一种从生姜中提取分离6‑姜酚的方法技术

本发明专利技术公开了一种从生姜中提取分离6‑姜酚的方法。该方法通过溶剂提取，低压硅胶柱层析分离，高效液相色谱纯化，重结晶的操作步骤制备。采用本发明专利技术的方法制备的6‑姜酚产率高，制备的6‑姜酚生物活性高，纯度高，可直接用于药品的制备，冻存液可长期保存6‑姜酚，生物活性不降低。

A method of extraction and separation of 6 gingerol from ginger.

The invention discloses a method for extracting and separating 6 gingerol from ginger. The method was prepared by solvent extraction, low pressure silica gel column chromatography separation, high performance liquid chromatography purification, and recrystallization steps. The 6 gingerol yield prepared, prepared 6 gingerol high biological activity, high purity, can be directly used for the preparation of the drug, the frozen liquid can be stored for a long time 6 gingerol, biological activity is not reduced.

【技术实现步骤摘要】
一种从生姜中提取分离6-姜酚的方法
本专利技术涉及一种生姜提取物的提取方法，特别涉及一种从生姜中提取分离6-姜酚的方法。
技术介绍
生姜中存在一系列姜酚的同系物，由于结构类似，性质相近，很难用常规方法纯化成单体成分，在低压柱层析柱上分离出的成分，经薄层色谱鉴别为单一斑点，实际上为一族化合物，经高效液相色谱进一步分离得到5个化合物，其中一个主要成分为6-姜酚。6-姜酚中含有8-羟基酮结构，理化性质不稳定，容易受到外界条件的干扰而失去活性。目前，6-姜酚的提取方法多采用化学萃取剂萃取的方法，得到的一般是不纯的粗体，也有采用高效液相色谱等方法提取纯度高，但是6-姜酚化学性能不稳定，提取过程中损耗较大。专利200410074545.3公开了一种从生姜中提取分离6-姜酚的方法。该方法通过制备姜油树脂，硅胶色谱柱分离，制备粗姜酚，液相色谱分离，去除溶剂等步骤制备6-姜酚，该方法制备的6-姜酚得率低，产品不容易长期保存。专利200610161540.3公开了一种分离纯化6-姜酚的方法，该方法从姜的超临界流体萃取物中分离纯化6-姜酚，包括硅胶柱色谱分离，HPLC纯化，重结晶的步骤，其优点是制备方法简单，缺点是得率和纯度不高，产品不容易长期保存。专利201210553119.2公开了一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法，包括以下步骤：(1)姜酚的提取浓缩：切片生姜置于小型多功能提取浓缩罐，用质量浓度为80-95％的乙醇按1∶6-15的料液质量体积比在60-80℃下加热回流提取，提取的时间为每次2-3小时，每批生姜提取2-4次，每次提取的提取液流入所述小型多功能提取浓缩罐中，经统一浓缩得到生姜提取物；(2)姜酚萃取：将所述生姜提取物置于玻璃反应釜中，用乙酸乙酯进行萃取，萃取次数2-4次，合并得到萃取液；该萃取液经旋转蒸发仪减压回收得到姜酚粗提物；所述生姜提取物与所述乙酸乙酯的体积比为1∶2-4；(3)硅胶柱层析：将所述姜酚粗提物溶于乙酸乙酯，然后加入所述姜酚粗提物重量2-4倍的硅胶拌样，溶剂乙酸乙酯挥干后，干法上硅胶柱；用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂等度洗脱，薄层层析TCL检测，收集含有6-姜酚的洗脱液部分，用旋转蒸发仪减压回收所述洗脱液得到6-姜酚粗品；将所述6-姜酚粗品再次上硅胶柱，按照上述方法经洗脱、检测、收集、回收溶剂，得到较纯6-姜酚；(4)制备HPLC纯化：将所述步骤(3)所得的较纯6-姜酚用甲醇-水混合溶剂溶解，以制备HPLC纯化，以甲醇-水混合溶剂作为流动相等度洗脱，收集最大色谱峰，置旋转蒸发仪上蒸干至恒重，即得到高纯度的6-姜酚。该方法得到的6-姜酚纯度很低，只适合于食品和化妆品领域的应用。
技术实现思路
