产热的miRNA调节剂制造技术

本发明专利技术提供了用于调节产热的新方法和组合物。这样的方法是特别有利的，因为它们能够减少对象的身体脂肪，而无需所述对象通过节食调节其热量摄取、改变身体活动或进行肥胖治疗手术。因此，本发明专利技术的方法对治疗或预防肥胖特别有用。本发明专利技术还提供了筛选调节产热调节子活性的新试剂的方法。

Thermogenic miRNA modulators

The present invention provides novel methods and compositions for regulating heat production. Such a method is especially advantageous because they can reduce the body fat of an object without requiring the object to regulate its caloric intake, change body activity, or undergo bariatric surgery by dieting. Therefore, the methods of the present invention are particularly useful for the treatment or prevention of obesity. The present invention also provides a method for screening a novel reagent for regulating the activity of a heat producing regulator.

【技术实现步骤摘要】
产热的miRNA调节剂本申请是申请号为201380030602.5的中国专利申请的分案申请，原申请是国际申请PCT/US2013/037579的中国国家阶段申请。相关申请的交叉引用本申请要求对以下文件的优先权：于2012年4月20日提交的美国申请序列号61/636,059；于2012年8月10日提交的美国申请序列号61/681,750；和于2013年3月14日提交的美国申请序列号61/782,838，每个文件都通过引用并入本文。
本申请涉及新的治疗肥胖的方法，具体地，涉及产热的miRNA调节剂。
技术介绍
肥胖已经达到了流行病的比例，影响到所有年龄段和社会经济群体。世界卫生组织估计，在2008年，有15亿20岁及以上的成年人超重，并且有超过2亿的男性和超过3亿的女性肥胖。据估计，到2030年，超重和肥胖个体的数据将分别增长至21.6亿和11.2亿。肥胖导致收入损失、活动天数受到限制、缺勤、工作效率低下(出勤)、生活质量下降、永久性失能、显著的发病率和死亡率，以及寿命缩短。事实上，据估计，2009年美国和加拿大因医疗费用、过高的死亡率以及失能导致的超重和肥胖的年总经济费用为约3000亿美元。国际研究显示，肥胖症的经济费用占总医疗费用的2％至10％。肥胖是由能量摄取与消耗之间的长期失衡造成的。这导致过多的能量储存在脂肪细胞中，这样的脂肪细胞通常表现出肥大(细胞体积增大)和增生(细胞数目或脂肪生成增加)二者。最近，肥胖的恶化源于过度消费含饱和脂肪和糖类的高能量密度食物结合体力活动的减少。现有的肥胖的症状性医药治疗不能达到长期治疗的目的，这很大程度上是由于有限的药物效力以及患者很少能坚持生活方式改变和治疗所导致的。数种肥胖药物已经由于安全因素而被移出市场，而一些正在研发的小分子由于其不理想的短期疗效和未知的安全性能(profile)正挣扎于获取审批。目前，仅限制性肥胖治疗(bariatric)手术和吸收不良性肥胖治疗手术可实现显著的长期减重并伴有一些有利的心血管益处。因此，本领域中需要新的治疗肥胖的方法。
技术实现思路
