用于治疗多发性骨髓瘤的CD38抗体制造技术

描述了与人CD38结合的分离的人单克隆抗体及基于相关抗体的组合物和分子。也描述了包含人抗体的药物组合物和使用人抗体的治疗和诊断方法。

【技术实现步骤摘要】
用于治疗多发性骨髓瘤的CD38抗体本申请是以下申请的分案申请：申请日：2006年3月23日；申请号：200680017915.7(PCT/DK2006/000166)；专利技术名称：同上。专利
本专利技术涉及与CD38结合的抗体，该抗体具有特定的特征，此外还可用于治疗多发性骨髓瘤。背景多发性骨髓瘤是一种B细胞恶化肿瘤，其特征是在骨髓中潜在积累具有低增生系数和延长的生活期的分泌型浆细胞。该疾病最终攻击骨骼和骨髓，在整个骨骼系统中造成多发性肿瘤和恶化。约1％的癌症及约略高于10％的血液性恶性疾病都属于多发性骨髓瘤(MM)。在老年人群中MM的发生率增加，平均诊断年龄约为61岁。目前可用的多发性骨髓瘤的治疗包括化疗、干细胞移植、(沙利度胺)、(硼替佐米)、(帕米磷酸)和(唑来瞵酸)。目前的治疗方案，包括联合使用诸如长春新碱、BCNU、美法仑、环磷酰胺、羟柔红霉素和强的松或地塞米松之类的化疗药剂，其完全缓解率仅约为5％，平均存活时间约为从诊断时间起36-48个月。最近关于使用高剂量化疗，然后进行自体骨髓或外周血单核细胞移植的进展提高了完全缓解率和缓解时间。但整个存活时间仅略有延长，而且没有治愈的迹象。最终，所有MM患者甚至在单独用干扰素-α(IFN-α)或联合使用类固醇进行维持性治疗的情况下都会复发。可用的MM化疗方法的效率受限于低的细胞增殖率和多重耐药的发生。对90％以上的MM患者而言，该病是化疗耐药的。因此，替代的治疗方法是寻找采用针对浆细胞上的表面抗原的免疫治疗法。CD38是表达在这种恶性浆细胞上的抗原的例子，而且在多种恶性血液性疾病中表达，包括但不限定于多发性骨髓瘤、B细胞慢性淋巴细胞白血病、B细胞急性淋巴细胞白血病、Waldenstrom氏大球蛋白血症、原发性系统性淀粉样变病、套细胞淋巴瘤、前淋巴细胞/粒细胞白血病、急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、滤泡淋巴瘤、NK细胞白血病和浆细胞白血病。已在不同来源的包括前列腺的腺上皮细胞在内的上皮/内皮细胞、胰腺的胰岛细胞、包括腮腺在内的腺体的胆管上皮细胞、支气管上皮细胞、睾丸和卵巢中的细胞及结直肠腺癌中的癌上皮细胞中描述了CD38的表达。CD38表达参与的疾病包括但不限定于肺的支气管上皮癌、乳腺癌(来源于乳腺的导管或小叶的上皮表面的恶性增生)、来源于b细胞的胰腺肿瘤(胰岛瘤)、来源于肠道上皮的肿瘤(例如腺癌和鳞状细胞癌)。在CNS中，成神经细胞瘤表达CD38。其它疾病包括前列腺中的癌、睾丸和卵巢癌中的精原细胞瘤。通常，CD38在实体组织中由造血细胞表达。对于造血细胞而言，大多数髓质胸腺细胞是CD38+，休眠的和循环的T和B细胞是CD38-，被激活的细胞是CD38+的。CD38也在约80％休眠NK细胞和单核细胞中，及在淋巴结生发中心淋巴母细胞、浆B细胞和某些滤泡内细胞中表达。CD38也可由枝状细胞表达。大部分正常的骨髓细胞，特别是前体细胞可表达CD38。另外，50-80％脐带血细胞是CD38+，并可在人血液中存活2到3年。除了淋巴前体细胞外，CD38也在红细胞和血小板上表达。对于实体组织而言，CD38可通过上皮内细胞和固有层淋巴细胞在内脏中、通过Purkinje细胞和神经原纤维缠结在脑中、通过上皮细胞在前列腺中、通过β细胞在胰中、通过破骨细胞在骨中、通过视网膜细胞在眼中及肌纤维膜在平滑和横纹肌中表达。关于CD38的功能包括黏附和信号传导事件中的受体介导及胞外酶活性。作为胞外酶，CD38以NAD+为底物，形成环化ADP-核糖(cADPR)和ADPR，及烟碱和烟酸腺嘌呤二核苷磷酸(NAADP)。已表明cADPR可作为Ca2+从内质网迁移的二级信使。除了通过Ca2+的信号传导外，CD38信号传导也通过抗原与T和B细胞上的受体复合物或其它类型的诸如MHC分子受体的复合物的相互作用而进行，并以这种方式参与几种细胞应答，而且可启动IgGl的转换和分泌。抗CD38抗体已有文献报道，例如LandeR，etal.，CellImmunol.220(1)，30-8(2002)、AusielloCM，etal.，TissueAntigens.56(6)，539-47(2000)，和CotnerT，etal.，lntJImmunopharmacol.3(3)，255-68(1981)。CD38具有多种功能，可以或不被与CD38结合的分子激活。例如，鼠抗CD38抗体IB4对CD38具有拮抗特性。已表明IB4在Jurkat细胞中可诱导T细胞激活(ZubiaurM，etal.，JImmunol.159(1)，193-205(1997)、toinducesignificantproliferationofperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)，toinducereleaseofsignificantIL-6levelsandtoinducereleaseofdetectableIFN-γlevels(Lande，ZubiaurMorra，Ansiello，同上)。专利技术概述本专利技术提供一种与以下编码的人CD38结合的抗体：(i)在其变异区含有分别如SEQIDNo：1和SEQIDNo：6所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；(ii)在其变异区含有分别如SEQIDNo：11和SEQIDNo：16所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；(iii)在其变异区含有分别如SEQIDNo：21和SEQIDNo：26所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；或(iv)在其变异区含有列于(i)、(ii)或(iii)中的保守序列变化的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸。本专利技术提供含有具有如SEQIDNo：10中的序列的VHCDR3的与人CD38结合的抗体。本专利技术提供含有具有如SEQIDNo：5中的序列的VLCDR3的序列和具有如SEQIDNo：10中的序列的VHCDR3的与人CD38结合的抗体。本专利技术提供与人CD38结合的抗体，它含有人轻链和人重链可变区，其中所述的轻链可变区包含具有如SEQIDNo：3中的序列的VLCDR1、具有如SEQIDNo：4中的序列的VLCDR2和具有如SEQIDNo：5中的序列的VLCDR3，重链可变区包含具有如SEQIDNo：8中的序列的VHCDR1、具有如SEQIDNo：9中的序列的VHCDR2和具有如SEQIDNo：10中的序列的VHCDR3。本专利技术提供与人CD38结合的抗体，它包含具有如SEQIDNo：2中的氨基酸序列的VL区。本专利技术提供与人CD38结合的抗体，它包含与如SEQIDNo：2中的序列至少约90％，例如至少约95％的氨基酸序列同一性的VL区。本专利技术提供与人CD38结合的抗体，它包含具有如SEQIDNo：7中的氨基酸序列的VH区。本专利技术提供与人CD38结合的抗体，它包含含有跨越SEQIDNo：7的VHCDR1-VHCDR3区的氨基酸序列的VH区。本专利技术提供与人CD38结合的抗体，它包含与如SEQIDNo：7中的序列或与如SEQIDNo：7中跨越VHCDR1-VHCDR3的区域至少约90％，例如至少约95％的氨基酸序列同一性的VH区。本专利技术提供与人CD38结合的抗体，它包含与如SEQIDNo：7中的序列或与如SEQIDNo：7中跨越VH本文档来自技高网...

