非编码RNA MALAT‑1是调控学习和记忆的靶标制造技术

本文提供了用于通过向对象的脑部施用组合物，而改善所述对象中的记忆或认知功能的方法，其中所述组合物包含：i)化合物，其增加MALAT‑1长非编码RNA的表达，ii)MALAT‑1长编码RNA核酸序列，或iii)至少一种源自MALAT‑1的piRNA核酸序列。本文还提供了针对其调节MALAT‑1长非编码RNA在脑细胞中的表达的能力而筛选候选化合物的方法。在某些实施方案中，还将如此鉴别出的增加表达的调节因子施用到实验室动物的脑部以测定此类调节因子对学习和记忆的影响。

Non RNA MALAT 1 encoding is the regulation of learning and memory target

This paper provides for the application to the brain through the composition of objects, and memory or cognitive function improvement in the object method, wherein the composition comprises: I) compounds, the increase of MALAT 1 long non expression of RNA encoding, II) MALAT 1 long nucleic acid sequence encoding RNA, or III) at least one from the MALAT 1 piRNA nucleic acid sequences. This paper also provides a method for adjusting the MALAT 1 long the expression of RNA encoding in the brain cells and screening of candidate compounds. In some embodiments, the increased expression of such regulatory factors was also applied to the brains of laboratory animals to determine the effects of such regulatory factors on learning and memory.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】非编码RNAMALAT-1是调控学习和记忆的靶标
本文提供了用于通过向对象的脑部施用组合物，而改善所述对象中的记忆或认知功能的方法，其中所述组合物包含：i)化合物，其增加MALAT-1长非编码RNA的表达，ii)MALAT-1长编码RNA核酸序列，或iii)至少一种源自MALAT-1的piRNA核酸序列。本文还提供了针对其调节MALAT-1长非编码RNA在脑细胞中的表达的能力而筛选候选化合物的方法。在某些实施方案中，还将如此鉴别出的增加表达的调节因子施用到实验室动物的脑部以测定此类调节因子对学习和记忆的影响。
技术介绍
神经功能和病理学以及所导致的性质和表型(例如，行为、记忆、疾病等)是动物(例如，人类)生物学、健康和幸福的至关重要的方面。然而，对其基础的分子和细胞生物学知之甚少。有鉴于此，缺乏用于在分子水平并以特定方式改变这些性质和表型的药物或研究工具。
技术实现思路
本文提供了用于通过向对象的脑部施用组合物，而改善所述对象中的记忆或认知功能的方法，其中所述组合物包含：i)化合物，其增加MALAT-1长非编码RNA的表达，ii)MALAT-1长编码RNA核酸序列，或iii)至少一种源自MALAT-1的piRNA核酸序列(例如，SEQIDNO:5-22或与SEQIDNO:5-22具有90-99%序列同一性的序列中的一种或多种)。本文还提供了针对其调节MALAT-1长非编码RNA在脑细胞中的表达的能力而筛选候选化合物的方法。在某些实施方案中，还将如此鉴别出的增加表达的调节因子施用到实验室动物的脑部以测定此类调节因子对学习和记忆的影响。