用于检测靶微生物的制品和方法技术

本发明专利技术涉及用于检测靶微生物的制品和方法。具体而言，所述方法包括提供含有选择性培养基的培养装置和包含第一指示系统的检测制品。所述选择性培养基促进指示微生物的生长。在与所述培养基接触的样品中检测到指示微生物时，使所述检测制品与所述培养基接触以检测所述靶微生物。

Articles and methods for detecting target microorganisms

The present invention relates to articles and methods for detecting target microorganisms. Specifically, the method includes providing a culture device comprising a selective medium and a detection product comprising a first indicating system. The selective medium promotes the growth of the indicative microorganism. When the indicator microorganism is detected in a sample contacting the medium, the detection product is contacted with the medium to detect the target microorganism.

【技术实现步骤摘要】
用于检测靶微生物的制品和方法本申请为国际申请日2011年12月23日、国际申请号PCT/US2011/067149于2013年7月1日进入中国国家阶段、申请号201180063824.8、专利技术名称“用于检测靶微生物的制品和方法”的分案申请。相关申请的交叉引用本专利申请要求提交于2010年12月30日的美国临时专利申请No.61/428,722的权益，该专利申请以引用的方式完整并入本文。
本专利技术涉及微生物检测领域。更具体而言，本专利技术提供了一种检测靶微生物存在或不存在的制品和方法。
技术介绍
测试全部食品、饮料和水的样品的病原微生物可能是不切实际的，原因在于花费高昂并且因为病原微生物极少存在于(例如)恰当加工的食品中。因此，针对指示微生物存在的测试例行用来测试食品和水，以确定遭人类病原体污染的可能性。一种或多种指示微生物的存在可能指示(例如)粪便污染，并且可以指示可能存在病原微生物。大肠杆菌(大肠菌)代表指示微生物的一个例子。大肠菌群包括多个属(如，柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、埃希杆菌属(Escherichia)、哈夫尼菌属(Hafnia)、克雷白氏杆菌属(Klebsiella)和沙雷氏菌属(Serratia))的杆状革兰氏阴性菌，它们大量存在于温血动物的粪便中，并且通过它们将乳糖发酵为酸和气体副产物的能力来表征。虽然大多数大肠菌仅与人类中的机会性感染相关，但是一些大肠菌(如，大肠杆菌O157:H7或其他产生志贺毒素的大肠杆菌(STEC))与较高的发病率和死亡率相关。肠杆菌科(Enterobacteriaceae)的微生物成员代表指示微生物的另一个例子。除大肠杆菌外，该科还包括大量其他的杆状革兰氏阴性菌。类似于大肠杆菌，在食品或水的样品中存在肠杆菌科微生物可能表明存在粪便污染，并因此表明可能存在人类病原体(如，肠炎肠道沙门氏菌(Salmonellaenterica)、鼠伤寒肠道沙门氏菌、志贺氏杆菌(Shigella)属以及阪崎肠杆菌(Cronobacter)属)。需要用来测试病原微生物在样品中存在的高效方法。
技术实现思路
通常，本专利技术涉及用于评估样品(如，食物或水的样品、环境样品)的微生物含量的方法。具体地讲，本专利技术的方法可以检测靶微生物在样品中的存在或不存在，其中已发现该样品包含可以表明靶微生物存在的指示生物体。本专利技术的方法包括在具有第一指示系统的培养装置中培养样品，以确定指示微生物的存在，并且如果检测到指示微生物，则将培养装置与包含第二指示系统的检测制品接触，以确定靶微生物的存在或不存在。在一个方面，本专利技术提供了检测靶微生物的存在或不存在的方法。该方法可以包括提供包含培养基、含有第一指示系统的检测制品和样品的培养装置，其中所述培养基包含经选择以促进预定指示微生物生长的成分。可以选择第一指示系统以检测靶微生物。该方法还可以包括：用样品接种该培养装置，将接种的培养装置孵育一段足够允许指示微生物生长的时间，观察培养装置至少一种指示微生物存在的指示，使孵育的培养装置的培养基与检测制品接触，然后观察接触过制品的培养装置，以检测第一指示系统从第一状态到第二状态的转变。在一些实施例中，如果存在第一指示系统从第一状态到第二状态的转变，则其可能指示存在至少一种靶微生物。