一种表达抗冻肽的食品级乳酸菌表达系统构建及其应用技术方案

本发明专利技术公开了一种表达抗冻肽的食品级乳酸菌表达系统构建及其应用，具体的本发明专利技术公开了一种可以表达抗冻肽的食品级乳酸菌表达系统的制备方法，首先将人工合成的抗冻肽编码基因构建于克隆载体上；获得的重组质粒，酶切后连接到带Nisin抗性基因nis

Construction and application of a food grade lactic acid expression system expressing antifreeze peptide

The invention discloses a food grade lactic acid bacteria expression of antifreeze peptide expression construct and application specific system, the invention discloses a method for preparing food grade lactic acid bacteria can express antifreeze peptide expression system, first will build. Long vector antifreeze peptide gene encoding synthetic; recombinant plasmid obtained. After digestion with Nisin connected to the resistance gene NIS

【技术实现步骤摘要】
一种表达抗冻肽的食品级乳酸菌表达系统构建及其应用
本专利技术属于生物与食品
，具体地本专利技术设计一种可以表达抗冻肽的食品级乳酸菌的制备方法及其抗冻活性的表征，更具体地本专利技术涉及一种新型冷冻干燥保护剂抗冻肽在乳酸菌食品级表达系统上的构建和应用。
技术介绍
抗冻肽(antifreezepeptide，AFP)是一些低温生物为适应极端寒冷环境而产生的一类多肽或糖肽。AFP具有特殊的抗冻活性，主要表现为：(1)能结合到冰晶表面并抑制冰晶进一步生长；(2)能以非依数形式降低溶液的冰点，使溶液的熔点和冰点之间出现差值，表现为热滞活性；(3)具有冰重结晶抑制效应。由于AFP特殊的抗冻作用可使零下低温环境下存活的生物避免受到细胞间形成冰晶引起的损伤或致死作用，因此近年来AFP的资源开发及其应用引起了广泛关注，并发现在冷冻食品加工与储藏、细胞保藏、抗冻农作物栽培、渔业养殖、器官移植和冷冻手术等领域开发中具有诱人的商业应用前景。由于AFP具有重要的商业应用价值，因此近年来国际上对AFP研究引起日益广泛的关注。至今人们已经从鱼类、昆虫、植物、细菌、真菌中发现了数十种抗冻蛋白，并对其结构、功能和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可以表达抗冻肽的食品级乳酸菌表达系统的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：1)将人工合成的抗冻肽编码基因构建于克隆载体上；2)克隆并提取步骤1)获得的重组质粒，酶切后获得所述抗冻肽DNA序列；3)将步骤2)获得的所述冻肽DNA序列连接到带Nisin抗性基因nis

【技术特征摘要】
1.一种可以表达抗冻肽的食品级乳酸菌表达系统的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：1)将人工合成的抗冻肽编码基因构建于克隆载体上；2)克隆并提取步骤1)获得的重组质粒，酶切后获得所述抗冻肽DNA序列；3)将步骤2)获得的所述冻肽DNA序列连接到带Nisin抗性基因nisr的表达载体，从而构建所述抗冻肽的表达质粒；4)将步骤3)获得的所述抗冻肽的表达质粒转化至乳酸乳球菌感受态细胞，利用Nisin抗性基因筛选表达所述抗冻肽的乳酸乳球菌，从而获得可以表达抗冻肽的所述食品级乳酸菌表达系统。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述抗冻肽编码基因序列如SEQIDNO.1所示。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述克隆载体为pUC57载体。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中，所述表达载体为带Nisin抗性基因nisr的乳酸乳球菌表达载体pNZ8149。5.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴金鸿，张莉，罗静，金泉，谢凡，兰小红，王正武，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海,31