一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法技术

本发明专利技术公开了一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法，包括如下步骤：把金黄色葡萄球菌菌株放入培养基内培养，然后把金黄色葡萄球菌和大肠杆菌制成合适浓度的悬浮液，再与适配体相结合利用不同的折叠方式依次进入流式细胞仪利用氩离子激光器进行荧光信号检测。与传统的检测方法相比，本发明专利技术以两组培养基先后培养金黄色葡萄球菌来提高金黄色葡萄球菌的活性和实现金黄色葡萄球菌数量的快速增加，缓冲液和激光成像便于染色后的金黄色葡萄球菌进行观察和统计，流式细胞仪顶部与计算器电性连接的氩离子激光器可以提高检测的准确性，本发明专利技术简单方便，步骤操作容易，检测周期短，精确度高，适用范围广，有利于推广和普及。

【技术实现步骤摘要】
一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法
本专利技术属于金黄色葡萄球菌
，更具体地说，尤其涉及一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法。
技术介绍
金黄色葡萄球菌，一种球形的革兰氏阳性菌，存在于空气、水、灰尘、人类或动物的皮、土壤等，是人类化脓性感染最常见的病原菌。它除了从受感染的人或动物直接接触被感染，还可以通过空气飞沫或间接接触传染如打喷噴等。由金黄色葡萄球菌引起的疾病可以从轻微的皮肤感染、脓肿到危及生命的疾病如肺炎、脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎、胃肠道感染、菌血症、败血症等。因此发展高灵敏的金黄色葡萄球菌检测方法具有重大意义。传统的金黄色葡萄球菌检测方法一般都是基于对细菌的选择性培养和富集形态，比如平板计数法、染色观察法等。然而，这些检测方法需要耗时到天，相当费时、费力。而且检测时受到的局限性多，精确度差，不适合广泛的推广和普及。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法，包括如下步骤：S1、把金黄色葡萄球菌菌株放入脑心浸液培养基内在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、把金黄色葡萄球菌菌株放入脑心浸液培养基内在34‑40摄氏度的有氧条件下过夜培养，然后再取出脑心浸液培养基培养后的金黄色葡萄球菌菌株放入LB培养基中用摇床在150rpm/min、34‑40摄氏度条件下培养3‑4小时；S2、用接种环挑取LB培养基中的金黄色葡萄球菌菌落和大肠杆菌在8000‑12000rpm/min的离心机内离心3‑7分钟，随后用缓冲洗1‑3次，离心吸弃上清；S3、将核酸适配体均匀搅拌后用四种折叠方式保存，然后使用四种折叠方式的核酸适配体分别加入金黄色葡萄球菌菌落溶液和大肠杆菌溶液与缓冲液补充孵育体系，冰上25‑...

【技术特征摘要】
1.一种金黄色葡萄球菌的流式细胞术检测方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、把金黄色葡萄球菌菌株放入脑心浸液培养基内在34-40摄氏度的有氧条件下过夜培养，然后再取出脑心浸液培养基培养后的金黄色葡萄球菌菌株放入LB培养基中用摇床在150rpm/min、34-40摄氏度条件下培养3-4小时；S2、用接种环挑取LB培养基中的金黄色葡萄球菌菌落和大肠杆菌在8000-12000rpm/min的离心机内离心3-7分钟，随后用缓冲洗1-3次，离心吸弃上清；S3、将核酸适配体均匀搅拌后用四种折叠方式保存，然后使用四种折叠方式的核酸适配体分别加入金黄色葡萄球菌菌落溶液和大肠杆菌溶液与缓冲液补充孵育体系，冰上25-35min后，洗涤重悬；S4、接着将孵育后的四组金黄色葡萄球菌和大肠杆菌悬浮液分别用SYBRGreenI染料在20-25摄氏度下染色10-20分钟；S5、打开流式细胞仪并调整分析面的电压模式和电压、直方图的电压和阀值，四组金黄色葡萄球菌和大肠杆菌悬浮液依次放入流式管并插入流式细胞仪的进样口处；S6、最后用激光共聚焦显微镜成像技术观察分析荧光信...

【专利技术属性】
技术研发人员：胥振国，蔡玉华，蒋斌，严从权，宫斌，
申请(专利权)人：胥振国，
类型：发明
国别省市：安徽,34