利用胡杨叶制取水杨苷的方法技术

本发明专利技术属于植物中提取水杨苷技术领域，具体涉及利用胡杨叶制取水杨苷的方法。本发明专利技术以自然干燥的胡杨叶为原料，利用甲醇萃取后经脱色、絮凝、过滤、石油醚及三氯甲烷除杂后，加入乙醇结晶即得含量高达95wt%的水杨苷晶体。可实现胡杨叶的资源开发及利用，为企业生产水杨苷提供参考。本发明专利技术不仅工艺简洁并针对胡杨叶的理化特性进行设计，能够高效从胡杨叶中提取高纯度水杨苷，而且扩大了水杨苷的制备原料范围，利于扩大水杨苷的生产规模和市场应用。

Method for producing poplar glycosides by utilizing Populus euphratica leaves

The invention belongs to the technical field of extracting glycosides in plants, in particular to a method for producing poplar glycosides by utilizing Populus euphratica leaves. The present invention uses natural dried Populus euphratica leaves as raw material and uses methanol to extract, then discolor, flocculate and filter, remove petroleum ether and chloroform, and then add ethanol to crystallize, then get the content of 95wt% crystal. It can realize the exploitation and utilization of the resources of Populus euphratica leaves, and provide reference for the production of poplar glycosides in enterprises. The physicochemical properties of the invention not only has simple process and for the design of Populus euphratica leaf, efficiently from Populus euphratica leaf extracting high purity salicin, and expand the salicin preparation scope of raw materials, to expand the scale of production and market application of salicin.

