The present invention provides a method for cryopreservation of MCF 7 breast cancer cells, the culture medium used as suction pipette, add 3 PBS washing MCF 7 breast cancer cells 2, adding 0.38% dish trypsin to cell culture, under the condition of 37 DEG C to 3 5min with 2 digestion. 3ml fresh medium, using pipette and cell culture dishes at the bottom of the 40 50 times; the liquid cell to a centrifuge tube, in 1000 under the condition of 1500g/min centrifugal 3 10min, with a pipette to remove the supernatant, adding frozen liquid, using a pipette under 40 percussion cells 50 once added to the cell freezing tube, tighten the freezing tube cover with sealing film sealing the freezing tube; save 10 30min in 2 7 C, 40 60min save in 15 20 DEG C, and then moved to less than 80 DEG C for cell cryopreservation.
【技术实现步骤摘要】
一种MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法
本专利技术属于生物技术应用领域，具体地，涉及一种MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法。
技术介绍
乳腺癌是女性最常见的癌症，主要包括导管癌和小叶癌。2016年美国CA（ACancerJournalforClinicians）公布的最新统计数据显示，美国2016年预计将有420840例女性患乳腺癌，占女性新发恶性肿瘤的38%，居女性恶性肿瘤发病率第一位，并且死亡人数将达52930例。更为严重的是全球的乳腺癌发病率正在逐年增长。细胞培养基是生物与健康相关研究领域的一项重要技术。随着生命科学的迅速发展，目前细胞培养已成为细胞生物学、分子生物学、遗传学和免疫学等学科研究的重要基础。为了深入探讨细胞的生长活动规律、有关疾病的病理和药物的药理（毒理）机制，开发具有不同针对性的细胞培养方法具有重要意义。其中，MCF-7乳腺癌细胞作为人源性低转移乳腺癌细胞，常用于乳腺癌原位生长、血管生成等乳腺癌的体内外研究。此外，MCF-7乳腺癌细胞还会同其他乳腺癌高转移性细胞进行对比研究。然而，随着研究过程中越来越多的运用组织细胞培养增殖技术，将MCF-7乳腺癌细...
【技术保护点】
一种MCF‑7乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：包括以下步骤：用移液枪将培养基吸尽，加入3‑5ml PBS洗涤MCF‑7乳腺癌细胞2‑3次，向细胞培养皿中加入1‑2ml 0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3‑5min，加入2‑3ml的新鲜的MCF‑7乳腺癌细胞专用培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底部40‑50次；将液体移至细胞离心管中，在1000‑1500g/min条件下离心3‑10min，用移液枪去除上清液，加入MCF‑7乳腺癌细胞专用冻存液，使用移液枪上下吹打MCF‑7乳腺癌细胞40‑50次，加入到细胞冻存管中，拧紧冻存管盖，用封口膜封住冻存管；在2‑7℃保存10...
【技术特征摘要】
1.一种MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：包括以下步骤：用移液枪将培养基吸尽，加入3-5mlPBS洗涤MCF-7乳腺癌细胞2-3次，向细胞培养皿中加入1-2ml0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3-5min，加入2-3ml的新鲜的MCF-7乳腺癌细胞专用培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底部40-50次；将液体移至细胞离心管中，在1000-1500g/min条件下离心3-10min，用移液枪去除上清液，加入MCF-7乳腺癌细胞专用冻存液，使用移液枪上下吹打MCF-7乳腺癌细胞40-50次，加入到细胞冻存管中，拧紧冻存管盖，用封口膜封住冻存管；在2-7℃保存10-30min，再于-15--20℃保存40-60min，然后移入到≤-80℃环境进行细胞冻存；其中所述MCF-7乳腺癌细胞专用冻存液以重量组分计，包括以下组分：二甲基亚砜5-15份、羟甲基淀粉2-5份、山梨糖3-12份、维生素C1-4份、50%高渗葡萄糖0.8-3份、丙二醇1-1.5份、(S)-(-)-1-(4-氟异喹啉-5-基）磺酰基-2-甲基-1,4-二氮环庚烷0.3-3份和基础培养基80-90份。2.根据权利要求1所述的MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：冻存的MCF-7乳腺癌细胞在≤-80℃环境过夜冻存后，第二天放入液氮罐中在液氮浸没于液氮中进行细胞冻存。3.根据权利要求1所述的MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：每支冻存管中MCF-7乳腺癌细胞冻存密度为105-106个细胞。4.根据权利要求1所述的MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：所述胰蛋白酶中还包含0.5%的EDTA。5.根据权利要求1所述的MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：所述MCF-7乳腺癌细胞专用培养基包括70-90%的基础培养基以及10-30%的胎牛血清。6.根据权利要求1或5所述的MCF-7乳腺癌细胞的冻存方法，其特征在于：所述基础培养基以重量...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱智杰，
申请(专利权)人：苏州诚晟信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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