一种二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法技术

本发明专利技术公开一种二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，包括如下步骤：步骤一：准备步骤：色谱条件：采用紫外可见光检测器及ultimate XB‑C18色谱柱，检测波长240nm，柱温35℃，流速0.9ml/min，流动相为甲醇‑水比为68∶32，进样量15μL；供试品溶液的配制：取二氟泼尼酯适量，加流动相配置成5mg/ml的溶液，作为供试品溶液；步骤二：纯度测定：取供试品溶液注入色谱仪，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。与现有技术相比，本发明专利技术的二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，简单准确，灵敏度高，可有效的对二氟泼尼酯的纯度进行检测。

A method for the determination of chromatographic purity difluprednate.

The determination method of the invention discloses a chromatographic purity of two fluorine predni ester, which comprises the following steps: step one: preparation steps: chromatographic conditions: using UV visible detector and ultimate XB C18 column. The detection wavelength was 240nm. The column temperature was 35 degrees, the flow rate of 0.9ml/min, the mobile phase of methanol water ratio is 68 sample size: 32, 15 L; test preparation solution: two fluorine predni ester amount, plus the mobile phase configuration into 5mg/ml solution as the test solution; step two: purity determination: take the test solution into the chromatograph, recording 2 times to two, on the chromatogram of fluorine ester the peak retention time, by adjusting the appropriate instrument integral parameter, calculated chromatographic purity area normalization method. Compared with the prior art, chromatographic purity of two fluorine predni ester of the invention of the determination method is simple and accurate, high sensitivity, can be effective for two fluorine purity detection predni ester.