在一些实施例中，如果不存在第一指示系统从第一状态到第二状态的转变，则表明存在至少一种靶微生物。在一些实施例中，该方法还可以包括提供第二指示系统并将该第二指示系统放置为与培养基流体连通，其中观察培养装置至少一种指示微生物的存在包括检测存在或不存在第二指示系统从第一状态到第二状态的转变。在上述实施例的任何一个中，提供培养装置还可以包括提供包含第二指示系统的培养装置。在该方法的上述实施例的任何一个中，提供培养装置还可以包括提供包含水凝胶或干燥的冷水可溶胶凝剂的培养装置。在该方法的上述实施例的任何一个中，只有当观察到至少一种指示微生物存在的指示时，才将培养基与检测制品接触。在上述实施例的任何一个中，提供培养基可以包括提供经选择以促进肠杆菌科微生物生长的培养基，其中提供检测制品可以包括提供检测沙门氏菌(Salmonella)属微生物的检测制品。在一些实施例中，第一指示系统可以包含检测α-半乳醣苷酶或辛酸酯酶的酶活性的试剂。在上述实施例的任何一个中，提供培养基可以包括提供经选择以促进肠杆菌科微生物生长的培养基，其中提供检测制品可以包括提供检测志贺氏杆菌属微生物的检测制品。在一些实施例中，第一指示系统可以包含检测β-葡萄糖苷酶、β-岩藻糖苷酶、N-乙酰基-β-半乳糖胺酶或前述任意两种或更多种酶活性的组合的试剂。在上述实施例的任何一个中，提供培养基可以包括提供经选择以促进肠杆菌科微生物生长的培养基，其中提供检测制品可以包括提供检测阪崎肠杆菌属微生物的检测制品。在一些实施例中，第一指示系统可以包含检测α-葡萄糖苷酶和/或β-纤维二糖糖苷酶的酶活性的试剂。在上述实施例的任何一个中，提供培养基可以包括提供经选择以促进肠杆菌科微生物生长的培养基，其中提供检测制品可以包括提供检测大肠杆菌(Escherichiacoli)的检测制品。在上述实施例的任何一个中，提供培养基包括提供经选择以促进大肠菌微生物生长的培养基，其中提供检测制品包括提供检测大肠杆菌的检测制品。在一些实施例中，第一指示系统可以包含检测β-葡糖苷酸酶的酶活性的试剂。在一些实施例中，提供培养基可以包括提供经选择以促进李斯特氏菌属(Listeria)微生物生长的培养基，其中提供检测制品可以包括提供检测单核细胞增多性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)的检测制品。在一些实施例中，第一指示系统可以包含检测α-吡喃甘露糖苷酶或磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C的酶活性的试剂。在上述实施例的任何一个中，观察培养装置或接触过制品的培养装置可以包括目视观察所述培养装置。在上述实施例的任何一个中，观察培养装置或接触过制品的培养装置可以包括使用自动读数器观察所述培养装置。在上述实施例的任何一个中，该方法还可以包括对指示微生物菌落形成单元的一部分计数。在上述实施例的任何一个中，该方法还可以包括对靶微生物菌落形成单元的一部分计数。在上述实施例的任何一个中，使培养基与检测制品接触还可以包括在预定温度下接触培养基。在另一方面，本专利技术提供一种制品。该制品可以包括具有上主表面和下主表面的基底，以及设置在所述主表面的至少一个上的涂层。该涂层可以包含第一指示系统。该指示系统可以由α-吡喃半乳糖苷或辛酸酯酶的酶活性从第一状态转变到第二状态。在该制品的一些实施例中，第一指示系统可以选自5-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-吡喃半乳糖苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-辛酸和5-溴-4-氯-3-吲哚基-辛酸。在又一个方面，本专利技术提供一种制品。该制品可以包括具有上主表面和下主表面的基底，以及设置在所述主表面的至少一个上的涂层。该涂层可以包含第一指示系统。第一指示系统可以由β-葡糖苷酸酶的酶活性从第一状态转变到第二状态。在一些实施例中，第一指示系统可以选自5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖醛酸、对硝基苯基-β-葡糖苷酸、对硝基苯基-2,3,4-三氧-乙酰基-β-葡糖醛酸甲酯、酚酞葡糖醛酸、酚酞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测靶微生物存在或不存在的方法，包括：提供：培养装置，其包括含有经选择以促进预定指示微生物生长的成分的培养基；检测制品，其包含第一指示系统，所述第一指示系统经选择以检测靶微生物；和样品；用所述样品接种所述培养装置；对所述已接种的培养装置孵育一段足够允许所述指示微生物生长的时间；观察所述培养装置至少一种指示微生物存在的指示；使所述孵育的培养装置的所述培养基与所述检测制品接触；和观察接触过所述制品的培养装置，以检测所述第一指示系统从第一状态到第二状态的转变。