肥胖是能量摄取与消耗长期失衡的结果，导致过多的能量储存进白色脂肪细胞中。本公开内容涉及肥胖的新治疗方法，其靶向周围脂肪细胞，包括储存能量的填充有脂质的白色脂肪细胞(whiteadipocytes，WAT)，以及消耗能量的富含线粒体的褐色脂肪细胞(brownadipocyte，BAT)。此外，本公开内容提供了通过使用微小RNA(miroRNA，miRNA)试剂来调节产热(生物体中的热产生过程)的方法。本文所描述的方法一般包括使用经分离的miRNA试剂直接和/或间接地调节细胞、组织和/或对象中的至少一种产热调节子(regulator)(例如，线粒体解偶联剂(uncoupler)，如解偶联蛋白1(UncouplingProtein1，UCP1还被称为产热素)或解偶联蛋白2(UCP2))。UCP使氧化磷酸化与ATP合成解偶联。在某些情况下，该解偶联反应导致能量作为热消散。这样的方法是特别有利的，因为它们允许减少对象身体中的脂肪，而无需所述对象必须通过节食调节其热量摄入、改变身体活动或进行肥胖治疗手术。因此，本专利技术的方法对治疗或预防肥胖特别有用。本专利技术还提供了可调节产热调节子活性的新miRNA试剂组合物(例如miRNA、agomir和antagomir)。此外，本专利技术提供了筛选调节产热调节子活性的新miRNA试剂的方法。此外，本专利技术还提供了提供miRNA试剂的细胞/组织特异性递送的新试剂组合物(例如，适配体(aptamer)-miRNA复合物或“aptamir”)。因此，在一个方面，本专利技术提供了调节细胞中的呼吸链解偶联的方法，所述方法包括使细胞与调节至少一种线粒体解偶联剂的表达水平和/或活性的经分离的miRNA试剂接触。在一些实施方案中，所述方法还包括选择需要调节呼吸链解偶联的对象(例如，肥胖患者)的步骤。在一个实施方案中，所述miRNA试剂提高至少一种线粒体解偶联剂的表达水平和/或活性。在某些实施方案中，所述线粒体解偶联剂是UCP1或UCP2。在一些实施方案中，所述方法在体内提高细胞中的呼吸链解偶联。在另一些实施方案中，所述方法离体提高细胞中的呼吸链解偶联。在某些实施方案中，所述方法还包括测定线粒体解偶联剂的表达水平(mRNA或蛋白质)或活性。在某些实施方案中，所述细胞是前脂肪细胞、脂肪细胞、脂肪组织来源的间充质干细胞、肝细胞、肌细胞或其前体。任选地，脂肪细胞可为白色脂肪细胞或褐色脂肪细胞。在另一个方面，本专利技术提供了调节组织中的产热的方法，所述方法包括使组织与调节至少一种线粒体解偶联剂的表达水平和/或活性的经分离的miRNA试剂接触。在一些实施方案中，所述方法还包括选择需要调节产热的对象(例如，肥胖患者)的步骤。在一个实施方案中，所述miRNA试剂提高至少一种线粒体解偶联剂的表达水平和/或活性。在某些实施方案中，所述线粒体解偶联剂是UCP1或UCP2。在某些实施方案中，所述方法包括提高产热。在某些实施方案中，所述方法还包括测定线粒体解偶联剂的表达水平(mRNA或蛋白质)或活性。在某些实施方案中，所述组织是褐色脂肪组织、白色脂肪组织、皮下脂肪组织、肝或肌肉。在某些实施方案中，使所述组织与所述miRNA试剂离体接触。在另一个方面，本专利技术提供了治疗需要此治疗的人对象的肥胖的方法，所述方法一般包括向所述人对象施用有效量的调节至少一种线粒体解偶联剂活性的miRNA试剂。在某些实施方案中，所选择用于治疗的人对象具有肥胖的遗传素质或表观遗传素质。在某些实施方案中，所述线粒体解偶联剂是UCP1、UCP2或UCP3。在所有以上方面的某些实施方案中，所述miRNA试剂是选自以下的经分离的miRNA：hsa-miR-1-1、hsa-miR-1-2、miR-19a-b、hsa-miR-105、hsa-miR-1283、hsa-mir-129、hsa-miR-133a-1、hsa-miR-133a-2、hsa-miR-143、hsa-mir-143-5p、hsa-mir-147、hsa-mir-149、hsa-mir-199a、hsa-mir-199b、hsa-mir-200c、hsa-mir-204、hsa-mir-205、hsa-miR-206、hsa-mir-21、hsa-mir-211、hsa-mir-218、hsa-mir-218-1、hsa-mir-218-2、hsa-mir-219-2、hsa-mir-219-2-3p、hsa-mir-22、hsa-mir-22-3p、hsa-mir-22-5p、hsa-mir-24-2、hsa-miR-30a-e、hsa-miR-3177-5p、hsa-mir-325、hsa-mir-331、hsa-mir-331-5p、hsa-miR-3613-3p、hsa-mir-362、hsa-mir-362-5p、hsa-miR-3658、hsa-mir-367、hsa-mir-371、hsa-mir-371-5p、hsa-mir-377、hsa-mir-378、hsa-mir-378a-5p、hsa-mir-382、hsa-mir-383、hsa-mir-422a、hsa-本文档来自技高网...

