The present invention provides a catalytic synthesis of phosphatidylserine enzyme and its preparation method and the application of the biological enzyme for the amino acid sequence of SEQID is shown in NO:2. The bio enzyme preparation, gene engineering strain first constructed biological enzyme, the total gene synthesis enzyme gene fragments using restriction endonuclease Sal linearized recombinant plasmid for expression of biological enzyme, biological enzyme after further fermentation for catalytic synthesis of phosphatidylserine, the specificity of phosphatidylserine synthase lecithin and preparation, the catalytic serine phosphatidylserine, the conversion rate of 80%, effectively solve the extraction and chemical synthesis method to obtain high purity of phosphatidylserine, and the process is stable and reliable, high efficiency, suitable for industrialized production and has great application potential in the field of medicine and health food.
【技术实现步骤摘要】
一种催化合成磷脂酰丝氨酸的生物酶及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种合成磷脂酰丝氨酸的方法,尤其是采用高效的生物酶催化和现代化的分离技术的磷脂酰丝氨酸合成方法,具体是一种催化合成磷脂酰丝氨酸的生物酶及其制备方法和应用。
技术介绍
磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine简称PS),又称丝氨酸磷脂,二酰甘油酰磷酸丝氨酸,是一类普遍存在的磷脂,通常位于细胞膜的内层,磷脂化学物中的磷酸甘油酯类,是细胞膜组分之一,与一系列的膜功能有关。尤其在人体的神经系统,是大脑的细胞膜的重要组成成分之一,同时对大脑的各种功能(尤其是对大脑的记忆力和情绪的稳定)起到重要的调节作用,如它能影响着细胞膜的流动性、通透性,并且能激活多种酶类的代谢和合成。具有重要的功能与作用:延缓衰老、维持机体健康年轻、强化脑部功能、增强记忆力、运动员等的营养必需品、治疗多动症儿童、促进血液循环、分解过高的血脂和过高的胆固醇、清扫血管,使血管顺畅,从而减轻脂肪肝的发病率,有“血管清道夫”的美誉。目前工业化生产磷脂酰丝氨酸的制备方法主要有提取法和酶转化法,其中提取法主要是从植物细胞、动物的卵磷脂中提取PS,植物中的PS含量较少,所以提取法以动物的卵磷脂中提取为主,从动物中提取主要是动物的大脑及内脏,目前国外大部分以牛、羊、兔、马、驴等家禽的动物脑为原料来提取PS。近年来,由于疯牛病的等动物疾病的原因,利用动物细胞提取PS的方法,其提取的产品的安全性收到人们的怀疑,现在已处于淘汰边缘。
技术实现思路
为了解决以上问题,本专利技术的第一个目的在于提供一种催化合成磷脂酰丝氨酸的生物酶。本专利技术的第二个 ...
【技术保护点】
一种催化合成磷脂酰丝氨酸的生物酶,其特征在于:所述生物酶为SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.一种催化合成磷脂酰丝氨酸的生物酶,其特征在于:所述生物酶为SEQIDNO:2所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述催化合成磷脂酰丝氨酸的生物酶,其特征在于,所述生物酶来源于体外重组构建的基因工程菌株;所述基因工程菌株为大肠杆菌、毕氏酵母、枯草芽孢杆菌。3.一种编码权利要求1所述的生物酶的核苷酸序列,其特征在于:所述核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。4.一种权利要求1所述的生物酶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:首先构建磷脂酰丝氨酸酶的基因工程菌株,将权利要求2所述的核苷酸序列经酶切重组到表达载体,转化到宿主细胞中;将阳性克隆挑入YPD液体培养基中活化后转入BMGY液体培养基中,培养,最后经发酵培养,得到催化合成磷脂酰丝氨酸的生物酶。5.一种权利要求1所述的生物酶催化合成磷脂酰丝氨酸的方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)向反应釜中加入大豆卵磷脂,L-丝氨酸,醋酸钠,氯化钙,纯化水搅拌溶解;其中大豆卵磷脂的投料量为50~500g/L,L-丝氨酸的投料量为10~500g/L,醋酸钠的投料量为10~100g/L,氯化钙的投料量为1~100g/L;(2)采用抽真空氮气置换的方法置换反应体系中的空气,置换...
【专利技术属性】
技术研发人员:祝俊,黄科学,余玉奎,吴锋,张超,徐飞,孙锦龙,
申请(专利权)人:江苏诚信药业有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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