【技术实现步骤摘要】
利用胡杨叶制取水杨苷的方法
本专利技术属于植物中提取水杨苷
，具体涉及利用胡杨叶制取水杨苷的方法。
技术介绍
水杨苷(Salicin，salicoside)又称柳醇、水杨素，分子式为C13H18O7，分子中有游离酚羟基，属于酚苷类化合物。为白色晶体，可溶于水，易溶于沸水，难溶于乙醇，不溶于醚类或氯仿，但能溶于碱溶液、吡啶或冰醋酸中。现有的水杨苷生产工艺大多采用生石灰法、酸提、含水乙醇对柳皮、柳枝、柳叶进行提取，并结合结晶方法得到粗品。进一步提纯多结合酶解法、树脂吸附法、超临界二氧化碳萃取法等。各种方法都存在各自的优缺点，如生石灰法不利于生产车间内粉末控制，但工艺简单，性价比高，主要是利用碱性条件去除鞣质类物质；二氧化碳超临界萃取法提取效率高，但成本过高；复合提取方法中，采用水提法所得产品中杂质较多，对分离纯化会带来困难；醇提法或正丁醇萃取法方法简单，但是水杨苷在乙醇及正丁醇中的溶解度低，因此醇提法效率极低；膜过滤法又很难去除分子量低于5000的有机酸、单糖及部分色素类物质，仅可去除多糖及大分子颗粒。综合而言，上述方法更适合用于对柳叶、枝、皮中水杨苷的提取，因为其鞣质类物质和大分子颗粒含量较高。目前水杨苷生产工艺中，未见采用胡杨叶作为原料的技术方案，盖因胡杨叶属于水杨苷制备原材料选择方向性的空白区域，同时胡杨叶中含鞣质和多糖大分子颗粒较少，现有技术中的工艺不适用胡杨叶中水杨苷的提取。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用胡杨叶制取水杨苷的方法。本专利技术不仅工艺简洁并针对胡杨叶的理化特性进行设计，能够高效从胡杨叶中提取高纯度水杨苷，而且扩大了水杨苷的制备原料范围，利于扩大水杨苷的生产规模和市场应用。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：利用胡杨叶制取水杨苷的方法，步骤如下：1）浸提：按照料液比1:10-20向干燥的胡杨叶粉末中加入甲醇浸提得样液；2）过滤除杂：步骤1）所得样液除醇并进行脱色、絮凝和过滤，取滤液并顺次进行石油醚除杂和浓缩，即得浓缩样液；3）初结晶：步骤2）所得浓缩样液加入乙醇并冷冻结晶，滤取即得水杨苷含量为60-70wt%的晶体；4）再结晶：将步骤3）所得晶体水溶并加入三氯甲烷除杂后再次加入乙醇并冷冻结晶，滤取即得水杨苷含量为95wt%以上的晶体。优选的，所述浸提步骤如下：将自然干燥后的胡杨叶粉碎，然后按料液比为1:15加入体积浓度50%的甲醇溶液，在60℃条件下浸提90min，冷却过滤取滤液，即得样液。优选的，所述过滤除杂步骤如下：将步骤1）所得的样液除醇后，加入样液总量3wt%的活性炭脱色1h，再加入样液体积总量1%的聚合硫酸铝溶液和样液总量1wt%的活性白土进行絮凝，然后过滤取滤液；向滤液中加入等体积的石油醚萃取并静置分相，取下相浓缩至1/2体积，即得浓缩样液。采用石油醚萃取滤液中的弱极性杂质。优选的，所述初结晶步骤如下：按1:5体积比，向步骤2）所得浓缩样液中加入体积浓度95%的乙醇溶液并在冷冻条件下结晶24小时，滤取即得水杨苷含量为60-70wt%的晶体。优选的，所述再结晶步骤如下：将步骤2）所得晶体水溶后，加入水溶液等体积的三氯甲烷萃取并静置分相，取上相并按1:5体积比加入体积浓度95%的乙醇溶液并在冷冻条件下结晶24小时，滤取即得水杨苷含量不低于95wt%的晶体。采用三滤甲烷萃取晶体水溶液中的中极性杂质。优选的，样液于0.1Mp、60℃的条件下脱离并回收甲醇；石油醚萃取静置分相时，取上相回收石油醚。优选的，所述三氯甲烷萃取静置分相时，取下相回收三氯甲烷。优选的，所述聚合硫酸铝溶液的浓度为7wt%。作为首次采用胡杨叶作为水杨苷提取原材料的工艺，其中萃取溶剂和相关工艺参数需要根据胡杨叶的理化特性进行创造性的试验选择：1、萃取溶剂的选择由于胡杨叶中鞣质类物质含量较低，所以专利技术人根据相似相溶的原理，从不同种类的常规的有机萃取溶剂中确定对水杨苷溶解效果最高的溶剂：准确称取0.1g水杨苷标准品，加1mL冰冻有机溶剂(包括甲醇、乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、正丁醇、正己烷和石油醚)，震荡5min。如若不溶解再加1mL，直到加至5mL，若还是不溶解，则在50℃水浴锅中加热。若溶解则放于-25℃冰箱中看溶解物是否会析出。要是不溶解，再加有机溶剂至10mL，观察现象。结果证明甲醇水溶液溶解最好。2、最佳萃取参数确定确定萃取液为甲醇水溶液后，对甲醇水溶液的体积浓度以及与胡杨叶的料液比和提取时间进行确定。称取九份胡杨叶粉末5g于锥形瓶中，分别按不同料液比加入不同浓度的甲醇，在60°C水浴锅中按不同时间提取后取出抽滤，将滤液浓缩蒸干后用10倍水溶解，离心去除水不溶物。上清液用等体积的石油醚除杂后静置分相，取水相浓缩蒸干称重后检测纯度。表1胡杨叶中水杨苷纯化L9（34）甲醇正交试验结果编号A(萃取剂体积浓度)B(萃取时间)C(料液比)空列纯度wt%11(无水甲醇)1（1h）1(1:15)126.34212（1.5h）2(1:20)246.45313（2h）3(1:25)336.3442（75%甲醇）12340.455223130.536231246.4873（50%甲醇）13245.768321343.569332138.78由表1可知，通过方差分析，萃取剂浓度、萃取时间和料液比三个因素对胡杨叶中水杨苷的纯化都不具有显著影响。故按极差分析知A3C2B3。虽然方差分析不显著，但极差优顺为A-C-B，所以A应在最佳水平即A3，其他可在任意水平。综上所述，最佳组合为A3B1C1，即体积浓度50%的甲醇在60℃下以1:15的料液比提取1h。3、有机溶剂除杂剂的确定对经过除醇、脱色和絮凝除杂后的萃取液分析，其中杂质多为弱极性杂质和中极性杂质，分别采用乙酸乙酯、正丁醇、三氯乙烯、三氯乙烷、正己烷和石油醚对杂质进行萃取，结果表明除去中等极性杂质的溶剂选择三氯乙烷，除去弱极性杂质的选择石油醚。本专利技术与现有技术相比，具有如下优点：1）工艺简洁，能够高效从胡杨叶中提取高纯度水杨苷，扩大了水杨苷的制备原料范围，利于扩大水杨苷的生产规模和市场应用。2）针对胡杨叶含鞣质物和多糖大颗粒物质较少的理化特性进行设计，摒弃现有技术中的石灰法除鞣质和使用膜处理去除多糖等杂质的误区性技术引导，采用甲醇水溶液直接萃取水杨苷，并配合石油醚除去弱极性杂质、三氯乙烷除去中等极性杂质，最终结晶制得高纯度的水杨苷。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例11）将自然干燥后的胡杨叶粉碎，然后按料液比为1:15加入体积浓度50%的甲醇溶液，在60℃条件下浸提90min，冷却过滤取滤液，即得样液。2）所得的样液于0.1Mp、60℃的条件下脱离并回收甲醇后，加入样液总量3wt%的活性炭脱色1h，再加入样液体积总量1%的聚合硫酸铝溶液和样液总量1wt%的活性白土进行絮凝，然后过滤取滤液；向滤液中加入等体积的石油醚萃取弱极性杂质并静置分相，取下相浓缩至1/2体积，即得浓缩样液；取上相并回收石油醚。3）按1:5体积比，向步骤2）所得浓缩样液中加入体积浓度95%的乙醇溶液并在冷冻条件下结晶24小时，滤取即得水本文档来自技高网...

