The invention belongs to the field of food and pharmaceutical analysis, and in particular relates to a method for controlling the quality of Semen Cassiae polysaccharide by using a fingerprint spectrum. By using cassia seed as raw material, construction of Semen Cassia polysaccharide multidimensional fingerprint establishment of HPLC fingerprint of Semen Cassia polysaccharide GC fingerprint of Semen Cassiae, completely hydrolyzed polysaccharide by HPLC fingerprint and Semen Cassia polysaccharide under incomplete hydrolysis including, through multi fingerprint compose of fingerprint of polysaccharide of cassia seed complete. The multidimensional fingerprint can be used to control the quality of raw materials. By adopting the invention, more accurate and comprehensive quality control can be carried out for standard materials.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品、药物分析领域，具体涉及一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法。技术背景决明(SemenCassiae)属于豆科植物。决明子是豆科植物决明的干燥成熟种子，国家卫生部颁布的药食同源植物。始载于《神农草本经》，决明子被列为上品，其味甘、苦，微寒，入肝、肾经，具有降压、降脂、保肝、明目、润肠和抗菌等作用。在民间决明子有着悠久的使用历史，或泡茶饮，或炒后与其它药物配伍(于守洋，崔洪斌.中国保健食品的进展[M].北京：人民卫生出版社，2000.1)。决明子多糖是决明子中具有医疗保健作用的主要成分之一，具有清除自由基和抗氧化功能(刘娟，邓泽元，于化泓.决明子水溶性多糖的抗氧化作用[J].食品科学,2006,05：61-63；郭晓强，颜军，邬晓勇，徐光域，范春华，苟小军.决明子水溶性多糖的纯化及抗氧化活性研究[J].食品科学，2007，8：205-208)。富含多糖的决明子水提醇沉物或水提物具有显著的降压(刘菊秀，苗戎，狄俊英，郝志强.决明...
【技术保护点】
一种利用指纹图谱来有效控制决明子多糖质量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤一、构建决明子标准品多糖标准指纹图谱：选取标准决明子原料，共10批次，分别构建决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的HPLC标准指纹图谱，构建三维标准指纹图谱；所述决明子多糖GC标准指纹图谱的构建是先将决明子多糖标准品水解产物的糖腈乙酸酯衍生化，随后采用气相色谱法分析供试品溶液，最终获得决明子多糖GC指纹图谱；所述决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱的构建是先将决明子多糖标准品进行完全水解，随后进行决明子多糖标准品水解产物的...
【技术特征摘要】
1.一种利用指纹图谱来有效控制决明子多糖质量的方法，其特征在
于，所述方法包括如下步骤：
步骤一、构建决明子标准品多糖标准指纹图谱：选取标准决明子原
料，共10批次，分别构建决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完
全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的HPLC
标准指纹图谱，构建三维标准指纹图谱；
所述决明子多糖GC标准指纹图谱的构建是先将决明子多糖标准品
水解产物的糖腈乙酸酯衍生化，随后采用气相色谱法分析供试品溶液，
最终获得决明子多糖GC指纹图谱；
所述决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱的构建是先将决
明子多糖标准品进行完全水解，随后进行决明子多糖标准品水解产物的
1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(即PMP)衍生化反应，再进行高效液相色谱
的指纹分析，最终按照获得的结果绘制决明子多糖完全水解下的HPLC
标准指纹图谱；
所述决明子多糖不完全水解下的HPLC标准指纹图谱的构建是先将
决明子多糖标准品进行不完全水解，随后进行决明子多糖标准品水解产
物的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(即PMP)衍生化反应，再进行高效液相
色谱的指纹分析，最终按照获得的结果绘制决明子多糖不完全水解下的
HPLC标准指纹图谱；
步骤二、采用上述步骤一中决明子标准品多糖标准指纹图谱的确定
方法，绘制实际送样决明子的决明子多糖GC指纹图谱、决明子多糖完
全水解下的HPLC指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的HPLC指纹
图谱；
步骤三、将步骤二获得的结果分别与步骤一中的三维标准指纹图谱
进行相似度评价，当相似度均大于90％以上，则表明所述实际送样中的
决明子多糖合格。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述决明子多糖GC
标准指纹图谱的构建具体包括如下步骤：
(1)决明子多糖标准品水解产物的糖腈乙酸酯衍生化：将三氟乙酸水解
减压蒸干后的样品，依次加入10mg的盐酸羟胺和0.5ml无水吡啶，超
声溶解，于90℃恒温水浴振荡器中反应40min，反应完成后，冷却至室
温，加入0.6ml的乙酸酐，超声混匀，90℃恒温水浴振荡中反应40min，
得糖腈乙酰化衍生物，直接进气相色谱仪进行检测；
(2)采用气相色谱法分析供试品溶液：色谱柱为AgilentDB-5毛细管色
谱柱(30m×0.32mm×0.25μm)；燃气、辅助气及载气的比例为N2∶H2∶
Air=40∶45∶400ml／min；分流比：10∶1；进样量：2μL；进样口温度：220
℃；检测器温度：260℃；采用程序升温，其升温程序为：起始温度70℃，
保持8min；30℃／min升至160℃，保持19min；10℃／min升至170℃；
保持29min；10℃／min升至220℃，保持4min；在此条件下获得样品
多糖的色谱指纹图谱，以1号峰(甘露糖)为参照，计算样品中各峰的
相对保留时间，以峰面积归一化法计算样品图谱各峰的相对面积，最终
获得决明子多糖GC标准指纹图谱。
3.根据权利要求2的方法，其特征在于，所述决明子多糖GC标准
指纹图谱如下：
1号峰平均RT为1，RSD为0％；
2号峰平均RT为1.042，RSD为0.170％；
3号峰平均RT为1.090，RSD为0.511％；
4号峰平均RT为1.199，RSD为0.096％；
5号峰平均RT为1.807，RSD为0.559％；
6号峰平均RT为1.841，RSD为0.397％；
7号峰平均RT为1.964，RSD为0.505％。
4.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述经完全水解或不完全
水解的决明子多糖的HPLC标准指纹图谱的构建具体包括如下步骤：
(1)决明子多糖水解液的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化过
程：将多糖水解物用水溶解，然后转容到10ml容量瓶并定容，准确量取
定容好的多糖水解液0.2ml置于5ml具塞玻璃离心管中，依次加入0.2
ml，0.5mol／L的PMP甲醇溶液和0.2ml，0.3mol／L的NaOH溶液，超
声混匀，70℃水浴反应60min，冷至室温，加0.2ml，0.3mol／L的HCl
溶液中和，向离心管中加氯仿至2ml，高速涡旋1min，萃取剩下的PMP，
4000rpm的转速离心5min，移除下层有机相，保留上清液，采用2mL
氯仿重复萃取3次，最后小心吸出全部上清液，加水稀释定容至...
【专利技术属性】
技术研发人员：高新开，熊斌，林伟斌，龙凤，
申请(专利权)人：无限极中国有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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