本专利技术是为了克服上述现有技术中缺陷，提出一种从生姜中提取分离6-姜酚的方法。一种从生姜中提取分离6-姜酚的方法，按照如下步骤进行：(1)将生姜切成碎块，加1-5倍重量的溶剂，于水浴回流2-4小时，倾出溶剂，再加1-3倍重量的溶剂提取1-5次，合并溶剂提取液，减压回收溶剂，得到深棕色油状提取物；(2)采用200-300目层析硅胶干法装柱，将上步提取的油状提取物加溶剂溶解，与硅胶拌均，挥发去溶剂，装于柱上端，再加硅胶于其上，用石油醚-醋酸乙酯洗脱，洗脱液以薄层色谱鉴别，用6-姜酚标准品对照，将相同部位合并，减压浓缩回收醋酸乙酯，得淡黄色油状提取物；(3)将上步制备的淡黄色油状提取物溶解于甲醇中，用制备型高效液相色谱仪分离纯化6-姜酚；(4)将制备型高效液相色谱仪纯化的6-姜酚油状物加正已烷回流10-30分钟，将溶液转移至锥形瓶中，密闭，放置于15-25℃水箱中过夜，即可析出絮状结晶，挥去溶剂后，获得结晶产品。所述用制备型高效液相色谱仪分离纯化6-姜酚的条件：色谱柱：制备型十八烷基键合硅胶柱；流动相：80％甲醇水溶液；70％甲醇水溶液；流速：1.2-2.2ml/min；检测：280nm紫外检测，灵敏度0.5或示差析光检测；纸速：20cm/min。所述石油醚的沸点为60-90℃。所述石油醚-醋酸乙酯中石油醚与醋酸乙酯的体积比为6∶4。所述溶剂为醋酸乙酯，丁酸乙酯，乙醇或甲苯。6-姜酚产品冻存液，由如下重量份数的组分组成：维生素C20-30份，乙醇300-500份，水莎草提取物1-2份。所述水莎草提取物的提取方法为：将新鲜水莎草茎秆在液氮中冻存，取出研磨为粉末，加3-8倍重量的70％乙醇水溶液溶解，回流提取3次，合并滤液，蒸干制成。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：采用本专利技术的方法制备的6-姜酚产率高，制备的6-姜酚生物活性高，纯度高，可直接用于药品的制备，冻存液可长期保存6-姜酚，生物活性不降低。附图说明图1是本专利技术6-姜酚分离提取的工艺图。具体实施方式下面结合附图，对本专利技术的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例1一种从生姜中提取分离6-姜酚的方法，按照如下步骤进行：(1)溶剂提取生姜(ZingeberofficinleRosc，产地山东莱芜，秋季采集)300克，切成碎块，加2倍量醋酸乙酯，于水浴回流3小时，倾出醋酸乙酯，再加2倍量的醋酸乙酯提取3次，合并醋酸乙酯提取液，减压回收醋酸乙酯，得到深棕色油状提取物2克。(2)低压硅胶柱层析分离姜酚粗品采用200-300目层析硅胶干法装柱，将上步提取的粗提物加5ml醋酸乙酯溶解，与4g硅胶拌均，挥发去醋酸乙酯，装于柱上端，再加3g纯硅胶于其上，用石油醚(60-90℃)-醋酸乙酯(6∶4)洗脱，洗脱液以薄层色谱鉴别，用6-姜酚标准品对照，将相同部位合并，减压浓缩回收醋酸乙酯，得淡黄色油状物(约400毫克)，为姜酚粗品。(3)高效液相色谱纯化将上步制备的姜酚粗品溶解于4毫升甲醇中，用制备型高效液相色谱仪分离纯化姜酚。色谱条件：色谱柱：制备型十八烷基键合硅胶柱；流动相：80％甲醇水溶液；70％甲醇水溶液；流速：1.2-2.2ml/min；检测：紫外检测(280nm)灵敏度0.5或示差析光检测；纸速：20cm/min；采用6-姜酚为标准品标定目标化合物的保留时间，将上步制备的姜酚粗品0.4克溶于4毫克甲醇中，每次进样15μl，按峰收集样品，合并后回收溶剂，得到淡黄色油状物0.2克，此样品中含有杂质，需要改变流动相进一步纯化。将上步的0.2克样品溶于2毫升甲醇中，改用70％甲醇水溶液为流动相，流速1.8ml/min，其它条件不变，再进行HPLC分离，按峰收集样品，得到6-姜酚0.12克(淡黄色油状物)。(4)重结晶将HPLC纯化的6-姜酚油状物加80毫升正已烷回流20分钟，将溶液转移至100毫升锥形瓶中，密闭，放置于20℃水箱中过夜，即可析出絮状结晶，挥去溶剂后，此结晶在室温下(19℃)不融化。采用本实施例的方法得率为75％，6-姜酚纯度为99.6％。为确证其化学结构，对该化合物进行了FAB-MS，EI-MS，1HNMR，13CNMR，IR和UV分析，证明该化合物为6-姜酚。以前文献报导的6-姜酚可能由于当时的分离技术所限，含有少量同系物杂质，因而熔点下降，在5℃以上为油状物。6-姜酚，白色结晶(正已烷)，mp.28-30℃，元素分析：C69.19％(理论值：69.29％)，H9.05％(理论值：8.9％)。FAB-MS谱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从生姜中提取分离6‑姜酚的方法，其特征在于，按照如下步骤进行：(1)将生姜切成碎块，加1‑5倍重量的溶剂，于水浴回流2‑4小时，倾出溶剂，再加1‑3倍重量的溶剂提取1‑5次，合并溶剂提取液，减压回收溶剂，得到深棕色油状提取物；(2)采用200‑300目层析硅胶干法装柱，将上步提取的油状提取物加溶剂溶解，与硅胶拌均，挥发去溶剂，装于柱上端，再加硅胶于其上，用石油醚‑醋酸乙酯洗脱，洗脱液以薄层色谱鉴别，用6‑姜酚标准品对照，将相同部位合并，减压浓缩回收醋酸乙酯，得淡黄色油状提取物；(3)将上步制备的淡黄色油状提取物溶解于甲醇中，用制备型高效液相色谱仪分离纯化6‑姜酚；(4)将制备型高效液相色谱仪纯化的6‑姜酚油状物加正己烷回流10‑30分钟，将溶液转移至锥形瓶中，密闭，放置于15‑25℃水箱中过夜，即可析出絮状结晶，挥去溶剂后，获得结晶产品。