【技术特征摘要】
2010.12.30 US 61/428,7221.一种检测靶微生物存在或不存在的方法，包括：提供：培养装置，其包括含有经选择以促进预定指示微生物生长的成分的培养基；检测制品，其包含第一指示系统，所述第一指示系统经选择以检测靶微生物；和样品；用所述样品接种所述培养装置；对所述已接种的培养装置孵育一段足够允许所述指示微生物生长的时间；观察所述培养装置至少一种指示微生物存在的指示；使所述孵育的培养装置的所述培养基与所述检测制品接触；和观察接触过所述制品的培养装置，以检测所述第一指示系统从第一状态到第二状态的转变。2.根据权利要求1所述的方法，其中如果存在所述第一指示系统从第一状态到第二状态的转变，则表明至少一种靶微生物的存在。3.根据权利要求1所述的方法，其中如果不存在所述第一指示系统从第一状态到第二状态的转变，则表明至少一种靶微生物的存在。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括提供第二指示系统并将所述第二指示系统放置为与所述培养基流体连通，其中观察所述培养装置至少一种指示微生物存在的指示包括检测所述第二指示系统从第一状态到第二状态的转变。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中提供所述培养装置还包括提供包含水凝胶或一种干燥、可溶于冷水的胶凝剂的培养装置。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中只有当观察到至少一种指示微生物存在的指示时，才将所述培养基与所述检测制品接触。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中提供培养装置还包括提供包含所述第二指示系统的培养装置。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中提供培养基包括提供经选择以促进肠杆菌科(Enterobacteriaceae)微生物生长的培养基，其中提供检测制品包括提供检测沙门氏菌属(Salmonella)微生物的检测制品。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述第一指示系统包括检测α-半乳醣苷酶或辛酸酯酶的酶活性的试剂。10.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中提供培养基包括提供经选择以促进肠杆菌科微生物生长的培养基，其中提供检测制品包括提供检测志贺氏杆菌(Shigella)属微生物的检测制品。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一指示系统包括检测β-葡萄糖苷酶、β-岩藻糖苷酶、N-乙酰基-β-半乳糖胺酶或前述任意两种或更多种酶活性的组合的试剂。12.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中提供培养基包括提供经选择以促进肠杆菌科微生物生长的培养基，其中提供检测制品包括提供检测阪崎肠杆菌属(Cronobacter)微生物的检测制品。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述第一指示系统包括检测α-葡萄糖苷酶和/或β-纤维二糖糖苷酶的酶活性的试剂。14.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中提供培养基包括提供经选择以促进肠杆菌科微生物生长的培养基，其中提供检测制品包括提供检测大肠杆菌(Escherichiacoli)的检测制品。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述第一指示系统包括检测β-葡糖苷酸酶的酶活性的试剂。16.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中提供培养基包括提供经选择以促进大肠菌微生物生长的培养基，其中提供检测制品包括提供检测大肠杆菌的检测制品。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述第一指示系统包括检测β-葡糖苷酸酶的酶活性的试剂。18.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中提供培养基包括提供经选择以促进李斯特氏菌属(Listeria)微生物生长的培养基，其中提供检测制品包括提供检测单核细胞增多性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)的检测制品。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述第一指示系统包括检测α-吡喃甘露糖苷酶和/或磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C的酶活性的试剂。20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中观察所述培养装置或接触过所述制品的培养装置包括用肉眼观察所述培养装置。21.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中观察所述培养装置或接触过所述制品的培养装置包括用成像装置观察所述培养装置。22.根据前述权利要求中任一项所述的方法，还包括对所述培养装置中指示微生物菌落形成单位计数。23.根据前述权利要求中任一项所述的方法，还包括对所述培养装置中靶微生物菌落形成单位计数。24.根据前述权利要求中任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：守山隆敏，帕特里克·A·玛奇，北原章生，亨利·J·拉布兰特，
申请(专利权)人：三M创新有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US