本发明专利技术公开一种长春碱分子印迹聚合物，该印迹聚合物具有模板分子长春碱的印迹位点，由１摩尔份模板分子长春碱、３～１０摩尔份功能单体和１０～５０摩尔份交联剂再加入适量的致孔剂和引发剂在４０～８０℃下热引发聚合反应制得。本发明专利技术长春碱分子印迹聚合物对长春碱具有特殊亲和性、高度选择性及卓越的分子识别性能，可作为分离填料用于从天然植物或生物样品中提取、分离、富集模板分子－长春碱。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种有机高分子化合物，具体涉及一种生物碱的分子印迹聚合物，还涉及该聚合物的制备方法。
技术介绍
长春碱是从夹竹桃科植物长春花(Vinca rosea L.(Catharanthus roseus G.Don))中分离得到的具有明显抗肿瘤活性的二聚吲哚类生物碱，能够抑制微管蛋白装配，防止纺锤丝形成，从而使有丝分裂停止于中期。临床主要用于治疗何杰金氏病和绒毛上皮癌，对淋巴肉瘤、黑色素瘤、卵巢癌、白血病等也有一定疗效，是目前应用广泛的抗癌药物之一。长春碱的来源主要是天然植物，但在天然植物中的含量极低，仅为百万分之几至十万分之几，虽然利用化学合成和半合成的方法可以得到，但成本较高；组织培养、细胞培养仍不成熟；通过调控代谢途径的方法还处于研究阶段，所以从天然植物中提取分离仍是获取长春碱的主要途径。从天然植物中获取长春碱，主要是采用溶剂法或超临界法提取后再经柱色谱法分离得到。Gunasekera等.WO8803135，1988-05-05.(CA 1988，109134967)]将长春花全草用酸水浸提，酸水液经氨水碱化后用二氯甲烷萃取，总生物碱提取率为0.36％，其中长春碱为8.3％。Choi等.Chem Pharm Bull，2002，50(9)1294-1296.]以甲醇、三乙胺作夹带剂用二氧化碳超临界萃取，能较好地提取长春花中的长春碱。用以上方法得到的提取物还需用柱色谱分离纯化，才能获得高纯度的长春碱。柱色谱分离常采用一次过柱、二次过柱及多次过柱。一次过柱选用碱性氧化铝为柱填料，一般用苯-石油醚、苯-氯仿、苯-二氯甲烷、二氯甲烷-氯仿、乙酸乙酯-石油醚等以不同比例等度或梯度洗脱，本法是目前用于大规模生产的方法，缺点是产品的纯度不理想.Hung153200，1966-10-22.(CA 1967，66118854)]。二次过柱法是将粗提物先后用葡聚糖凝胶柱和硅胶柱处理，产品纯度较好.WO8803135，1988-05-05.(CA 1988，109134967)]，但此法所用的葡聚糖凝胶价格较贵，且多次使用会造成不可逆吸附，分离效果变差。Atta-ur-Rahman等.Planta Med，1983，47(4)246-247.]将总生物碱依次经氧化铝柱、硅胶柱以及制备型HPLC分离后，能得到高纯度的长春碱，但本法步骤繁琐，收率非常低，不适合扩大制备。Renault等.J Chromatogr A，1999，849(2)421-431.]用高效逆流色谱法分离长春花总生物碱，以甲基叔丁基醚-乙腈-水(4∶1∶5)静置得到的有机相和水相作为逆流的两相，可将长春碱和杂质完全分离，但分离量小，且难以保持柱效的长期稳定。综上所述，采用氧化铝、硅胶等常规填料的柱色谱法仍是目前分离纯化长春碱的主要方法。但由于长春碱在植物体内含量极低，同时又存在大量化学结构和性质相近的化合物，用常规的柱色谱分离，不仅难度大，而且在纯化过程中损失也多，难以同时得到高纯度、高收率的产品，因此寻找更有效的分离材料极为必要。分子印迹聚合物(MIP)是一种对模板分子具有高度选择性的高分子聚合物，可使用分子印迹技术制备，关键步骤包括(1)使模板分子与所选择的功能单体通过非共价键结合，从而形成空间结构上互补的模板-单体复合物；(2)使模板-单体复合物与交联剂共聚，从而形成交联的多孔网状聚合物(也称分子聚合物)；(3)从分子聚合物中提取模板分子，从而得到具有模板分子结合位点的分子印迹聚合物。在分子印迹聚合物上的这些结合位点，类似抗体-抗原，能以高的亲和性和特异的选择性再结合相应的模板分子，或近似结构的类似物。目前尚未见长春碱分子印迹聚合物的有关报道。
技术实现思路
