【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过平衡位移测定结合常数的方法
本专利技术是有关于一种用于根据权利要求1测定物质或物质混合物与目标物之间的结合常数方法的，及有关于一种根据权利要求16的试剂盒。
技术介绍
物质或物质混合物与目标物之间的相互作用和结合常数的测定在制药行业，特别是在药物研究与开发中扮演重要角色。这两个领域都涉及物质或物质混合物与生物之间的相互作用。在这里，必须用结合参数和结合常数量化各物质的结合特性。从DE102010018965A1中已知一种用于测定结合常数方法。在所述方法中，蛋白质固定在多个固体上，例如与待测物质的水溶液接触，并培养一段时间足以使溶解物质与蛋白质结合。然后将固体支持的蛋白质与溶液分离(例如通过沉降)。使用合适的测量方法，确定在剩余溶液(上清液)中或任选地在分离的固体支持的蛋白质中测得待测物质的浓度，特别是固体支持的蛋白质与待测试物质的多种不同混合比。为达此目的，用于结合的相同数量的待测物质在不同量的固体支持蛋白溶液中以均匀的溶液体积进行培养。待测试样品的液相总体积，由待测物质或物质混合物溶解的缓冲液体的体积组成，在所有情况下保持恒定。这种方法的缺点是，对塑料或玻璃...
【技术保护点】
一种用于确定一物质或一物质混合物相对于一可溶性目标物和一固定化目标物的多个结合常数的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：●将所述物质或所述物质混合物的一第一样品与固定化于一固体上的一目标物进行培养，所述固体优选为一第一样品容器中的一颗粒载体，所述第一样品容器含有一缓冲溶液和一溶解目标物；●将所述物质或所述物质混合物的一第二样品与固定化于一固体上的所述目标物进行培养，所述固体优选为一第二样品容器中的一颗粒载体，所述第二样品容器含有所述缓冲溶液和所述溶解目标物；●将所述物质或所述物质混合物的一第三样品与固定化于一固体上的所述目标物进行培养，所述固体优选为一第三样品容器中的一...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.16 DE 102014115088.01.一种用于确定一物质或一物质混合物相对于一可溶性目标物和一固定化目标物的多个结合常数的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：●将所述物质或所述物质混合物的一第一样品与固定化于一固体上的一目标物进行培养，所述固体优选为一第一样品容器中的一颗粒载体，所述第一样品容器含有一缓冲溶液和一溶解目标物；●将所述物质或所述物质混合物的一第二样品与固定化于一固体上的所述目标物进行培养，所述固体优选为一第二样品容器中的一颗粒载体，所述第二样品容器含有所述缓冲溶液和所述溶解目标物；●将所述物质或所述物质混合物的一第三样品与固定化于一固体上的所述目标物进行培养，所述固体优选为一第三样品容器中的一颗粒载体，所述第三样品容器含有所述缓冲溶液和所述溶解目标物；●将所述物质或所述物质混合物的一第四样品与固定化于一固体上的所述目标物进行培养，所述固体优选为一第四样品容器中的一颗粒载体，所述第四样品容器含有所述缓冲溶液和所述溶解目标物；其中，包含不同物质量的所述固定化目标物和相同物质量的所述溶解目标物的所述物质的所述第一和第二样品被培养，以及包含与所述物质的所述第一和第二样品相同物质量的所述固定化目标物与包含相同物质量的所述可溶性目标物的所述物质的所述第三和第四样品被培养；其中所述第三和第四样品容器中的所述可溶性目标物的物质量与所述第一和第二样品容器中的所述可溶性目标物的物质量不同；以及培养过程中所述数个样品容器含有相同体积的液相，所述液相由所述缓冲溶液、所述溶解目标物和物质样品组成，所述方法更包括以下步骤：●从各培养基分离出所述固体，所述固体优选为颗粒载体；●测量未与所述固定化目标物结合的所述物质或未与所述固定化目标物结合的所述物质混合物在各自培养基的上清液中的浓度(APA浓度)；●根据测定的所述APA浓度，确定所述物质或所述物质混合物相对于所述固定化目标物的一结合常数和所述物质或所述物质混合物相对于所述溶解目标物的一结合常数。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述多个结合常数是多个解离常数，所述多个解离常数的测定如方程式I所述进行：其中，APA是未与所述固定化目标物结合的所述物质的浓度，即游离的物质与结合至所述可溶性目标物的物质；是所述固定化目标物的解离常数；是所述溶解目标物的解离常数；c0是总恒定添加物质浓度；[immoT]是所述固定化目标物的浓度；以及[P]是所述溶解目标物的浓度。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述解离常数的测定更包括以下步骤：●对及在方程式I中使用一解离常数矩阵；●计算预期用于所述解离常数矩...
【专利技术属性】
技术研发人员：亨涅克·波瑞斯，
申请(专利权)人：苏维赛尔有限责任公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE
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