中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。本发明专利技术，主要探究山茱萸和三七醇提物对溶菌酶成纤维的影响，以期为防治淀粉样沉积疾病寻找到新的有效的治疗药物。本发明专利技术结果显示三七、山茱萸醇提物组的荧光强度与正常的单独培养组相比均呈现明显下降，表明两者都能起到抑制淀粉样蛋白成纤维的作用。

Application of alcohol extracts from traditional Chinese medicine in the preparation and treatment of amyloid diseases

The invention relates to the application of alcohol extract of traditional Chinese medicine in the preparation of drugs for treating and preventing amyloid diseases. The present invention, mainly to explore the dogwood and 37 alcohol extract fiber effect on lysozyme, in order to find new treatment for the prevention and treatment of amyloid deposition diseases. The result shows that the fluorescence intensity of 37, Fructus Corni ethanol extract group and normal group were cultured alone showed a marked decline, indicating that both can play a role in inhibition of amyloid fiber.

【技术实现步骤摘要】
中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用
本专利技术涉及医药保健品领域；具体涉及中药醇提物在抑制淀粉样蛋白成纤维中的应用。
技术介绍
生物体中通常只有正确折叠并具有精确空间结构的蛋白质才能正常行使其生命功能，如辅助分子跨膜运输、参与细胞的生长与分化等；然而活体细胞中只有部分蛋白质能够正确的自发折叠，多数蛋白质的有效折叠和转运过程必须有分子伴侣、辅助伴侣等复杂调控因子的参与，以避免初期天然多肽链或蛋白质在环境因素影响下发生错误折叠而聚集沉积。淀粉样蛋白是指由于其构象改变而丧失正常的功能、结构，导致在细胞内外形成聚集，并最终在特定组织中形成淀粉样纤维沉积物的一类蛋白质。与蛋白正常构象改变而导致错误折叠有关的疾病被称为淀粉样蛋白相关疾病，因此该类疾病又被称为“蛋白质错误折叠疾病”。人体对蛋白聚集体的清除能力通常会因为疾病和衰老而降低，这就导致了错误折叠、错误组装的蛋白会随生理条件的恶化而增加，最终诱发淀粉样蛋白相关疾病的发生。迄今发现的淀粉样疾病多达50多种，其中包括神经退行性疾病(如帕金森综合征、阿尔兹海默症、疯牛病等)及各类全身性蛋白质沉积疾病(如二型糖尿病等)。人类基因组序列数据显示，与淀粉样疾病相关的变异外显子大约包含有60000个核苷酸序列，这导致了更多的淀粉样蛋白的产生。调查显示近年来淀粉样蛋白疾病的发病率日趋增加还与人寿命延长有关，随着年龄的增加机体内各种酶及分子伴侣数目降低、活性减弱，这些因素都导致本应具有正常结构的功能蛋白发生结构改变产生错误折叠从而在胞内外沉积。面对这一现状必须积极寻求有效治疗手段，以求达到预防减缓甚至逆转这些疾病的目的，这其中针对多种淀粉样疾病致病机制的一个共同的防范切入点就是防止蛋白质聚集。然而，目前针对淀粉样疾病的主流疗法是化学药物治疗，这类方法不可避免的存在耐药性及机体耐受度的问题。面对这一进退维谷的窘境，纯天然的本草类药物重新进入人们的视野。我国以天然动植物、矿物入药的历史悠久，而且具有丰富的中草药资源，《中国药典》中收录中草药共计有12807种。当今中医药在治疗人类疾病特别是心脑血管疾病、疑难病症和癌症等方面，发挥着重要作用，而提倡自然疗法，返朴归真在现今的欧美己越来越成为一种趋势。
技术实现思路
本专利技术的目的是对中药治疗淀粉样蛋白疾病的应用范畴进行探讨，以期为淀粉样蛋白疾病的预防和治疗寻找到新的治疗药物。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。优选的，中药醇提物在制备抑制淀粉样蛋白成纤维的药物中的应用。上述的应用，所述的淀粉样蛋白是溶菌酶。上述的应用，所述的中药醇提物是山茱萸醇提物或三七醇提物。上述的应用，所述的山茱萸醇提物的制备方法是：称取山茱萸粉末，以75％乙醇浸泡溶解后，75-85℃回流两次，每次1-2小时；收集滤液，滤液以旋转蒸发仪减压浓缩至无乙醇味，烘干。上述的应用，所述的三七醇提物的制备方法是：称取三七粉末，以75％乙醇浸泡溶解后，75-85℃回流两次，每次1-2小时；收集滤液，滤液以旋转蒸发仪减压浓缩至无乙醇味，烘干。