鉴于现有技术存在上述不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种长春碱分子印迹聚合物。该聚合物对长春碱具有特殊亲和性和高度选择性。本专利技术解决上述技术问题的技术方案为一种长春碱分子印迹聚合物，该聚合物具有模板分子长春碱的印迹位点，它由下述摩尔份单体组分在40～80℃下热引发聚合反应10～24小时制得模板分子长春碱1份，功能单体甲基丙烯酸或甲基丙烯酸甲酯3～10份，交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯或三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯10～50份。制得本专利技术长春碱分子印迹聚合物的聚合反应中，所用的功能单体优选甲基丙烯酸；所用的交联剂优选乙二醇二甲基丙烯酸酯。本专利技术所述长春碱分子印迹聚合物的制备方法由以下步骤组成1)将长春碱、功能单体按1∶3～10摩尔比混匀于致孔剂甲苯、乙腈或氯仿中，再按长春碱∶交联剂∶引发剂＝1∶10～50∶0.9加入交联剂和引发剂偶氮二异丁腈，混均，除氧，抽真空，然后在40～80℃下热引发聚合反应10～24小时，得到含有长春碱的高分子聚合物；2)步骤1)所得聚合物研磨成细粉，再用丙酮反复沉降除去细小粒子，然后依次用10～40％冰醋酸甲醇、甲醇溶液洗涤去除长春碱分子，真空干燥，得到长春碱分子印迹聚合物。本专利技术所述长春碱分子印迹聚合物的制备方法中，所述的致孔剂优选甲苯或乙腈。本专利技术长春碱分子印迹聚合物可作为分离填料用于从天然植物中提取长春碱，还可用于分析样品的预处理、色谱技术中的制备性分离等。本专利技术长春碱分子印迹聚合物用于提取、分离、富集长春碱分子具有亲和性高、选择性强的优点。附图说明图1为长春碱对照品配制的待测样品的浓度C与吸光度A的关系曲线；图2为长春碱对照品配制的溶液的高效液相色谱图；图3为长春新碱对照品配制的溶液的高效液相色谱图；图4为下述实验三中淋洗液的高效液相色谱图；图5为下述实验三中洗脱液的高效液相色谱图；图6是下述实验四所制备的非印迹聚合物的红外光谱图；图7是制备例1所得长春碱分子印迹聚合物的红外光谱图。具体实施例方式一、制备例制备例1先将0.1mmol长春碱加入安瓿瓶中，加入甲基丙烯酸0.5mmol及甲苯1.5ml，在振荡器上反复振荡60分钟。再加入乙二醇二甲基丙烯酸酯4.5mmol和偶氮二异丁腈15mg，超声10分钟混合均匀后，用氮气吹扫5分钟，抽真空并使用酒精喷灯封管。热引发该聚合反应，并使之在60℃水浴中聚合反应18小时。聚合反应完成后，在聚合管内获得整料，击破该管并将该整料粉碎成较小的颗粒，并将所得的不规则形状颗粒筛分为25～75微米。为了除去25～75微米部分内的细颗粒(＜25微米)，使用丙酮反复沉降该材料，直到上层清液变得透明。然后将得到的颗粒转移到纸制套管中并放置在索氏提取器装置内，依次用10％冰醋酸甲醇洗涤48小时、甲醇溶液洗涤4小时，直到洗出液经UV(美国惠普公司生产，HP8453型紫外-可见分光光度仪，检测波长为264nm)检测，未见有长春碱的吸收峰为止，真空干燥，即得本专利技术所述的长春碱分子印迹聚合物。制备例2先将0.1mmol长春碱加入安瓿瓶中，加入甲基丙烯酸0.5mmol及甲苯1.5ml，在振荡器上反复振荡60分钟。再加入乙二醇二甲基丙烯酸酯4.5mmol和偶氮二异丁腈15mg，超声10分钟混合均匀后，用氮气吹扫5分钟，抽真空并使用酒精喷灯封管。热引发该聚合反应，并使之在40℃水浴中聚合反应24小时。聚合反应完成后，在聚合管内获得整料，击破该管并将该整料粉碎成较小的颗粒，并将所得的不规则形状颗粒筛分为25～75微米。为了除去25～75微米部本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种长春碱分子印迹聚合物，该聚合物具有模板分子长春碱的印迹位点，它由下述摩尔份单体组分在４０～８０℃下热引发聚合反应制得：模板分子长春碱１份，功能单体甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯３～１０份，交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯或三羟甲基丙烷三甲 基丙烯酸酯１０～５０份。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：朱全红，冯建涌，杨卫东，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]
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