液接种到寄主植物中；S2、继续培养，并筛选出已感病的植株和无毒植株；S3、分别将B烟粉虱和Q烟粉虱接种到所述已感病的植株和所述无毒植物上得到接种有B烟粉虱的已感病植株、接种有Q烟粉虱的已感病植株、接种有B烟粉虱的无毒植株、接种有Q烟粉虱的无毒植株；S4、分别将所述接种有B烟粉虱的已感病植株、接种有Q烟粉虱的已感病植株、接种有B烟粉虱的无毒植株、接种有Q烟粉虱的无毒植株单独饲养，使烟粉虱进行繁育；S5、饲养6代以上，进行烟粉虱取虫。上述的人工饲养方法，优选的，所述S1步骤中所述寄主植物为长出3～4片真叶的蔬菜。上述的人工饲养方法，优选的，所述寄主植物的培养包括以下步骤：将蔬菜种子播种在以泥炭、蛭石、有机肥料和珍珠岩为基质的无虫笼里，直至蔬菜长出3～4片真叶。上述的人工饲养方法，优选的，所述无虫笼为铝合金制成的框架笼，底层和正面上端是用玻璃制成，顶层、两侧及后面是用100目尼龙网制成，正面下端是100目尼龙网制成的门。上述的人工饲养方法，优选的，所述泥炭∶蛭石∶有机肥料∶珍珠岩的比例为10∶10∶10∶1。上述的人工饲养方法，优选的，所述S1步骤中，将侵染性克隆菌液接种到寄主植物，具体步骤为：S1-1、将侵染性克隆在YEP固体培养基上活化，挑取固体培养基上的单菌落，并置于YEP液体培养基中培养获得侵染性的克隆菌液；S1-2、将所述侵染性的克隆菌液离心后取沉淀，将悬浮液对所述沉淀重悬浮得到病毒的农杆菌侵染性克隆菌液；所述悬浮液包括10mMMEs、10mMMgCl2、200mM乙酰丁香酮(acetosyringone)；S1-3、将所述病毒的农杆菌侵染性克隆菌液注射到寄主植物中，继续培养直至寄主植物长有6～7片真叶。MEs又名2-(N-吗啉)-乙基磺酸。上述的人工饲养方法，优选的，所述S4步骤中，所述使烟粉虱进行繁育的具体步骤为：光照14小时，并控制光照时温度为28℃；黑暗10小时，并控制黑暗时温度为25℃，饲养过程中过程中湿度保持在60％。上述的人工饲养方法，优选的，所述S5步骤中，所述S5步骤中，所述烟粉虱取虫包括以下步骤：采用小型昆虫吸虫器采集烟粉虱，吸取所需数量的昆虫，随后用手指轻轻堵住小型昆虫吸虫器尖端，将其转移到离心管中，进行后续试验。上述的人工饲养方法，优选的，所述小型昆虫吸虫器包括第一枪头、第二枪头、乳胶管和纱网，所述第一枪头接口端与乳胶管的一端连接，在连接处设置有纱网；所述第二枪头的尖端与所述乳胶管另一端连接。优选的，所述乳胶管为透明乳胶管。上述的人工饲养方法，优选的，所述第一枪头尖端剪去1cm，所述第二枪头尖端剪去0.5cm长，所述乳胶管直径为1cm、长度为20cm；所述纱网为100目。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：(1)本专利技术提供了一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，能够同时获得不同种群的携带病毒的烟粉虱以及不带毒的烟粉虱，具有如下优点：1、可取生长发育一致的烟粉虱进行研究，与大田环境相比，可缩短昆虫的发育时间，提高产卵量，保证存活率，保证供试材料的持续、稳定供应。2、不带毒烟粉虱和饲养所用植物单独饲养，隔离效果好，保证样品纯度。3、用侵染性克隆接种生长发育一致的植物，定期检测，保证毒源供应稳定，带毒均匀。4、健康植株和带毒植株持续供应，保证烟粉虱活力。(2)本专利技术提供了一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，供试植物养在干净的无虫笼里，无虫笼是铝合金制成的框架笼，规格为60cm×40cm×80cm，底层和正面上端是用玻璃制成，顶层、两侧及后面是用100目尼龙网制成，正面下端是100目尼龙网制成的门，这种无虫笼的玻璃和尼龙网构造，既满足了植物生长过程中需要的光源和通透性，又防止了烟粉虱的逃逸，且铝合金框架坚固耐用。(3)本专利技术提供了一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，以泥炭∶蛭石∶有机肥料∶珍珠岩的比例为10∶10∶10∶1为基质种植蔬菜种子，既保证了土壤的通透性，又保证了肥料的供应，能够使植物健康生长。