上述的应用，所述的三七醇提物的制备方法是：称取三七粉末，以75％乙醇浸泡溶解后，于45-55℃、120转/分，进行温浴与震荡，过夜浸取，抽滤，滤液以旋转蒸发仪减压浓缩至无乙醇味，烘干。山茱萸又被称为药枣、枣皮、芋肉、鸡足、肉枣、石枣、蜀枣，是山茱萸科落叶小乔木或者灌木山茱萸的成熟果肉。栽培范围分布广泛，尤其以河南南阳更为集中。中国现存最早的本草专著《神农本草经》中记载：山茱萸“主心下邪气寒热，温中逐寒湿痹，去三虫”。性温而味酸。归肝、肾经。可补益肝肾，有涩精固脱之功效。对于肝肾亏虚导致的崩漏带下、腰膝酸软、遗精遗尿、体虚大汗等症有很好的治疗作用。《医学衷中参西录》中记载：“山茱萸收敛元气，固涩滑脱，振作精神，收涩之中兼具条畅之性，故又通利九窍，流通血脉，治疗肝虚自汗，内风萌动，与其他酸敛之药不同，收敛正气而不敛泄气”。《仙授理伤续断秘方》有“加味四物汤”，以白芍、当归等搭配山茱萸来实现养肝血，补肾固精的目的。山茱萸中的有效成分有萜类、鞣质、有机酸、黄酮、挥发性物质等多种，近现代医学中多用于抗炎、抗氧化、神经及心血管保护、糖尿病防治等方面；现有技术中主要作为一种传统抗衰老的名贵中药，其在老年病防治方面的潜力有待于进一步挖掘。三七又名田七、金不换、参三七、血参等，是五加科人参属的植物，在我国主要分布在西南地区。三七的药用历史已有600多年，且全株各部分均可入药，历代典籍多有记载，如《医门秘旨》、《跌损妙方》和《本草纲目》中详细记载，三七可消肿止痛、止血化瘀、散热，同时还在抗疲劳，抗休克，改善微循环，治疗心绞痛、冠心病、动脉硬化、中风等多方面发挥作用。近代研究表明三七总皂苷是其主要活性成分。作为我国传统的名贵药材，三七生物学特性方面的研究也已十分详实。溶菌酶是通过交联β折叠片机制成纤维的典型代表。如由人溶菌酶蛋白突变而导致的遗传性非神经性系统性淀粉样疾病是一种典型的淀粉样疾病，由于溶菌酶在机体中存在范围广泛，因而更有研究意义。同时鸡溶菌酶与人溶菌酶相比具有高度相似性，序列方面的相似度可达70％，高级结构也十分相似。鸡溶菌酶又同时具有出色的溶剂溶解性，方便经济的特点，因此是人溶菌酶的优良替代模型。溶菌酶的成纤维过程伴随着β折叠片的增多，最终导致结合的硫黄素T被440nm波长的激发光所激发，在480nm左右产生发射光，并伴有很大程度上的荧光增强。本专利技术的有益效果是：本专利技术，探究了中药山茱萸和三七的乙醇提物对淀粉样蛋白(如溶菌酶)成纤维的影响。结果显示三七、山茱萸醇提物作用组的荧光强度与正常组相比均呈现明显下降，表明它们都能通过显著延长成核期而起到抑制蛋白成纤维的作用。山茱萸醇提物的最佳抑制浓度约为1mg/mL；三七醇提物表现出浓度依赖性，其IC50值约为0.63mg/mL。另外不同提取方法的结果表明过夜浸取法制备的三七醇提物抑制活性高于乙醇回流提取法，即过夜浸取更有利于维持药物活性。附图说明图1是山茱萸醇提物各浓度对溶菌酶成纤维的作用效果图。图2是培养7天时，山茱萸醇提物各浓度对溶菌酶成纤维的作用效果图。图3是山茱萸醇提物与杨梅素对溶菌酶成纤维的作用效果比较图。图4是单独山茱萸醇提物的ThT荧光检测图。图5是以过夜浸取法制备的三七醇提物对溶菌酶成纤维的作用效果图。图6是以乙醇回流法制备的三七醇提物对溶菌酶成纤维的作用效果图。图7是培养10天时，三七醇提物各浓度对溶菌酶成纤维的作用效果图。图8是不同制备方式的三七醇提物与杨梅素对溶菌酶成纤维的作用效果比较图。图9是单独三七醇提物的ThT荧光检测图。具体实施方式实施例1山茱萸醇提物抑制溶菌酶成纤维的研究(一)山茱萸醇提物用乙醇回流法提取：称取5g山茱萸粉末，以75％乙醇150mL浸泡溶解；80℃回流两次，每次1.5小时；抽滤，滤液以旋转蒸发仪50℃减压浓缩至无乙醇味；50℃烘干，所得山茱萸醇提物收集入EP管，封口；-20℃贮存。(二)溶液配制1、鸡溶菌酶以50mM、pH2.0的甘氨酸-盐酸溶成终浓度为1mg/mL(现用现溶)；2、山茱萸醇提物以二甲基亚砜(DNSO)溶成浓度为50mg/mL的母液，放入-20℃冰箱存储待本文档来自技高网...

【技术保护点】
中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，中药醇提物在制备抑制淀粉样蛋白成纤维的药物中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的淀粉样蛋白是溶菌酶。4.根据权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于，所述的中药醇提物是山茱萸醇提物或三七醇提物。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的山茱萸醇提物的制备方法是：称取山茱萸粉末，以75％乙醇浸泡溶解后，75-85℃回流两次，每次1-2小时；收集滤液，滤液以旋转蒸发仪减压浓缩至无乙醇味，烘干。6.根据权利要求4所述的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：何剑为，刘俊清，孙越，周雪洁，孙永辉，
申请(专利权)人：辽宁大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21