细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒及其使用方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒及其使用方法和应用。该试剂盒包括A液、B液、C液、D液、E液和质控标准品，所述A液为100mM磷酸盐缓冲液,B液为1unit/ml葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶；所述C液为0.1～10mM含有式(1)化合物的底物溶液；所述D液为10mM NADP

Cytochrome oxidase 1A1 enzyme detection reagent kit and its using method and Application

The invention relates to a cytochrome oxidase 1A1 enzyme detection reagent kit, a method of use and an application thereof. The kit includes a A solution, B solution, C solution, D solution, E solution and quality control standard, the A solution for 100mM phosphate buffer solution, B 1unit/ml 6 glucose dehydrogenase; the C solution was 0.1 ~ 10mM (1) substrate solution containing type compounds; the D the liquid is 10mM NADP

【技术实现步骤摘要】
细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒及其使用方法和应用
本专利技术属医药生物
，具体涉及一种细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒及其使用方法和应用。
技术介绍
细胞色素P450(cytochromeP450,P450)酶，又称混合功能氧化酶或微粒体单加氧酶，是机体内最重要的药物代谢酶。P450参与了人体胆固醇，激素，脂肪酸，维生素等内源性物质的合成和代谢，对维持人体正常生理功能起到重要作用，同时也参与了多数外来物的生物转化，大约70％的药物(包括绝大部分临床药物和杀虫剂)的主要清除是由P450介导的。细胞色素P450酶催化的I相反应是化合物在体内代谢的关键步骤，因为这一步反应通常是药物从体内清除的限速步骤，可影响化合物的半衰期、清除率等动力学特征，且P450酶活性常随遗传因素、年龄、疾病状态或其它药物相互作用的影响而发生改变。药物对机体P450酶的影响，能造成临床上显著的药物相互作用。CYP1A1是重要的I相代谢酶，主要在人肝外组织中表达，例如人肺、皮肤、小肠中表达。CYP1A1参与多种环境毒素和内源性底物的代谢，并在多种前致癌物被激活成具有遗传毒性中间体或最终致癌物的过程中起到了重要本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒，其特征在于该试剂盒包括如下四种试剂：A液、B液、C液、D液、E液和质控标准品；其中所述A液为100mM磷酸盐缓冲液：40mM MgCl2，100mM 6‑磷酸葡萄糖,pH＝5.5～10，所述B液为1unit/ml葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶；所述C液为0.1～10mM含有式(1)化合物的底物溶液，溶剂为乙腈；所述D液为10mM NADP

【技术特征摘要】
1.一种细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒，其特征在于该试剂盒包括如下四种试剂：A液、B液、C液、D液、E液和质控标准品；其中所述A液为100mM磷酸盐缓冲液：40mMMgCl2，100mM6-磷酸葡萄糖,pH＝5.5～10，所述B液为1unit/ml葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；所述C液为0.1～10mM含有式(1)化合物的底物溶液，溶剂为乙腈；所述D液为10mMNADP+；所述E液为乙腈的终止液；所述质控标准品为5mg/ml的CYP1A1的pH7.4的磷酸盐溶液；所述式(1)化合物为：N-正丁基-4-氯乙氧基-1，8-萘酰亚胺；在pH7.4的缓冲体系中，上述化合物可被CYP1A1特异性氧化为相应O-去氯乙基化产物N-正丁基-4-羟基-1，8-萘酰亚胺。2.按照权利要求1所述细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒，其特征在于所述A液优选pH7.4。3.一种如权利要求1所述细胞色素氧化酶1A1酶检测试剂盒的使用方法，其特征在于其检测步骤如下：(1)预孵育：将待测样品与A液，B液和C液混匀，优选37℃为最优反应时间；孵育体系pH介于5.5～10.5之间，37℃孵育下孵育3～5分钟；(2)起始反应：加入D液后混匀，37℃孵育20-120分钟；(3)检测：加入E液终止，确保以上底物相应的O-去氯乙基化产物达到定量限且底物转化率不超过20％时终止反应；(4)测定单位时间内底物消除率或其去氯乙基化产物的生成率作为CYP1A1活性的评价指标；用...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨凌，戴子茹，葛广波，宁静，于洋，杜逊甫，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁,21