【技术保护点】
miRNA试剂在制备用于在有此需要的人对象中减少身体脂肪的药物中的用途，其中所述miRNA试剂调节UCP1或UCP2的至少一种的活性或表达；其中所述miRNA试剂是选自以下的miRNA：has‑miR‑22、has‑miR‑22‑3p、has‑miR‑22‑5p hsa‑miR‑1‑1、hsa‑miR‑1‑2、miR‑19a‑b、hsa‑miR‑105、hsa‑miR‑1283、hsa‑mir‑129、hsa‑miR‑133a‑1、hsa‑miR‑133a‑2、hsa‑miR‑143、hsa‑mir‑143‑5p、hsa‑mir‑147、hsa‑mir‑149、hsa‑mir‑199a、hsa‑mir‑199b、hsa‑mir‑200c、hsa‑mir‑204、hsa‑mir‑205、hsa‑miR‑206、hsa‑mir‑21、hsa‑mir‑211、hsa‑mir‑218、hsa‑mir‑218‑1、hsa‑mir‑218‑2、hsa‑mir‑219‑2、hsa‑mir‑219‑2‑3p、hsa‑mir‑24‑2、hsa‑miR‑30a‑e、hsa‑miR‑3177‑5p、hsa‑mir‑325、hsa‑mir‑331、hsa‑mir‑331‑5p、hsa‑miR‑3613‑3p、hsa‑mir‑362、hsa‑mir‑362‑5p、hsa‑miR‑3658、hsa‑mir‑367、hsa‑mir‑371、hsa‑mir‑371‑5p、hsa‑mir‑377、hsa‑mir‑378、hsa‑mir‑378a‑5p、hsa‑mir‑382、hsa‑mir‑383、hsa‑mir‑422a、hsa‑mir‑425、hsa‑miR‑455‑3p、hsa‑miR‑455‑5p、hsa‑miR‑491、hsa‑mir‑508、hsa‑mir‑508‑5p、hsa‑mir‑512‑1、hsa‑mir‑512‑2、hsa‑miR‑515‑3p、hsa‑mir‑519e、hsa‑miR‑520a、hsa‑mir‑543、hsa‑mir‑545、hsa‑mir‑549、hsa‑mir‑556、and hsa‑miR‑568、hsa‑mir‑620、hsa‑mir‑643、hsa‑mir‑654‑3p、hsa‑miR‑7a‑g、hsa‑mir‑765、hsa‑mir‑871、hsa‑mir‑888、hsa‑mir‑888‑3p、hsa‑mir‑92b、hsa‑mir‑93、hsa‑mir‑96以及hsa‑mir‑99a，或其antagomir或agomir。...

【技术特征摘要】
2012.04.20 US 61/636,059;2012.08.10 US 61/681,750;1.miRNA试剂在制备用于在有此需要的人对象中减少身体脂肪的药物中的用途，其中所述miRNA试剂调节UCP1或UCP2的至少一种的活性或表达；其中所述miRNA试剂是选自以下的miRNA：has-miR-22、has-miR-22-3p、has-miR-22-5phsa-miR-1-1、hsa-miR-1-2、miR-19a-b、hsa-miR-105、hsa-miR-1283、hsa-mir-129、hsa-miR-133a-1、hsa-miR-133a-2、hsa-miR-143、hsa-mir-143-5p、hsa-mir-147、hsa-mir-149、hsa-mir-199a、hsa-mir-199b、hsa-mir-200c、hsa-mir-204、hsa-mir-205、hsa-miR-206、hsa-mir-21、hsa-mir-211、hsa-mir-218、hsa-mir-218-1、hsa-mir-218-2、hsa-mir-219-2、hsa-mir-219-2-3p、hsa-mir-24-2、hsa-miR-30a-e、hsa-miR-3177-5p、hsa-mir-325、hsa-mir-331、hsa-mir-331-5p、hsa-miR-3613-3p、hsa-mir-362、hsa-mir-362-5p、hsa-miR-3658、hsa-mir-367、hsa-mir-371、hsa-mir-371-5p、hsa-mir-377、hsa-mir-378、hsa-mir-378a-5p、hsa-mir-382、hsa-mir-383、hsa-mir-422a、hsa-mir-425、hsa-miR-455-3p、hsa-miR-455-5p、hsa-miR-491、hsa-mir-508、hsa-mir-508-5p、hsa-mir-512-1、hsa-mir-512-2、hsa-miR-515-3p、hsa-mir-519e、hsa-miR-520a、hsa-mir-543、hsa-mir-545、hsa-mir-549、hsa-mir-556、andhsa-miR-568、hsa-mir-620、hsa-mir-643、hsa-mir-654-3p、hsa-miR-7a-g、hsa-mir-765、hsa-mir-871、hsa-mir-888、hsa-mir-888-3p、hsa-mir-92b、hsa-mir-93、hsa-mir-96以及hsa-mir-99a，或其antagomir或agomir。