【技术保护点】
由以下(i)－(iv)编码的、与人CD38结合的抗体(i)在其可变区含有分别如SEQ ID No：1和SEQ ID No：6所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；(ii)在其可变区含有分别如SEQ ID No：11和SEQ ID No：16所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；(iii)在其可变区含有分别如SEQ ID No：21和SEQ ID No：26所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；或(iv)在其可变区含有使如上述(i)、(ii)或(iii)所示的序列经保守的序列修饰所得的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸。

【技术特征摘要】
2005.03.23 DK PA200500429;2005.04.01 US US60/667571.由以下(i)－(iv)编码的、与人CD38结合的抗体(i)在其可变区含有分别如SEQIDNo：1和SEQIDNo：6所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；(ii)在其可变区含有分别如SEQIDNo：11和SEQIDNo：16所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；(iii)在其可变区含有分别如SEQIDNo：21和SEQIDNo：26所示的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸；或(iv)在其可变区含有使如上述(i)、(ii)或(iii)所示的序列经保守的序列修饰所得的核苷酸序列的人轻链和人重链核酸。2.与人CD38结合的抗体，包含具有如SEQIDNo：2所示氨基酸序列的VL区。3.与人CD38结合的抗体，其包含具有如SEQIDNo：7所示氨基酸序列的VH区。4.与人CD38结合的抗体，其包...

【专利技术属性】
技术研发人员：M德韦尔斯，Y格劳斯，J奥普林斯，PP帕伦，J范德温克尔，M范武格特，
申请(专利权)人：根马布股份公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK