【技术实现步骤摘要】
一种测定玉兰亚属植物中植物激素的方法
本专利技术属于生物化学领域，涉及植物激素的定性定量分析技术，具体涉及玉兰亚属植物中内源激素的测定方法，特别是玉兰亚属中红花玉兰和白玉兰中赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、脱落酸(ABA)的测定方法。
技术介绍
红花玉兰(MagnoliawufengensisL.Y.MaetL.R.Wang)是2004年3月于湖北五峰发现的木兰科木兰属玉兰亚属新种，该玉兰花被片数为9(～11)片，内外全红且花色均匀的特征十分罕见。随后在该区域的调查中更是发现了玉兰花被片数为12、15、18、24等，甚至多达46片的野生类群，将与红花玉兰花色相近，花被片数目增多的类群正式命名为多瓣红花玉兰(Magnoliawufengensisvar.multitepalaL.Y.MaetL.R.Wang)。随着红花玉兰新品种选育和繁殖工作的不断推进，红花玉兰苗木的产业化、商业化已成为必然趋势。植物内源激素如赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、脱落酸(ABA)和玉米素(ZT)对植物的生长发育有重要的调节作用。了解掌握红花玉兰植物激素水平的变化规律是生产上通过施...
【技术保护点】
一种测定玉兰亚属植物中植物激素的方法，其特征在于，包括植物激素的提取步骤、标准溶液制备步骤、高效液相色谱分析步骤和标准溶液测定步骤；所述植物激素的提取步骤如下：A)低温研磨植物组织样品至粉末，随后加入低温甲醇溶液，继续研磨成匀浆；B)将所述匀浆转入第一离心管中，第一低温避光浸提；C)第一离心，吸取第一上清液，在沉淀中加入低温甲醇溶液，第二低温避光浸提；D)第二离心，吸取第二上清液，合并第一上清液和第二上清液至第一鸡心瓶；E)向第一鸡心瓶中滴入氨水，35℃～40℃减压旋转蒸发至水相；F)将前述水相完全转移至第二离心管，向第二离心管中加入PVPP，摇床振荡后第三离心；吸取第三上...
【技术特征摘要】
1.一种测定玉兰亚属植物中植物激素的方法，其特征在于，包括植物激素的提取步骤、标准溶液制备步骤、高效液相色谱分析步骤和标准溶液测定步骤；所述植物激素的提取步骤如下：A)低温研磨植物组织样品至粉末，随后加入低温甲醇溶液，继续研磨成匀浆；B)将所述匀浆转入第一离心管中，第一低温避光浸提；C)第一离心，吸取第一上清液，在沉淀中加入低温甲醇溶液，第二低温避光浸提；D)第二离心，吸取第二上清液，合并第一上清液和第二上清液至第一鸡心瓶；E)向第一鸡心瓶中滴入氨水，35℃～40℃减压旋转蒸发至水相；F)将前述水相完全转移至第二离心管，向第二离心管中加入PVPP，摇床振荡后第三离心；吸取第三上清液，并用HCl溶液调节pH至2.5～3.0，随后加入等体积乙酸乙酯萃取，重复操作本步骤1～3次；G)合并萃取液至第二鸡心瓶，35℃～40℃减压浓缩至干；H)用初始流动相溶解后过微孔滤膜，得到样品待测液，低温保存。2.根据权利要求1所述的测定玉兰亚属植物中植物激素的方法，其特征在于，所述高效液相色谱分析步骤中：色谱条件为：色谱柱：AgilentZORBAXSB-C18；流动相A：甲醇，流动相B：0.1M乙酸水溶液；进样量：10μL；柱温：35℃；检测波长：254nm；用外标法进行定量测定。3.根据权利要求1或2所述的测定玉兰亚属植物中植物激素的方法，其特征在于，所述高效液相色谱分析步骤中，采用梯度洗脱，洗脱条件：0～5min，20％～20％A；5～10min，20％～30％A；10～20min，30％～30％A；20～23min，30％～40％A；23～40min，40％～40％A；40～45min，40％～20％A；流速：1mL/min。4.根据权利要求1所述的测定玉兰亚属植物中植物激素的方法，其特征在于，所述玉兰亚属植物为红花玉兰或白玉兰；所述植物激素为GA3、IAA和ABA中的一种、两种或三种；所述植物组织为红花玉兰花芽、花被片或叶片，或白玉兰的花被片或叶片。5.根据权利要求4所述的测定玉兰亚属植物中植物激素的方法，其特征在于，所述标准溶液制备步骤具体是，准确称取GA3标准品0.0057g、IAA标准品0.0052g、ABA标准品0.0042g，分别用甲醇定容至10mL，配制成浓度分别为570mg/L、520mg/L、420mg/L的标准贮备液，密封后于-20℃低温避光保存；用移液器吸取一定量各激素的标准贮备液，稀释成相当于原浓度1/4、1/8、1/16、1/32、1/64、1/128、1/256、1/512、1/1024、1/2048的混合标准溶液，低温避光保存备用。6.根据权利要求5所述的测定玉兰亚属植物中植物激素的方法，其特征在于，所述标准溶液测定步骤具体是，将GA3、IAA、ABA的标准贮备液分别在确定的色谱条件下进样，记录每种激素的保留时间，从而定性；再将混...
【专利技术属性】
技术研发人员：马履一，肖爱华，段劼，贾忠奎，汪力，陈发菊，桑子阳，张德春，陈思雨，赵潇，梁爽，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11
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