疫苗制剂制造技术

免疫原性组合物包含多种与载体蛋白缀合的来自肺炎链球菌血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F的荚膜多糖，还包含至少一种防腐剂，优选为2‑苯氧乙醇(2‑PE)。本发明专利技术含防腐剂的免疫原性组合物赋予对一种或多种微生物的抗性，并用于生产多剂量疫苗制剂，具有在选择的免疫原性组合物的不同抗原决定簇的长期稳定性方面的有利特性。还提供了用于测量疫苗制剂中一种或多种防腐剂功效的相关组合物和方法。

Vaccine preparation

Immunogenic compositions containing multiple conjugated with carrier protein from Streptococcus pneumoniae serotypes 1, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19A, 19F and 23F capsular polysaccharide, comprising at least an antiseptic, preferably 2 phenoxyethanol (2 PE). Conferring resistance to one or more microbial immunogenic compositions of the invention contain preservatives, and used in the production of multi dose vaccine formulation has favorable properties for long-term stability in immunogenic compositions of different antigenic determinants. Related compositions and methods for measuring the efficacy of one or more preservatives in a vaccine formulation are also provided.

【技术实现步骤摘要】
疫苗制剂本申请是申请日为2011年5月25日的第201180027663.7号专利技术名称为“疫苗制剂”的中国专利申请的分案申请。专利技术背景由细菌肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)(也被称为肺炎球菌(pneumococcus))导致的肺炎球菌疾病是全球较重要的细菌病原体之一。该疾病负担在没有疫苗的发展中国家的5岁以下儿童中是高的。肺炎球菌疾病是复合的病群，包括侵袭性感染诸如菌血症/脓毒症、脑膜炎、肺炎和中耳炎，其既侵袭儿童又侵袭成人。Prevnar13(也称为“Prevenar13”，以及在本文被称为“Prev(e)nar13”)是来自13种肺炎球菌血清型(1,3,4,5,6A,6B,7F,9V,14,18C,19A,19F和23F)、分别与CRM19(来自白喉棒状杆菌(Corynebacterimdiphtheriae)突变株的交叉反应物质)缀合的多糖制剂。Prev(e)nar13被推荐用于婴儿和幼儿的主动免疫以提供对任何肺炎球菌缀合疫苗的宽广血清型覆盖。尤其是，Prev(e)nar13中的血清型19A在世界的许多地区流行，并经常与抗生素抗性有关。参见，例如WO2006/110381；WO2008/079653；WO2008/079732；WO2008/143709以及其中引用的参考文献。硫柳汞(Thimerosal)(也称为邻乙汞硫基苯酸钠(Thiomersal)、硫柳汞(merthiolate))是含乙基汞的防腐剂，其从20世纪30年代早期已被添加至许多多剂量可注射制剂和局部溶液以保护它们在暴露期以及当给予多重个体时免受潜在的污染。在美国和世界的其他国家，硫柳汞作为强制免疫的部分以及在其他药物产品中继续被施用。据称它在疫苗领域的产品多次使用期间是用于消除潜在的污染菌的有效防腐剂，与疫苗的抗原结构和特性有最小限度的相互作用。由于关于乙基汞对婴儿和青年人的脑发育的潜在安全问题和副作用逐渐增加的争论，一些机构开始建议鉴定具有较低或可以忽略的安全风险的可替代防腐剂。在1999年，由美国国会托管的美国食品药品监督管理局的审查发现，与依据一些国立指南被认为可接受的汞相比，一些婴儿可能从疫苗中接受更多的汞。美国儿科学会(AAP)和美国公共卫生署(USPHS)关于疫苗中的硫柳汞签署了一份联合声明，然后AAP向临床医生发布了一份临时报告，建议尽快从疫苗中去除硫柳汞，同时保持努力以确保高水平的疫苗接种继续在全球实施，而不影响安全性。通过制备和使用仅单剂量的疫苗制剂可以降低或消除将防腐剂添加至疫苗的需要。然而，使用单剂量、无防腐剂的制剂增加了疫苗接种的总费用，并且危及发展中国家免疫规划的效果。此外，从多剂量瓶完全去除防腐剂不被认为是优先的选择，特别是在冷藏条件有限以及健康保健标准不理想的国家(Drainetal.,BullWorldHealthOrgan81(10):726–731(2003)。在1928年，接种过受污染的白喉疫苗的21名儿童中有12名死于多发性葡萄球菌脓肿和毒血症(Wilson,TheHazardsofImmunization,AthlonePress,London.pp.75–78(1967)。因此，尽管多剂量瓶看起来是最适合用于生产较廉价的疫苗，但理想的是配制具有至少一种防腐剂的多剂量疫苗以便保护个体免于感染在多次使用期间或者一个或多个非无菌事件后无意引入疫苗的微生物。然而，防腐剂在抵制细菌和其他微生物污染方面的功效必须与特定防腐剂对所选免疫原性组合物的免疫原性以及对每一不同抗原决定簇长期稳定性的影响相平衡。Prev(e)nar13制剂与防腐剂间的相容性之前没有讨论过。制备包含至少一种保护和/或稳定Prev(e)nar13中存在的肺炎球菌抗原血清型的抗原决定簇的防腐剂的优化制剂是理想的。专利技术概述在第一方面，本专利技术提供了多价免疫原性组合物，其包含来自肺炎链球菌血清型的多种荚膜多糖和2-苯氧乙醇(2-PE)。在某些实施方案中，荚膜多糖来自选自1,3,4,5,6A,6B,7F,9V,14,18C,19A,19F和23F的一种或多种肺炎链球菌血清型。在某些实施方案中，荚膜多糖来自七种或更多种选自1,3,4,5,6A,6B,7F,9V,14,18C,19A,19F和23F的肺炎链球菌血清型。在某些实施方案中，荚膜多糖来自肺炎链球菌血清型1,3,4,5,6A,6B,7F,9V,14,18C,19A,19F和23F的每一种。在专利技术的某些实施方案中，组合物包含浓度为7mg/mL-15mg/mL、约10mg/mL、不低于7mg/mL、不低于10mg/mL、或者不低于15mg/mL的2-PE。在某些实施方案中，本专利技术的免疫原性组合物还可以包含佐剂、缓冲剂、冷冻保护剂、盐、二价阳离子、非离子去垢剂、和自由基氧化抑制剂的一种或多种。在某些实施方案中，佐剂是磷酸铝。本专利技术优选的多价免疫原性组合物是分别缀合至CRM19的来自血清型1,3,4,5,6A,6B,7F,9V,14,18C,19A,19F和23F的肺炎球菌荚膜多糖的制剂，其中多价免疫原性组合物配制在无菌液体中以包含：约4.4μg/mL的每种多糖，除外约8.8μg/mL的6B；约58μg/mLCRM197载体蛋白；约0.25mg/mL的磷酸铝形式的元素铝；约0.85％氯化钠；约0.02％聚山梨醇酯80；pH为5.8的约5mM琥珀酸钠缓冲剂；以及约10mg/mL的2-苯氧乙醇。在本专利技术的某些实施方案中,免疫原性组合物的抗原性在2-8℃、20-25℃或37℃温度下稳定不少于1年、1.5年、2年或2.5年。在本专利技术的某些实施方案中，免疫原性组合物接种一种或多种微生物后，所述微生物的浓度随着时间降低。在某些实施方案中，用一种或多种细菌菌株接种后，组合物在24小时呈现从初次微生物计数的至少1.0的对数下降(logreduction)，在7天时呈现从先前测量的值的至少3.0的对数下降，以及28天后，呈现从先前测量的值的不超过0.5的对数增加(logincrease).在某些实施方案中，用一种或多种细菌菌株接种后，组合物在6小时呈现从初次计算的计数的至少2.0的对数下降，在24小时呈现从先前测量的值的至少3.0的对数下降，以及在28天没有恢复。微生物菌株包括一种或多种选自铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的菌株。在某些实施方案中，免疫原性组合物被接种多次。某些实施方案中，第二次接种发生在初次接种后6小时，第三次接种发生在初次接种后24小时，第三次接种发生在初次接种后7天，以及第四次接种发生在初次接种后14天。在第二方面，本专利技术还提供了含本专利技术的多价免疫原性组合物的小瓶。小瓶可以包含单剂量或多次剂量的免疫原性组合物。本专利技术还提供了包含本专利技术的多价免疫原性组合物的预填充疫苗递送装置。在某些实施方案中，预填充疫苗递送装置是注射器或包含注射器。本专利技术的疫苗递送装置可以包含双室或多室注射器或小瓶或其组合。在某些实施方案中，预填充疫苗递送装置包含配制用于肌内或皮下注射的多价免疫原性组合物。在第三方面，本专利技术还提供了用于制备本专利技术的免疫原性组合物的试剂盒本文档来自技高网...