【技术特征摘要】
1.一种从生姜中提取分离6-姜酚的方法，其特征在于，按照如下步骤进行：(1)将生姜切成碎块，加1-5倍重量的溶剂，于水浴回流2-4小时，倾出溶剂，再加1-3倍重量的溶剂提取1-5次，合并溶剂提取液，减压回收溶剂，得到深棕色油状提取物；(2)采用200-300目层析硅胶干法装柱，将上步提取的油状提取物加溶剂溶解，与硅胶拌均，挥发去溶剂，装于柱上端，再加硅胶于其上，用石油醚-醋酸乙酯洗脱，洗脱液以薄层色谱鉴别，用6-姜酚标准品对照，将相同部位合并，减压浓缩回收醋酸乙酯，得淡黄色油状提取物；(3)将上步制备的淡黄色油状提取物溶解于甲醇中，用制备型高效液相色谱仪分离纯化6-姜酚；(4)将制备型高效液相色谱仪纯化的6-姜酚油状物加正己烷回流10-30分钟，将溶液转移至锥形瓶中，密闭，放置于15-25℃水箱中过夜，即可析出絮状结晶，挥去溶剂后，获得结晶产品。2.根据权利要求1所述的从生姜中提取分离6-姜酚的方法，其特征在于，所述用制备型高效液相色谱仪分离纯化6-姜酚的条件：色...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈小明，盘俊，曾飞，何福林，
申请(专利权)人：湖南科技学院，
类型：发明
国别省市：湖南,43