【技术保护点】
利用胡杨叶制取水杨苷的方法，其特征在于，步骤如下：1）浸提：按照料液比1:10‑20向干燥的胡杨叶粉末中加入甲醇浸提得样液；2）过滤除杂：步骤1）所得样液除醇并进行脱色、絮凝和过滤，取滤液并顺次进行石油醚除杂和浓缩，即得浓缩样液；3）初结晶：步骤2）所得浓缩样液加入乙醇并冷冻结晶，滤取即得水杨苷含量为60‑70wt%的晶体；4）再结晶：将步骤3）所得晶体水溶并加入三氯甲烷除杂后再次加入乙醇并冷冻结晶，滤取即得水杨苷含量为95wt%以上的晶体。

【技术特征摘要】
1.利用胡杨叶制取水杨苷的方法，其特征在于，步骤如下：1）浸提：按照料液比1:10-20向干燥的胡杨叶粉末中加入甲醇浸提得样液；2）过滤除杂：步骤1）所得样液除醇并进行脱色、絮凝和过滤，取滤液并顺次进行石油醚除杂和浓缩，即得浓缩样液；3）初结晶：步骤2）所得浓缩样液加入乙醇并冷冻结晶，滤取即得水杨苷含量为60-70wt%的晶体；4）再结晶：将步骤3）所得晶体水溶并加入三氯甲烷除杂后再次加入乙醇并冷冻结晶，滤取即得水杨苷含量为95wt%以上的晶体。2.如权利要求1所述利用胡杨叶制取水杨苷的方法，其特征在于，所述浸提步骤如下：将自然干燥后的胡杨叶粉碎，然后按料液比为1:15加入体积浓度50%的甲醇溶液，在60℃条件下浸提90min，冷却过滤取滤液，即得样液。3.如权利要求1所述利用胡杨叶制取水杨苷的方法，其特征在于，所述过滤除杂步骤如下：将步骤1）所得的样液除醇后，加入样液总量3wt%的活性炭脱色1h，再加入样液体积总量1%的聚合硫酸铝溶液和样液总量1wt%的活性白土进行絮凝，然后过滤取滤液；向滤液中加...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘凤霞，王莹，薛刚，娄源民，项东方，宋伟，何际芳，
申请(专利权)人：南阳理工学院，李闻，
类型：发明
国别省市：河南,41