【技术保护点】
多价免疫原性组合物，其包含多种与载体蛋白缀合的来自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F的荚膜多糖，以及还包含2‑苯氧乙醇(2‑PE)。

【技术特征摘要】
2010.06.04 US 61/351,8041.多价免疫原性组合物，其包含多种与载体蛋白缀合的来自肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F的荚膜多糖，以及还包含2-苯氧乙醇(2-PE)。2.权利要求1的多价免疫原性组合物，其中所述组合物包含七种或更多种来自肺炎链球菌血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F的荚膜多糖。3.权利要求1-2中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述组合物包含浓度为7mg/mL至15mg/mL的2-PE。4.权利要求3的多价免疫原性组合物，其中所述组合物包含浓度为约10mg/mL的2-PE。5.权利要求1-4中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述组合物包含不少于7mg/mL的2-PE。6.权利要求1-4中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述组合物包含不少于10mg/mL的2-PE。7.权利要求1-4中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述组合物包含不少于15mg/mL的2-PE。8.权利要求1-7中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述组合物还包含佐剂，以及其中所述佐剂是磷酸铝。9.权利要求1-8中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述免疫原性组合物的抗原性在不少于1年、1.5年、2年或2.5年是稳定的。10.权利要求1-9中任一项的多价免疫原性组合物，其中用一种或多种微生物接种后，所述微生物的浓度随着时间下降。11.权利要求10的多价免疫原性组合物，其中用一种或多种细菌菌株接种后，所述组合物在24小时呈现从初始微生物计数的至少1.0的对数下降，在7天时呈现从先前测量的值的至少3.0的对数下降，以及在28天时呈现从先前测量的值的不超过0.5的对数增加。12.权利要求10的多价免疫原性组合物，其中用一种或多种细菌菌株接种后，所述组合物在接种后6小时呈现从初始计算的计数至少2.0的对数下降，在24小时呈现从先前测量的值至少3.0的对数下降，以及在28天时没有呈现恢复。13.权利要求10-12中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述微生物菌株是选自铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的一种或多种菌株。14.权利要求10-13中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述组合物被接种多次。15.权利要求13或14的多价免疫原性组合物，其中第二次接种发生在初始接种后6小时，第三次接种发生在初始接种后24小时，第三次接种发生在初始接种后7天，以及第四次接种发生在初始接种后14天。16.权利要求1-15中任一项的多价免疫原性组合物，其中所述组合物还包含缓冲剂、冷冻保护剂、盐、二价阳离子、非离子去垢剂和自由基氧化抑制剂的一种或多种。17.肺炎球菌荚膜多糖的多价免疫原性组合物制剂，所述肺炎球菌荚膜多糖来自血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F，分别缀合至CRM197，其中所述多价免疫原性组合物被配制在无菌液体中以包含：约4.4μg/mL的每种多糖，除了6B为约8.8μg/mL...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·汉德科，A·拉希德贝基，
申请(专利权)人：惠氏有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国,US