(4)本专利技术提供了一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，在病毒接种过程中，采用50mL悬浮液(含10mMMEs、10mMMgCl2、200mM乙酰丁香酮)对菌体进行重悬浮的目的是调整菌液浓度，使其OD600值在1.0～1.5的范围内，能够促进病毒接种后的发病，使接种的植物感染病毒率较高。(5)本专利技术提供了一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，在烟粉虱取虫的过程中，采用小型昆虫吸虫器采集烟粉虱，用直径1cm、长度为20cm的乳胶管加工而成，将1ml蓝枪头尖端剪去约1cm长的一小截，乳胶管的尾部接入蓝枪头后端，中间用100目纱网隔离，乳胶管的头部接入蓝枪头尖端，用嘴对准乳胶管头部的蓝枪头吸取所需数量的昆虫，小型昆虫吸虫器。这样设计的作用是借助气流的作用将烟粉虱吸入一个相对较小的空间，可将大量烟粉虱短时间转移到所需要的试验器材中，且防止了取虫过程中对烟粉虱的伤害，中间用100目纱网隔离的作用是防止将烟粉虱吸入嘴里。附图说明为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述。图1是本专利技术实施例1中人工饲养的流程图。图2是本专利技术实施例1中小型昆虫取虫器的结构示意图，其中，1：第一枪头、2：第二枪头、3：乳胶管、4：纱网。具体实施方式以下结合说明书附图和具体优选的实施例对本专利技术作进一步描述，但并不因此而限制本专利技术的保护范围。以下实施例和对比例中所采用的材料和仪器均为市售。实施例1一种本专利技术的病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，参见图1，包括寄主植物培养、病毒接种、烟粉虱接种、烟粉虱繁育、取虫等步骤，具体为：(1)寄主植物培养：1.1、寄主植物为番茄、辣椒、黄瓜等试验常用蔬菜，本实施例采用了番茄，因为番茄是多种植物病毒的寄主。1.2、供试植物养在干净的无虫笼里，无虫笼是铝合金制成的框架笼，规格为60cm×40cm本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、以长出真叶的蔬菜为寄主植物；将侵染性克隆菌液接种到寄主植物中；S2、继续培养，筛选出已感病的植株和无毒植株；S3、分别将B烟粉虱和Q烟粉虱接种到所述已感病的植株和所述无毒植物上得到接种有B烟粉虱的已感病植株、接种有Q烟粉虱的已感病植株、接种有B烟粉虱的无毒植株、接种有Q烟粉虱的无毒植株；S4、分别将所述接种有B烟粉虱的已感病植株、接种有Q烟粉虱的已感病植株、接种有B烟粉虱的无毒植株、接种有Q烟粉虱的无毒植株单独饲养，使烟粉虱进行繁育；S5、饲养6代以上，进行烟粉虱取虫。

【技术特征摘要】
1.一种病毒媒介昆虫烟粉虱的人工饲养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、以长出真叶的蔬菜为寄主植物；将侵染性克隆菌液接种到寄主植物中；S2、继续培养，筛选出已感病的植株和无毒植株；S3、分别将B烟粉虱和Q烟粉虱接种到所述已感病的植株和所述无毒植物上得到接种有B烟粉虱的已感病植株、接种有Q烟粉虱的已感病植株、接种有B烟粉虱的无毒植株、接种有Q烟粉虱的无毒植株；S4、分别将所述接种有B烟粉虱的已感病植株、接种有Q烟粉虱的已感病植株、接种有B烟粉虱的无毒植株、接种有Q烟粉虱的无毒植株单独饲养，使烟粉虱进行繁育；S5、饲养6代以上，进行烟粉虱取虫。2.根据权利要求1所述的人工饲养方法，其特征在于，所述S1步骤中所述寄主植物为长出3～4片真叶的蔬菜。3.根据权利要求2所述的人工饲养方法，其特征在于，所述寄主植物的培养包括以下步骤：将蔬菜种子播种在以泥炭、蛭石、有机肥料和珍珠岩为基质的无虫笼里，直至蔬菜长出3～4片真叶。4.根据权利要求3所述的人工饲养方法，其特征在于，所述无虫笼为铝合金制成的框架笼，底层和正面上端是用玻璃制成，顶层、两侧及后面是用100目尼龙网制成，正面下端是100目尼龙网制成的门。5.根据权利要求3所述的人工饲养方法，其特征在于，所述泥炭∶蛭石∶有机肥料∶珍珠岩的比例为10∶10∶10∶1。6.根据权利要求1所述的人工饲养方法，其特征在于，所述S1步骤中，将侵染性克隆菌液接种到寄主...

【专利技术属性】
技术研发人员：史晓斌，刘勇，张德咏，张友军，张战泓，
申请(专利权)人：湖南省植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：湖南,43