一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法，包括以下步骤：取畜禽养殖废水，调节pH值至3‑4；用玻璃纤维滤膜过滤得到滤液；将滤液通过活化后的固相萃取柱，然后对固相萃取柱用超纯水淋洗后进行真空干燥处理；用体积比为0.5‑3 ：100的甲酸与甲醇混合溶液洗脱固相萃取柱，收集洗脱液；将洗脱液浓缩，得到浓缩液；将浓缩液用二甲基亚砜定容，将定容后的溶液用滤膜过滤，并将得到的滤液灭菌，得到灭菌样品；取灭菌样品，使用无激素胎牛血清的无酚红培养基进行梯度稀释，得到一系列不同浓度的稀释样品；将稀释样品进行细胞毒性实验。

【技术实现步骤摘要】
一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法
本专利技术涉及一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法，属于水环境分析检测领域。
技术介绍
近年来大量的抗生素作为兽药和饲料添加剂广泛应用于畜禽养殖业中，在动物疾病防治、提高饲料转化效率、促进动物生长发育方面发挥着重要作用。然而，这些抗生素并不能被畜禽全部吸收，而是通过粪便、尿液的形式排出体外，最终以废水形式进入养殖废水或周边的水体环境介质中，给生态健康带来不良影响，并通过食物链传递，对人体健康产生潜在危害。目前，畜禽养殖行业废水中抗生素的检测研究发现：畜禽养殖废水中普遍存在磺胺类、四环素类、大环内酯等多种抗生素。关于上述部分抗生素的分析检测，已有相关的文献和专利，其中CN105929047A公开了一种测定畜禽养殖废水中抗生素的方法。这些分析检测手段基本上是基于化学分析的结果，定量分析环境中某些已知痕量或微量污染物的污染水平（ng/L~mg/L）。然而，化学分析手段并不能分析检测各种未知污染物的污染水平，也不能定性分析复杂废水中多种抗生素的综合毒性效应。因此，为了对畜禽养殖行业废水中抗生素的环境风险进行评估，本专利技术在传统的化学本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取畜禽养殖废水，加入磷酸，调节pH值至3‑4；（2）将步骤（1）处理的水样，用玻璃纤维滤膜过滤得到滤液；（3）将滤液通过活化后的HLB固相萃取柱，然后对HLB固相萃取柱用超纯水淋洗后进行真空干燥处理；（4）用体积比为0.5‑3 ：100的甲酸与甲醇混合溶液洗脱HLB固相萃取柱，收集洗脱液；（5）将洗脱液浓缩，得到浓缩液；（6）将浓缩液用二甲基亚砜定容，将定容后的溶液用孔径为0.1‑0.5微米的滤膜过滤，并将得到的滤液灭菌，得到灭菌样品；（7）取灭菌样品，使用无激素胎牛血清的无酚红培养基进行梯度稀释，得到一系列不同浓...

【技术特征摘要】
1.一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取畜禽养殖废水，加入磷酸，调节pH值至3-4；（2）将步骤（1）处理的水样，用玻璃纤维滤膜过滤得到滤液；（3）将滤液通过活化后的HLB固相萃取柱，然后对HLB固相萃取柱用超纯水淋洗后进行真空干燥处理；（4）用体积比为0.5-3：100的甲酸与甲醇混合溶液洗脱HLB固相萃取柱，收集洗脱液；（5）将洗脱液浓缩，得到浓缩液；（6）将浓缩液用二甲基亚砜定容，将定容后的溶液用孔径为0.1-0.5微米的滤膜过滤，并将得到的滤液灭菌，得到灭菌样品；（7）取灭菌样品，使用无激素胎牛血清的无酚红培养基进行梯度稀释，得到一系列不同浓度的稀释样品；（8）将处于对数生长期的HepG2细胞用于药物刺激实验，待细胞贴壁后，将稀释样品对细胞进行暴露，通过CCK-8试剂盒对细胞活性进行检测，根据细胞活性的大小来表征抗生素联合毒性效应。2.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于，步骤（5）中，先...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘君，乔瑞平，田华，
申请(专利权)人：湖南永清水务有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43