猪胎儿成纤维细胞冻存液制造技术

本发明专利技术属于细胞保存技术领域，具体涉及一种猪胎儿成纤维细胞冻存液。该猪胎儿成纤维细胞冻存液包括以下组分：蔗糖、乙二醇、二甲基亚砜和DMEM基础培养基。本发明专利技术的细胞冻存液质量稳定，能够很好的解决由于血清品质差异导致的冻存效果不稳定难题。该细胞冻存液能够很好的缓解冻存过程中冰晶对细胞的伤害，复苏后的细胞活力达90％，电转后细胞形态和增殖活力良好，且该细胞冻存液成本低。

Porcine fetal fibroblast cell cryopreservation

The invention belongs to the technical field of cell preservation, in particular to a porcine fetal fibroblast cell freeze up liquid. The porcine fetal fibroblast cryopreservation solution consisted of the following components: sucrose, ethylene glycol, two methyl sulfoxide and DMEM basal medium. The invention has the advantages of stable quality of the cell cryopreservation liquid and good solution to the unstable storage effect caused by the difference of serum quality. The cell cryopreservation solution can alleviate the damage of ice crystal to the cell during cryopreservation, and the cell viability after resuscitation is 90%. The cell morphology and proliferation are good after the electroporation, and the cryopreservation cost of the cell is low.

【技术实现步骤摘要】
猪胎儿成纤维细胞冻存液
本专利技术属于细胞保存
，具体涉及一种猪胎儿成纤维细胞冻存液。
技术介绍
猪的器官大小、生理、代谢、寿命及疾病发生机理等都与人有较大的相似性，相对于非人类灵长类动物而言，猪没有苛刻的伦理道德和动物保护方面的要求，加上繁殖力高，饲养成本低，猪已成为人类疾病研究的理想动物模型。许多疾病难以通过自发或人工定向培育的方法获得疾病研究的相关动物模型。基因编辑技术的出现，为人类精确地研究基因与疾病的相关关系提供了可能。目前，猪的胚胎干细胞一直没有建立相应的干细胞数据库，也没有国际公认的诱导性多能干细胞(IPS)用于基因操作，目前制备基因修饰猪应用最广泛的是猪胎儿成纤维细胞。正常的猪胎儿成纤维细胞在体外培养时会不停生长分裂从而导致最终衰老和凋亡。为了保护及合理有效利用细胞资源，人们需要将细胞种子资源保存起来以供日后使用。目前，猪胎儿成纤维细胞保存普遍采用低温冷冻。低温冻存需要添加冷冻保护剂，如果直接冷冻，细胞内会产生冰晶对细胞造成伤害，从而导致细胞死亡。血清能稳定细胞膜、缓冲和保护细胞，调整细胞内渗透压，减少在冻存和长期储存过程中的活性氧自由基对细胞造成伤害，是猪胎儿本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪胎儿成纤维细胞冻存液，其特征在于，包括以下组分：蔗糖、乙二醇、二甲基亚砜和DMEM基础培养基。

【技术特征摘要】
1.一种猪胎儿成纤维细胞冻存液，其特征在于，包括以下组分：蔗糖、乙二醇、二甲基亚砜和DMEM基础培养基。2.根据权利要求1所述的一种猪胎儿成纤维细胞冻存液，其特征在于，所述蔗糖的终浓度为0.1-0.5mol/L。3.根据权利要求1所述的一种猪胎儿成纤维细胞冻存液，其特征在于，所述乙二醇的体积分数为15-25％，二甲基亚砜的体积分数为15-25％，DMEM基础培养基的体积分数为50-70％。4.权利要求1所述冻存液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取蔗糖浓储、乙二醇、二甲基亚砜以及适量DMEM基础培养基，配制成冻存液；其中，蔗糖浓储配制方法为：称取蔗糖，溶于DMEM基础培养基，过滤，分装，于-20℃保存。5.根据根据要求4所述冻存...

【专利技术属性】
技术研发人员：游小燕，葛良鹏，邹贤刚，何琦琳，孙静，
申请(专利权)人：重庆市畜牧科学院，
类型：发明
国别省市：重庆,50