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述有此需要的人对象肥胖。3.根据权利要求1所述的用途，其中所述miRNA试剂与靶向部分连接。4.根据权利要求3所述的用途，其中所述靶向部分是适配体。5.根据权利要求3所述的用途，其中所述靶向部分将所述miRNA试剂递送至特定细胞类型或组织。6.根据权利要求1所述的用途，其中所述miRNA试剂是miR-22-3p的antagomir。7.根据权利要求1所述的用途，其中选择治疗的人对象具有肥胖的遗传素质或表观遗传素质。8.miRNA试剂在制备用于在对象中治疗糖尿病的药物中的用途，其中所述miRNA试剂是选自以下的miRNA：has-miR-22、has-miR-22-3p、has-miR-22-5phsa-miR-1-1、hsa-miR-1-2、miR-19a-b、hsa-miR-105、hsa-miR-1283、hsa-mir-129、hsa-miR-133a-1、hsa-miR-133a-2、hsa-miR-143、hsa-mir-143-5p、hsa-mir-147、hsa-mir-149、hsa-mir-199a、hsa-mir-199b、hsa-mir-200c、hsa-mir-204、hsa-mir-205、hsa-miR-206、hsa-mir-21、hsa-mir-211、hsa-mir-218、hsa-mir-218-1、hsa-mir-218-2、hsa-mir-219-2、hsa-mir-219-2-3p、hsa-mir-24-2、hsa-miR-30a-e、hsa-miR-3177-5p、hsa-mir-325、hsa-mir-331、hsa-mir-331-5p、hsa-miR-3613-3p、hsa-mir-362、hsa-mir-362-5p、hsa-miR-3658、hsa-mir-367、hsa-mir-371、hsa-mir-371-5p、hsa-mir-377、hsa-mir-378、hsa-mir-378a-5p、hsa-mir-382、hsa-mir-383、hsa-mir-422a、hsa-mir-425、hsa-miR-455-3p、hsa-miR-455-5p、hsa-miR-491、hsa-mir-508、hsa-mir-508-5p、hsa-mir-512-1、hsa-mir-512-2、hsa-miR-515-3p、hsa-mir-519e、hsa-miR-520a、hsa-mir-543、hsa-mir-545、hsa-mir-549、hsa-mir-556、andhsa-miR-568、hsa-mir-620、hsa-mir-643、hsa-mir-654-3p、hsa-miR-7a-g、hsa-mir-765、hsa-mir-871、hsa-mir-888、hsa-mir-888-3p、hsa-mir-92b、hsa-mir-93、hsa-mir-96以及hsa-mir-99a，或其antagomir或agomir。9.根据权利要求8所述的用途，其中选择治疗的对象肥胖或具有肥胖的遗传素质或表观遗传素质。10.根据权利要求8所述的用途，其中所述miRNA试剂包含miR-22-3p的antagomir。11.根据权利要求8所述的用途，其中所述miRNA试剂与靶向部分连接。12.根据权利要求11所述的用途，其中所述靶向部分是适配体。13.根据权利要求11所述的用途，其中所述靶向部分将所述miRNA试剂递送至特定细胞类型或组织。14.根据权利要求8所述的用途，其中所述对象是人。15.根据权利要求8所述的用途，其中所述糖尿病包括2型糖尿病。16.根据权利要求15所述的用途，其中所述2型糖尿病是2型糖尿病的早期发作。17.miRNA试剂在制备用于在有此需要的对象中提高胰岛素敏感性的药物中的用途，其中所述miRNA试剂是选自以下的miRNA：has-miR-22、has-miR-22-3p、has-miR-22-5phsa-miR-1-1、hsa-miR-1-2、miR-19a-b、hsa-miR-105、hsa-miR-1283、hsa-mir-129、hsa-miR-133a-1、hsa-miR-133a-2、hsa-miR-143、hsa-mir-143-5p、hsa-mir-147、hsa-mir-149、hsa-mir-199a、hsa-mir-199b、...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克·蒂博尼耶，
申请(专利权)人：艾珀特玛治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国,US