用于生成卵清蛋白的方法和组合物技术

本文提供了用于生产卵清蛋白的组合物、蛋白质、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、试剂盒和系统，以及它们的使用方法。

Methods and compositions for the production of ovalbumin

Compositions, proteins, polynucleotides, expression vectors, host cells, kits and systems for the production of ovalbumin, and methods for their use are provided.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于生成卵清蛋白的方法和组合物交叉引用本申请要求提交于2014年11月11日的第62/078,385号美国临时申请的权益，其通过引用而并入本文。专利技术背景消费者对注重健康的快餐选择的需求的不断增长使得近年来对蛋清的需求呈现历史新高。最近快餐连锁店推出的“健康选择”菜单项目的成功(例如，麦当劳的“蛋清喜悦”早餐三明治)以及日益增长的对冠心病与过量胆固醇摄入之间联系的认识已使得消费者规避胆固醇丰富的蛋黄而倾向于蛋白质相对较多、碳水化合物较少的蛋清制品。这一趋势使得全球干燥蛋白库存处于历史低位，同时液体蛋清的成本在2013年上涨了80％。随着2014年7月的价格与去年同期相比翻了一倍，并且达到2012年的三倍，预计这一趋势将持续下去。价格的急剧上涨尤其影响了蛋清是关键成分的成品食物的制造商(例如，烘焙混合物的制造者)。鸡蛋蛋白质生产的无鸡蛋替代品旨在为最终承担生产商努力降低成本以及满足日益增长的全球需求的压力的产蛋鸡的恶劣条件提供解决方案。除了越来越有健康意识的消费者基础之外，人们普遍认识到母鸡所经受的大规模工业孵化场实践的不人道的状况，关于它们复杂社会行为的能力的科学共识以及工厂养殖母鸡相对于散养产蛋鸡的明显压力的证据都支持该认识。这种对工业孵化场不人道的方面的厌恶可能会促使人们接受并最终倾向于无动物成分蛋清替代品，而非工厂养殖的鸡蛋。无动物成分鸡蛋蛋白质生产的潜力不依赖于产蛋鸡的生产能力，并且不受由广泛的疾病暴发或原料的短缺或价格上涨造成的市场不确定性的影响。此外，正如世界各地最近爆发的禽类传播疾病所提示的，禽类向人类传播疾病的风险因依赖于频繁人类接触和密集母鸡群体的维护的养殖实践而加剧。采用无动物方法进行鸡蛋蛋白质生产可被视为针对未来禽类向人类传播疾病的风险的保护措施。亟需使生产和价格分别与世界范围的鸡蛋库存和价格变动的不确定性脱钩的、替代的无鸡蛋卵清蛋白生产方法。这样的方法对于例如希望将蛋清选择纳入其菜单的快餐连锁店以及基于蛋清的食品混合物的制造商将会是有吸引力的选择。
技术实现思路
在一方面，本公开内容提供了生产卵清蛋白组合物的方法，所述方法包括：重组地表达两种或更多种卵清蛋白；以及混合所述两种或更多种卵清蛋白。在一些实施方案中，所述卵清蛋白可选自卵白蛋白、卵转铁蛋白(ovotransferrin)、卵类黏蛋白、G162MF167A卵类黏蛋白、卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、α-卵黏蛋白、β-卵黏蛋白、溶菌酶、卵抑制剂(ovoinhibitor)、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、卵固蛋白(ovostatin)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、抗生物素蛋白、卵白蛋白相关蛋白X、卵白蛋白相关蛋白Y，以及它们的任意组合；诸如选自卵白蛋白、卵转铁蛋白、卵类黏蛋白、G162MF167A卵类黏蛋白、卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、溶菌酶、卵抑制剂、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、卵固蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、抗生物素蛋白、卵白蛋白相关蛋白X、卵白蛋白相关蛋白Y，以及它们的任意组合。在任一前述实施方案中，所述重组地表达所述两种或更多种卵清蛋白可在一个或多个宿主细胞中进行。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括从所述一个或多个宿主细胞分泌所述两种或更多种卵清蛋白。在任一前述实施方案中，所述重组地表达所述两种或更多种卵清蛋白可采用无细胞蛋白质合成进行。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括向所述卵清蛋白组合物中添加食品添加剂。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括对所述卵清蛋白组合物进行脱糖、稳定化或从中去除葡萄糖。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括对所述卵清蛋白组合物进行巴氏灭菌或超巴氏灭菌。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括干燥所述卵清蛋白组合物。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括酶促地、化学地或机械地消化所述两种或更多种卵清蛋白中的一种或多种。在一方面，本公开内容提供了包含一种或多种重组卵清蛋白或其片段的经加工的可消费产品。