用于检测人血中具有生物学活性MBL的试剂盒及其检测方法技术
【技术实现步骤摘要】
用于检测人血中具有生物学活性MBL的试剂盒及其检测方法
本专利技术属于甘露糖结合凝集素的ELISA检测
，具体涉及一种用于检测人血中具有生物学活性MBL的试剂盒及其检测方法。
技术介绍
甘露糖结合凝集素（mannan-bindinglectin，MBL）是主要由肝细胞分泌的高度保守的血浆蛋白，为C型凝集素超家族中胶凝素（collectins）家族成员。MBL也是一种急性期反应蛋白，在应激如病原体感染、外科手术等时，其血浆浓度可升高2-3倍。具有前抗体（ante-antibody）之称的MBL通过其糖识别域（carbohydraterecongnitiondomain，CRD）广泛识别分布于多种病原体如细菌、病毒、寄生虫、真菌等表面的糖结构，包括D-甘露糖、L-岩藻糖、N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰甘露糖胺等，其胶原样区（collagen-likeregion，CLR）结合甘露聚糖相关丝氨酸蛋白酶（MBL-associatedserineprotease，MBL-MASP），激活补体凝集素途径而发挥溶破和间接调理功能；或者与吞噬细胞胶凝素受体结合，以不依赖补体的方...
【技术保护点】
用于检测人血中具有生物学活性MBL的试剂盒，其特征在于：该试剂盒以甘露聚糖作为MBL的结合配体，以抗人MBL‑CLR mAb作为MBL的检测抗体。
【技术特征摘要】
1.用于检测人血中具有生物学活性MBL的试剂盒，其特征在于：该试剂盒以甘露聚糖作为MBL的结合配体，以抗人MBL-CLRmAb作为MBL的检测抗体。2.权利要求1所述的用于检测人血中具有生物学活性MBL的试剂盒的检测方法，其特征在于具体步骤为：用pH=9.6的碳酸盐缓冲液稀释甘露聚糖为5mg/L，100μL/孔包被酶联板，4℃过夜；加入1wt%BSA，37℃封闭2h，洗涤后加入含CaCl2的待检新鲜血浆，100μL/孔，37℃作用1h；洗涤后加入1:400稀释的Biotin-抗人MBL-CLR单克隆抗体，37℃作用1h；洗涤后，加入1:1000稀释的HRP-Avidin，100μL/孔，37℃作用45min；洗涤，加入TMB显色液显色，以2mol/LH2SO4溶液终止反应，在自动酶联仪上测定A450nm值。3.根据权利要求2所述的用于检测人血中具有生物学活性MBL的试剂盒的检测方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：王明永，王凡平，李俊鹏，王闪闪，穆永慧，王帅，杨帆，吴敏娜，李克君，段巨洪，
申请(专利权)人：新乡医学院，新乡医学院第三附属医院，
类型：发明
国别省市：河南,41
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