The invention provides a method for widening the immune colloidal gold detection range, the method respectively at t0.5 and t time when using immunochromatography interpretation recorder determination of reaction of colloidal gold test strip line (T line) of the signal values of GOD0.5 and GOD, t said the complete reaction time, the signal value in half the time, t0.5 the complete reaction when GOD/GOD0.5> 1.5 did not appear to determine the hook effect of concentration value calculation, according to the signal of linear regression equation on the test results when the GOD/GOD0.5< value; 1.5 for judging the hook effect, according to the logistic curve fitting signal four parameters equation of the test results to calculate the value of concentration; this method can judge whether the hook effect exists samples can be directly on the existence of hook effect samples for direct reading detection, without wasting reagents, only one test can be determined The test results are fast and accurate.
【技术实现步骤摘要】
一种扩宽免疫胶体金检测范围的方法
本专利技术涉及体外免疫检测
,尤其是一种扩宽免疫胶体金检测范围的方法。
技术介绍
胶体金是由氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。在免疫胶体金定量试验中,检测范围受抗体(或抗原)性质和抗体(或抗原)使用量的影响。在免疫胶体金检测中高浓度样本会产生钩状效应,对试剂的检测范围都有局限性,不能满足临床样本对试剂的需要。钩状效应即HOOK效应,是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象,其中抗体过量叫做前带效应;抗原过量叫做后带效应。抗原抗体特异性反应时,生成结合物的量与反应物的浓度有关。例如,当标本中待测抗原浓度相当高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。消除免疫胶体金检测中钩状效应的方法有稀释法即同时检测稀释前和稀释后的待测样本,若稀释后的浓度值乘以相应稀释倍数所得的浓度值远远大于稀释前的浓度值,则该样本出现钩状效应,最终浓度值需要多次稀释后取其最大浓度值;反之稀释前的浓度值则为最终浓度值。专利CN105044332A能监测高浓度样本在免疫胶体金试验中是否存在HOOK效应,若不存在HOOK效应则直接显示结果,若出现HOOK效应则需要稀释高浓度样本 ...
【技术保护点】
一种扩宽免疫胶体金检测范围的方法,其特征在于:分别在t0.5和t时间时使用免疫层析判读记录仪测定胶体金测试条的反应线T线的信号值GOD0.5和GOD值,t表示完全反应的时间,t0.5表示完全反应时信号值一半的时间,当GOD/GOD0.5>1.5时判定为未出现钩状效应,按直线回归方程对检测结果的信号值进行浓度值计算,当GOD/GOD0.5<1.5时判定为出现钩状效应,按照logistic曲线拟合四参数法方程对检测结果的信号值进行浓度值的计算。
【技术特征摘要】
1.一种扩宽免疫胶体金检测范围的方法,其特征在于:分别在t0.5和t时间时使用免疫层析判读记录仪测定胶体金测试条的反应线T线的信号值GOD0.5和GOD值,t表示完全反应的时间,t0.5表示完全反应时信号值一半的时间,当GOD/GOD0.5>1.5时判定为未出现钩状效应,按直线回归方程对检测结果的信号值进行浓度值计算,当GOD/GOD0.5<1.5时判定为出现钩状效应,按照logistic曲线拟合四参数法方程对检测结果的信号值进行浓度值的计算。2.根据权利要求1所述的扩宽免疫胶体金检测范围的方法,其特征在于:所述免疫层析判读记录仪为中新科炬生物制药股份有限公司生产的编号为NS3001和NS7001的免疫层析判读记录仪。3.根据权利要求1所述的扩宽免疫胶体金检测范围的方法,其特征在于:免疫胶体金未发生钩状效应的区域和发生钩状效应的区域的标准曲线是通过以下方法确定的:(i)分别用浓度为不同浓度的标准品对试剂在t和t0.5时间内进行测定,不同浓度的标准品显示出不同强度色带,用免疫层析判读记录仪将相应强度的色带转化成信号值,所得出的信号值符合GOD/GOD0.5>1.5时,小于该...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈逸桐,周洪锐,李昀地,杨延瑞,宋兆瑞,魏华英,李洲,
申请(专利权)人:天津中新科炬生物制药股份有限公司,
类型:发明
国别省市:天津,12
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