【技术实现步骤摘要】
一种二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法
本专利技术涉及物质纯度测定领域，确切地说是一种二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法。
技术介绍
二氟泼尼酯亦称二氟孕甾丁酯或地氟孕甾丁酯，其眼用乳剂商品名为“Durezol”，是由SirionTherapeutics公司研究开发，于2008年6月23日通过优先审批程序获得FDA批准。该药为局部使用的眼科专科用药，可用于治疗眼科手术后出现的炎症和疼痛。二氟泼尼酯属肾上腺皮质激素类药物，是泼尼松龙的二氟衍生物，具有较强的抗炎镇痛作用，能够抑制与炎症相关的水肿、纤维素沉积、毛细血管扩张、白细胞迁移、毛细血管增生、成纤维细胞增生、胶原蛋白沉积以及疤痕形成等。其化学名为6α，9α-氟-11β-羟基-4-烯-孕甾-3，20-二酮-17-丁酸酯-20-乙酸酯，分子式：C27H34F2O7，分子量：508.56。二氟泼尼酯在合成和储藏的过程中可能会有原料残留或其他杂质，再或者其他降解产物；此检测方法采用C18色谱柱有效的检测二氟泼尼酯的纯度，对合成和制剂的质量控制方面有重要意义。有关二氟泼尼酯的测定，有如下几种：期刊《中国药房》2013年第24卷第25期中提到用ShimadzuVP-ODS(250mm×4.6mm，5μm)的色谱柱，50∶50的甲醇水做流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm；进样量15μL，作为二氟泼尼酯的检测方法。缺点：这种方法主峰出峰较晚，分离效果不理想期刊《食品与药品》2012年第14卷第11期中采用SHIMADZUVP-ODSC18(150mm×4.6mm，5μm)色谱柱，流动相为甲醇-水(52∶48)，检测波长240nm，流速1.0ml/min，柱温35℃。缺点：这种方法出峰峰形较差，理论塔板数较低。国内已有专利CN103364502A采用醋酸钠缓冲液(用醋酸调节pH至3.5)-甲醇-乙腈(60∶30∶10)做流动相，1.0ml/min的流速。缺点：此方法流动相配制复杂，耗费时间长。现在的二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，都存在不足，需要改进。
技术实现思路
针对上述缺陷，本专利技术解决的技术问题在于提供一种二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，简单准确，灵敏度高，可有效的对二氟泼尼酯的纯度进行检测。为了解决以上的技术问题，本专利技术的二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，包括如下步骤：步骤一：准备步骤色谱条件：采用紫外可见光检测器及ultimateXB-C18色谱柱，检测波长240nm，柱温35℃，流速0.9ml/min，流动相为甲醇-水比为68∶32，进样量15μL；供试品溶液的配制：取二氟泼尼酯适量，加流动相配置成5mg/ml的溶液，作为供试品溶液；步骤二：纯度测定取供试品溶液注入色谱仪，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。优选地，在步骤一中，所述ultimateXB-C18色谱柱的规格为250mm×4.6mm，5μm。优选地，在步骤一中，色谱柱采用纯水作为流动相的无机相。与现有技术相比，本专利技术的二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，简单准确，灵敏度高，可有效的对二氟泼尼酯的纯度进行检测。本专利技术的二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法的具体优点如下：主峰出峰适宜，分离效果较理想；出峰峰形较好，理论塔板数较高；流动相配制简单，耗费时间短。附图说明图1为采用甲醇-水比为68∶32作流动相，0.9ml/min的流速，检测波长240nm的检测图谱；图2为图1的峰表结果；图3为甲醇-水(50∶50)作流动相的图谱；图4为采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水比为68∶32作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm的色谱图；图5为图4的峰表结果；图6为采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水(60∶40)作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm的分离色谱图；图7为图6的峰表结果；图8为采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水(65∶35)作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm条件的色谱图；图9为图8的峰表结果；图10为采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水(70∶30)作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm的色谱图；图11为图10的峰表结果；图12为流动相为甲醇-水比为68∶32的条件下所检出的色谱图。具体实施方式为了本领域的技术人员能够更好地理解本专利技术所提供的技术方案，下面结合具体实施例进行阐述。本案将可由以下的实施例说明而得到充分了解，使得熟习本技艺之人士可以据以完成之，然本案之实施例并非可由下列而被限制其实施型态。实施例1仪器：Waters2695(2487紫外可见光检测器，Empower3色谱工作站)，精密量取15μL供试品溶液注入色谱仪，采用甲醇-水比为68∶32作流动相，0.9ml/min的流速，检测波长240nm，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。检测结果显示在此色谱条件下二氟泼尼酯出峰时间适中，约在25min出峰，峰形良好，参见附图1，分离度为20.56，参见附图2。而用甲醇-水(50∶50)作流动相时，在60min内没有出峰，主峰在下一个样品中出峰，且其基线不稳，时有波动，出峰时峰形较差，参见附图3。实施例2精密量取15μL供试品溶液注入色谱仪，选定以下色谱条件进行检测：采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水比为68∶32作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。检测结果显示在此色谱条件下二氟泼尼酯出峰时间适中，峰形良好，参见附图4，分离度为佳，参见附图5。实施例3精密量取15μL供试品溶液注入色谱仪，选定以下色谱条件进行检测：采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水(60∶40)作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。检测结果显示在此色谱条件下二氟泼尼酯出峰时间适中，峰形良好，参见附图6，分离度为佳，参见附图7。实施例4精密量取15μL供试品溶液注入色谱仪，选定以下色谱条件进行检测：采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水(65∶35)作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。检测结果显示在此色谱条件下二氟泼尼酯出峰时间适中，峰形良好，参见附图8，分离度为佳，参见附图9。实施例5精密量取15μL供试品溶液注入色谱仪，选定以下色谱条件进行检测：采用C18的色谱柱，柱温35℃，甲醇-水(70∶30)作流动相，1.0ml/min的流速，检测波长240nm，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。检测结果显示在此色谱条件下二氟泼尼酯出峰时间适中，峰形良好，参见附图10，分离度为佳，参见附图11。实施例6灵敏度测定(1)供试品溶液的配制：取二氟泼尼酯适量，加流动相配置成5mg/ml的溶液，作为供试品溶液。(2)在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：准备步骤色谱条件：采用紫外可见光检测器及ultimate XB‑C18色谱柱，检测波长240nm，柱温35℃，流速0.9ml/min，流动相为甲醇‑水比为68∶32，进样量15μL；供试品溶液的配制：取二氟泼尼酯适量，加流动相配置成5mg/ml的溶液，作为供试品溶液；步骤二：纯度测定取供试品溶液注入色谱仪，记录色谱图至二氟泼尼酯主峰的2倍保留时间，通过调整适当仪器积分参数，面积归一化法计算得出色谱纯度。

【技术特征摘要】
1.一种二氟泼尼酯的色谱纯度测定方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：准备步骤色谱条件：采用紫外可见光检测器及ultimateXB-C18色谱柱，检测波长240nm，柱温35℃，流速0.9ml/min，流动相为甲醇-水比为68∶32，进样量15μL；供试品溶液的配制：取二氟泼尼酯适量，加流动相配置成5mg/ml的溶液，作为供试品溶液；步骤二：纯度测定取供试品溶液注入色...

【专利技术属性】
技术研发人员：田元，周胜安，覃宇东，邓琦，李金霞，许志国，
申请(专利权)人：广州仁恒医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44