一种同时鉴别南、北柴胡的荧光PCR检测引物组、探针组合物、试剂盒及检测方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种同时鉴别南、北柴胡的引物组、探针组合物、试剂盒及检测方法和应用。本发明专利技术以南、北柴胡的特异性引物对待测样本DNA提取物进行PCR扩增，并设计柴胡通用引物作为质控，为正品南、北柴胡的检测和鉴定提供准确的靶标位点，快速准确进行鉴定。本发明专利技术的检测方法简便，快捷，有效，能够快速准确的鉴定出正品南、北柴胡成分。

【技术实现步骤摘要】
一种同时鉴别南、北柴胡的荧光PCR检测引物组、探针组合物、试剂盒及检测方法与应用
本专利技术涉及一种检测方法，具体涉及一种同时鉴别南、北柴胡的荧光PCR检测引物组、探针组合物、试剂盒及检测方法与应用。属于分子生物学检测

技术介绍
柴胡，是伞形科(Umbelliferae)柴胡属(BupleurumL.)植物的干燥根，始载于《神农本草经》，原名茈胡，列为上品。至《本草图经》始易其名为柴胡。具有解表和里、疏肝解郁、升举阳气之功效，为中医治疗少阳证的首选要药。2015年版《中国药典》规定北柴胡(BupleurumchinenseDC.)和狭叶柴胡(BupleurumscorzonerifoliumWilld.，即南柴胡)为正品。全世界已报道的柴胡属植物约有200种，中国分布42种、17变种、7变型。中国药用柴胡主要是来自25种、8个变种、3个变型的伞形科(belliferae)芹亚科(Apioideae)柴胡属(Bupleurum)的植物。柴胡属植物众多，分布广泛，在产地均作柴胡药用，造成柴胡药材的品种混杂问题十分严重，药材质量极不稳定。常见的混伪品有一些柴胡属植物，如黑柴胡(B本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时鉴别南、北柴胡的荧光PCR检测引物组，其特征在于，包括：(1)南柴胡源性荧光PCR检测引物，其核苷酸序列如下：南柴胡正向引物BSF：5'‑CAGAATCCCGTGAACCATCG‑3'，如SEQ ID NO.1所示；南柴胡反向引物BSR：5'‑TAAACCAGCCGCACGACG‑3'，如SEQ ID NO.2所示；(2)北柴胡源性荧光PCR检测引物，其核苷酸序列如下：北柴胡正向引物BCF：5'‑CGTCGTGCGGCTGGTTTA‑3'，如SEQ ID NO.3所示；北柴胡反向引物BCR：5‑TTGCTCACAGAGTAAACGGGCT‑3'，如SEQ ID NO.4所示；(3)柴胡...

【技术特征摘要】
1.一种同时鉴别南、北柴胡的荧光PCR检测引物组，其特征在于，包括：(1)南柴胡源性荧光PCR检测引物，其核苷酸序列如下：南柴胡正向引物BSF：5'-CAGAATCCCGTGAACCATCG-3'，如SEQIDNO.1所示；南柴胡反向引物BSR：5'-TAAACCAGCCGCACGACG-3'，如SEQIDNO.2所示；(2)北柴胡源性荧光PCR检测引物，其核苷酸序列如下：北柴胡正向引物BCF：5'-CGTCGTGCGGCTGGTTTA-3'，如SEQIDNO.3所示；北柴胡反向引物BCR：5-TTGCTCACAGAGTAAACGGGCT-3'，如SEQIDNO.4所示；(3)柴胡源性荧光PCR检测通用引物，其核苷酸序列如下：柴胡通用正向引物BUF：5'-AAACGACTCTCGGCAACG-3'，如SEQIDNO.5所示；柴胡通用反向引物BUR：5'-CGTGCCCTCAGCCTAATG-3'，如SEQIDNO.6所示。2.一种同时鉴别南、北柴胡的荧光PCR探针组合物，其特征在于，包括：(1)南柴胡特异性探针，其核苷酸序列如下：南柴胡特异性探针BSP：5'-CCTCCGCAGCTCGCTCGAAG-3'，如SEQIDNO.7所示；(2)北柴胡特异性探针，其核苷酸序列如下：北柴胡特异性探针BCP：5'-AAGAGAGTCACCGGAGATCGGAAAAC-3'，如SEQIDNO.8所示；(3)柴胡通用探针，其核苷酸序列如下：柴胡通用探针BUP：5'-CGTAGCGAAATGCGATACTTGGTG-3'，如SEQIDNO.9所示。3.根据权利要求2所述的探针组合物，其特征在于，探针序列的5’端修饰有报告基团，3’端修饰有淬灭基团，其中所述报告基...

【专利技术属性】
技术研发人员：步迅，刘艳艳，胡悦，范阳阳，谭晴晴，张全芳，
申请(专利权)人：山东省农业科学院生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：山东,37