在一些实施方案中，所述一种或多种卵清蛋白可选自卵白蛋白、卵转铁蛋白、卵类黏蛋白、G162MF167A卵类黏蛋白、卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、α-卵黏蛋白、β-卵黏蛋白、溶菌酶、卵抑制剂、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、卵固蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、抗生物素蛋白、卵白蛋白相关蛋白X、卵白蛋白相关蛋白Y，以及它们的任意组合；诸如选自卵白蛋白、卵转铁蛋白、卵类黏蛋白、G162MF167A卵类黏蛋白、卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、溶菌酶、卵抑制剂、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、卵固蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、抗生物素蛋白、卵白蛋白相关蛋白X、卵白蛋白相关蛋白Y，以及它们的任意组合。在任一前述实施方案中，所述经加工的可消费产品可包含两种或更多种、三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种或者六种或更多种卵清蛋白，或它们的片段。在任一前述实施方案中，所述经加工的可消费产品可缺少一种或多种、两种或更多种、三种或更多种、五种或更多种、十种或更多种或者二十种或更多种卵清蛋白。在任一前述实施方案中，所述经加工的可消费产品可缺少卵类黏蛋白。在任一前述实施方案中，所述经加工的可消费产品可缺少一种或多种、两种或更多种、三种或更多种、五种或更多种、十种或更多种或者二十种或更多种卵黄蛋白。在任一前述实施方案中，所述经加工的可消费产品可选自食物产品、饮料产品、膳食补充剂、食品添加剂、药物产品、卫生产品及它们的任意组合，诸如选自食物产品和饮料产品。在一方面，本公开内容提供了生产可消费产品的方法，所述方法包括：重组地表达一种或多种卵清蛋白；以及将所述一种或多种卵清蛋白与一种或多种成分混合以产生可消费产品。在一些实施方案中，所述一种或多种成分可包括食品添加剂。在任一前述实施方案中，所述一种或多种成分可包括卵清蛋白。在任一前述实施方案中，所述一种或多种成分可包括重组卵清蛋白。在任一前述实施方案中，所述一种或多种成分可以不包括卵清蛋白。在任一前述实施方案中，所述一种或多种卵清蛋白可包括两种或更多种、三种或更多种、四种或更多种或者五种或更多种卵清蛋白。在一方面，本公开内容提供了用于生产卵清蛋白或其片段的方法，所述方法包括：在宿主细胞中重组地表达所述卵清蛋白或其片段，其中所述宿主细胞可包含编码所述卵清蛋白或其片段的多核苷酸，并且其中所述卵清蛋白可选自卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、α-卵黏蛋白、β-卵黏蛋白、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂，以及它们的任意组合，诸如选自卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂，以及它们的任意组合。在一些实施方案中，所述方法可进一步包括从所述宿主细胞分泌所述卵清蛋白或其片段。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括纯化所述卵清蛋白或其片段。在任一前述实施方案中，所述方法可进一步包括在所述宿主细胞中重组地表达第二卵清蛋白或其片段。在任一前述实施方案中，所述片段可包括所述卵清蛋白的至少10％、20％、30％、40％或50％。在一方面，本公开内容提供了用于生产两种或更多种卵清蛋白或其片段的方法，所述方法包括在宿主细胞中重组地表达所述两种或更多种卵清蛋白或其片段。在一些实施方案中，所述宿主细胞可包含编码所述两种或更多种卵清蛋白或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生产卵清蛋白组合物的方法，所述方法包括：重组地表达两种或更多种卵清蛋白；以及混合所述两种或更多种卵清蛋白。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.11.11 US 62/078,3851.一种生产卵清蛋白组合物的方法，所述方法包括：重组地表达两种或更多种卵清蛋白；以及混合所述两种或更多种卵清蛋白。2.如权利要求1所述的方法，其中所述卵清蛋白选自卵白蛋白、卵转铁蛋白、卵类黏蛋白、G162MF167A卵类黏蛋白、卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、溶菌酶、卵抑制剂、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、卵固蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、抗生物素蛋白、卵白蛋白相关蛋白X、卵白蛋白相关蛋白Y，以及它们的任意组合。3.如权利要求1所述的方法，其中所述重组地表达所述两种或更多种卵清蛋白在一个或多个宿主细胞中进行。4.如权利要求3所述的方法，其进一步包括从所述一个或多个宿主细胞分泌所述两种或更多种卵清蛋白。5.如权利要求1所述的方法，其进一步包括向所述卵清蛋白组合物中添加食品添加剂。6.如权利要求1所述的方法，其进一步包括对所述卵清蛋白组合物进行脱糖、稳定化或从中去除葡萄糖。7.如权利要求1所述的方法，其进一步包括对所述卵清蛋白组合物进行巴氏灭菌或超巴氏灭菌。8.如权利要求1所述的方法，其进一步包括干燥所述卵清蛋白组合物。9.如权利要求1所述的方法，其进一步包括酶促地、化学地或机械地消化所述两种或更多种卵清蛋白中的一种或多种。10.一种包含一种或多种重组卵清蛋白或其片段的经加工的可消费产品。11.如权利要求10所述的经加工的可消费产品，其中所述一种或多种卵清蛋白选自卵白蛋白、卵转铁蛋白、卵类黏蛋白、G162MF167A卵类黏蛋白、卵球蛋白G2、卵球蛋白G3、溶菌酶、卵抑制剂、卵糖蛋白、黄素蛋白、卵巨球蛋白、卵固蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、抗生物素蛋白、卵白蛋白相关蛋白X、卵白蛋白相关蛋白Y，以及它们的任意组合。12.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：大卫·安切尔，
申请(专利权)人：克莱拉食品公司，
类型：发明
国别省市：美国,US