在一些实施方案中，本文提供了用于改善对象中的记忆或认知功能的方法，包括：向所述对象(例如，人类对象)施用治疗有效剂量的组合物，所述组合物增加转移相关肺腺癌转录物1(MALAT-1)长非编码RNA在所述对象的神经系统细胞中的表达，其中所述施用颅内进行或其中所述施用在直接向所述对象脑部供血的血管中进行；其中所述组合物包含以下中的至少一种：i)化合物(例如，通过本文所述的筛选方法鉴别的)，其增加MALAT-1长非编码RNA在细胞中的表达，ii)第一核酸序列，其包含MALAT-1长编码RNA，或第一表达载体，其编码所述第一核酸序列；或iii)第二核酸序列，其编码至少一种源自MALAT-1的piRNA序列(例如，SEQIDNO:5-22中的一种或多种)，或第二表达载体，其编码所述第二核酸序列；并且其中所述记忆或认知功能的至少一项属性得到改善。在某些实施方案中，所述对象患有其中以陈述性记忆减退为症状的疾病。在其它实施方案中，所述分子是KCl或DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂。在进一步的实施方案中，所述DNMT抑制剂包括RG108。在另外的实施方案中，所述第一和/或第二表达载体包括：腺相关病毒(AAV)、腺病毒、单纯疱疹病毒、慢病毒或DNA质粒。在另外的实施方案中，所述组合物经由颅内接入装置通过颅内递送而向所述对象施用。在一些实施方案中，所述方法还包括步骤：在所述对象的脑部之外植入泵，其中所述泵与所述颅内接入装置的近端相连。在具体的实施方案中，所述颅内接入装置包括颅内导管。在其它实施方案中，所述第一和/或第二核酸分子包含化学修饰，所述化学修饰改善以下中的一项或多项或全部：核酸酶稳定性、触发先天免疫应答的可能性降低、降低脱靶效应的发生率、以及相对于非修饰核酸的改善的药效学。在进一步的实施方案中，所述至少一种化学修饰选自：硫代磷酸酯、硼烷磷酸酯、4'-硫代-核糖、锁核酸、2'-O-(2'-甲氧基乙基)、2'-O-甲基、2'-氟代、2'-脱氧-2'-氟代-b-D-阿拉伯糖核酸、吗啉代核酸类似物和肽核酸类似物。在一些实施方案中，所述第一和/或第二核酸序列连接至纳米颗粒或位于其内部，所述纳米颗粒经配置以用于穿过血脑屏障。在某些实施方案中，所述纳米颗粒包括脂质体。在另外的实施方案中，所述组合物被递送至迈纳特(Meynert)基底核、大脑皮层或海马体。在一些实施方案中，所述对象患有阿尔茨海默病和/或年龄相关的记忆减退。在进一步的实施方案中，所述对象患有记忆障碍。在另外的实施方案中，所述记忆障碍选自：毒物暴露、脑损伤、年龄相关的记忆障碍、轻度认知障碍、癫痫、精神发育迟缓和由于疾病导致的痴呆。在其它实施方案中，所述导致痴呆的疾病选自：帕金森病、阿尔茨海默病、AIDS、头部创伤、亨廷顿病、匹克氏病、克雅氏病、心脏手术后(疾病)、唐氏综合征、前交通动脉综合征和脑卒中症状。在具体的实施方案中，所述对象具有期望增强的正常的记忆功能。在一些实施方案中，所述施用在直接向所述对象脑部供血的血管中进行。本公开提供了用于筛选和鉴别化合物的方法，所述化合物调节MALAT-1长非编码RNA在脑细胞中的表达，所述方法包括：a)使脑细胞与候选试剂接触，并且b)检测所述MALAT-1长非编码RNA(例如，SEQIDNO:1的全部或一部分)和/或源自MALAT-1的piRNA(例如，SEQIDNO:5-22中的一种或多种)的表达水平，其中所述表达水平的提高或降低表明所述候选试剂是MALAT-1长非编码RNA在脑细胞中的调节因子。在某些实施方案中，所述鉴别出的调节因子提高MALAT-1RNA的表达水平，并且所述方法还包括：将所述鉴别出的MALAT-1长非编码RNA的调节因子施用至实验室动物的脑部，并且测定所述调节因子对所述实验室动物的记忆或学习的影响。在进一步的实施方案中，所述调节因子被鉴别为提高所述动物的记忆和/或学习。在具体的实施方案中，所述脑细胞是神经元或胶质细胞。在某些实施方案中，本公开提供了用于治疗对象中酒精成瘾(alcoholism)的方法，包括：向所述对象施用治疗有效剂量的组合物，所述组合物包含MALAT-1反义物(例如，SEQIDNO:2-4，或与SEQIDNO:2-4具有90-99%同一性的序列)，其中所述施用颅内进行或其中所述施用在直接向该对象脑部供血的血管中进行；并且其中所述对象中的酒精成瘾的至少一项属性得到改善。附图说明图1显示了实施例1中所用的威胁识别行为测定的示意图。