一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法技术

本发明专利技术公开了一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法，对好氧颗粒污泥反应器出水中的群体感应信号分子实现高效浓缩。该方法将反应器出水经0.45μm玻璃纤维滤膜过滤，然后与二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯等有机溶剂按一定体积比混合，将信号分子从水相转移到有机相中，实现信号分子初步富集，萃取后的溶液通过旋转蒸发仪减压蒸馏，实现信号分子的初步浓缩，减压蒸馏所用蒸发瓶经相应有机溶剂充分洗涤后与蒸馏剩余溶液经氮吹吹干，并根据测试条件利用相应有机溶剂对氮吹后的固体定容，实现信号分子的高效富集。该方法操作简便、信号分子回收率高，可有效解决信号分子浓缩过程中减压蒸馏溶液难收集的问题，是一种改进的高效信号分子提取方法。

【技术实现步骤摘要】
一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法
本专利技术涉及一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法，属于废水生物处理领域。
技术介绍
群体感应是微生物细胞间主要的信息传递方式，微生物根据自身种群密度、环境因子变化分泌一种或多种信号分子，通过扩散、转运蛋白作用进入细胞并结合特异蛋白，进而调控下游功能基因表达实现生物膜形成、致病因子分泌、生物荧光等生命活动。信号分子主要分为三类，分别为作用于革兰氏阴性菌之间的N-酰基高丝氨酸内酯(Acyl-HomoserineLactone,AHL)、作用于革兰氏阳性菌之间的多肽类物质和同时作用于革兰氏阳性菌和阴性菌之间的AI-2物质(4,5-二羟基-2,3-二戊酮为前体物质，发生重排和自发反应形成)，这三类信号分子能产生作用，都必须满足一下三个条件：1○信号分子达到临界浓度；2○信号分子合成酶高活性；3○信号分子的受体蛋白浓度高。好氧颗粒污泥作为生物膜的特殊存在形式，其功能菌群多数为革兰氏阴性菌，因此AHL类信号分子对颗粒污泥形成和体系稳定运行有重要调节作用，在好氧颗粒污泥领域研究最广泛。目前多利用感应微生物、薄层层析法、HPLC-MS/MS等方法对体系本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：收集SBR反应器运行周期中出水阶段的全部泥水混合物，经过沉淀后再通过装有0.45μm玻璃纤维滤膜的玻璃砂芯滤器过滤；步骤2：取经过过滤的液体并置于梨形分液漏斗中，加入有机溶剂作为萃取剂，利用分液漏斗振荡器进行振荡，萃取重复若干次，收集有机相；步骤3：通过旋转蒸发仪连续进料口将收集的有机相吸入蒸发瓶中至有机相蒸干，取萃取剂充分洗涤蒸发瓶若干次，洗涤液体收集至离心管中；步骤4：将所述离心管置于氮吹仪上，氮吹过程中不断调节氮吹针高度，使离心管内液面处于震动状态，直至离心管内液体吹干；然后利用溶剂对氮吹后的固体进行定容，完成S...

【技术特征摘要】
1.一种高效提取微生物群体感应信号分子的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：收集SBR反应器运行周期中出水阶段的全部泥水混合物，经过沉淀后再通过装有0.45μm玻璃纤维滤膜的玻璃砂芯滤器过滤；步骤2：取经过过滤的液体并置于梨形分液漏斗中，加入有机溶剂作为萃取剂，利用分液漏斗振荡器进行振荡，萃取重复若干次，收集有机相；步骤3：通过旋转蒸发仪连续进料口将收集的有机相吸入蒸发瓶中至有机相蒸干，取萃取剂充分洗涤蒸发瓶若干次，洗涤液体收集至离心管中；步骤4：将所述离心管置于氮吹仪上，氮吹过程中不断调节氮吹针高度，使离心管内液面处于震动状态，直至离心管内液体吹干；然后利用溶剂对氮吹后的固体进行定容，完成SBR反应器出水中群体感应信号分子的提取和富集。2.如权利要求1所述的高效提取微生物群体感应信号分子的方法，其特征在于，所述的步骤1中泥水混合物预先经过1-2min沉淀...

【专利技术属性】
技术研发人员：张智明，俞卓栋，朱亮，徐向阳，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33