图2显示了经受条件化恐惧训练(fearconditioningtraining)的小鼠，当被重新引入到训练环境中时，表现出增加的静止不动(freezing)。图3显示了小鼠训练(环境+电击)后，MALAT1在2小时的表达相比对照(仅环境本身或未接受过实验)有显著提高，与基于行为的学习中的作用相一致。图4显示了输注MALAT1反义寡核苷酸(ASO)导致在训练后24小时，条件化恐惧模型中的静止不动减少，这表明小鼠在没有MALAT1的情况下没有那样有效地巩固记忆。图5显示了即刻早期基因(IEG)的基因表达在用MALAT1ASO处理的小鼠与对照小鼠之间不存在显著改变。在此图中，M=经malat1ASO处理的，而P=PBS对照。图6显示了在经MALAT1ASO处理的小鼠中，小RNA的丰度有显著增加。图7显示了相比对照，经MALAT1ASO处理的小鼠中的DNA甲基化增加。定义如本文所用，术语“宿主”、“对象”和“患者”是指任何动物，包括但不限于所研究、分析、测试、诊断或治疗的人和非人动物(例如，狗、猫、牛、马、绵羊、禽类、鱼、甲壳动物等)。除非另本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于改善对象中的记忆或认知功能的方法，包括：向所述对象施用治疗有效剂量的组合物，所述组合物增加转移相关肺腺癌转录物1 (MALAT‑1)长非编码RNA在所述对象的神经系统细胞中的表达，其中所述施用颅内进行，或其中所述施用在直接向所述对象脑部供血的血管中进行；其中所述组合物包含以下的至少一种：i) 化合物，其增加MALAT‑1长非编码RNA在所述细胞中的表达，ii) 第一核酸序列，其包含所述MALAT‑1长编码RNA，或第一表达载体，其编码所述第一核酸序列；或iii) 第二核酸序列，其编码至少一种源自MALAT‑1的piRNA序列，或第二表达载体，其编码所述第二核酸序列；并且其中所述记忆或认知功能的至少一项属性得到改善。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.11.06 US 62/0763521.用于改善对象中的记忆或认知功能的方法，包括：向所述对象施用治疗有效剂量的组合物，所述组合物增加转移相关肺腺癌转录物1(MALAT-1)长非编码RNA在所述对象的神经系统细胞中的表达，其中所述施用颅内进行，或其中所述施用在直接向所述对象脑部供血的血管中进行；其中所述组合物包含以下的至少一种：i)化合物，其增加MALAT-1长非编码RNA在所述细胞中的表达，ii)第一核酸序列，其包含所述MALAT-1长编码RNA，或第一表达载体，其编码所述第一核酸序列；或iii)第二核酸序列，其编码至少一种源自MALAT-1的piRNA序列，或第二表达载体，其编码所述第二核酸序列；并且其中所述记忆或认知功能的至少一项属性得到改善。2.权利要求1的方法，其中所述对象患有其中以陈述性记忆减退为症状的疾病。3.权利要求1的方法，其中所述分子为KCl或DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂。4.权利要求3的方法，其中所述DNMT抑制剂包括RG108。5.权利要求1的方法，其中所述第一和/或第二表达载体包括：腺相关病毒(AAV)、腺病毒、单纯疱疹病毒、慢病毒或DNA质粒。6.权利要求1的方法，其中所述组合物经由颅内接入装置通过颅内递送而向所述对象施用。7.权利要求6的方法，还包括步骤：在所述对象的脑部之外植入泵，其中所述泵与所述颅内接入装置的近端相连。8.权利要求6的方法，其中所述颅内接入装置包括颅内导管。9.权利要求1的方法，其中所述第一和/或第二核酸分子包含化学修饰，所述化学修饰改善以下中的一项或多项或全部：核酸酶稳定性、触发先天免疫应答的可能性降低、降低脱靶效应的发生率、以及相对于非修饰核酸的改善的药效学。10.权利要求9的方法，其中所述至少一种化学修饰选自：硫代磷酸酯、硼烷磷酸酯、4'-硫代-核糖、锁核酸、2'-O-(2'-甲氧基乙基)、2'-O-甲基、2'-氟代、2'-脱氧-2'-氟代-b-D-阿拉伯糖核酸、吗啉代核酸类似物和肽核酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：TP迈克尔，S莫特利，
申请(专利权)人：艾比斯生物科学公司，
类型：发明
国别省市：美国,US