益心复脉颗粒中农药残留的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种益心复脉颗粒中农药残留的检测方法，该方法为气相色谱-质谱联用的，所述方法包括以下步骤：供试品溶液的制备、基质匹配标准工作溶液以及使用气相色谱-质谱进行检测，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：取益心复脉颗粒，加入水使溶解，再加入正己烷，超声提取，随后加入氯化钠和醋酸钠混匀，离心得到上清液，水浴旋蒸至近干，用丙酮复溶，加入无水硫酸镁、硅酸镁吸附剂，C18，离心，取上清液，既得。

Method for detecting pesticide residue in Yixin Tongmai granule

The present invention relates to a method for detecting yixinfumai granules in pesticide residues, the method of gas chromatography-mass spectrometry, the method comprises the following steps: sample solution preparation, matrix matched standard solution and the use of gas chromatography-mass spectrometry detection, the sample the solution preparation comprises the following steps: taking yixinfumai granules, adding water dissolving, adding hexane, ultrasonic extraction, then adding sodium chloride and sodium acetate mix, centrifuging to obtain supernatant, water evaporation to nearly dry, dissolved with acetone, adding anhydrous magnesium silicate adsorbents, Magnesium Sulfate, C18, centrifugation, supernatant, which.

【技术实现步骤摘要】
益心复脉颗粒中农药残留的检测方法
本专利技术涉及一种中药制剂中农药残留物质的检测方法，特别涉及一种检测益心复脉颗粒中74种农残的方法。
技术介绍
药物首要的质量特征是安全性。中药的安全性除了自身的物质基础影响外，就是生长、加工、储存、生产等环节中引入的外来有害物质，残留农药就是其中之一。所谓农药残留：指受生长环境的影响或者在中药种植、加工、贮藏过程中使用农药后，残留在药用部位中的农药母体以及有毒理学意义的特殊衍生物，如降解或转化产物、代谢物以及工业杂质等。以农药残留为代表的外源性有害残留物是影响中药质量及安全性的重要因素，已成为制约中药走向国际市场的瓶颈之一，严重滞后了我国中药材现代化、国际化的步伐。因此，为了保证药品的安全性，必须对农药残留的检测和控制予以足够的重视。益心复脉颗粒是天津天士力(辽宁)制药有限责任公司出品的药品，其功能主治为益气养阴，活血复脉；用于气阴两虚，心血内阻，胸痹心痛，胸闷不舒，心悸脉结代。具有载药量高、起效快、无异味、携带方便等特性。益心复脉颗粒是由生晒参、黄芪、麦冬、五味子、丹参、川芎6味药材组成的复方制剂，其中生晒参：具有大补元气，益血，养心安神的作用。生晒参能提高脑、体力活动能力和免疫功能，增强抗应激、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、益心、复脉、安神生津、补肺健脾。黄芪：有补气升阳、生血行滞之力，现在药理研究发现，黄芪还可清除氧自由基，减轻机体脂质过氧化损伤。麦冬：具有甘寒清润，善清心肺之热而养阴除烦，兼可清润胃肠而止渴润燥。抗实验性心律失常、增加冠脉流量。五味子：是一种具有辛、甘、酸、苦、咸五种药性。选用传统正品北五味入药，品质优良。收敛固涩，益气生津，补肾宁心。用于久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗，盗汗，津伤口渴，短气脉虚，内热消渴，心悸失眠。丹参：有活血祛瘀之功，不仅可以抑制血小板聚集，抑制血栓形成而且所含丹参素还可抑制胆固醇的合成、抗细胞氧化。川芎：活血行气，祛风止痛。可提高血小板中cAMP含量，降低TXA2活性；降低血小板表面活性、抑制血小板聚集、使已聚集血小板解聚。益心复脉颗粒的药物活性成分很多，主要包括：黄芪甲苷，川芎嗪，三七皂苷，丹参酮等。本专利技术意在通过在原有质量控制的基础上，增加农药残留的检测。中药之所以会受到农药残留的污染，一方面是药材在生长过程中从环境如土壤、水源、空气中摄入，另一个方面是农药的不合理使用引起的，如过量使用化学农药或使用已禁用的农药等。此外，为了延长储存时间，中药材多喷撒农药或采用农药熏蒸以达到防虫、防霉的目的。另外，炮制加工过程中辅料也是引入农药污染的途径之一。中药残留的检测方法，比较有代表性的是《中国药典》2005年版中出现的对单味中药中农药残留的检测，单味中药有黄芪和甘草等，涉及的检测内容包括检测有机氯类农药残留、有机磷类农药残留、拟除虫菊酯类农药残留。方法是气相色谱法，气相色谱法常用的检测器有氮磷检测器(NPD)、氢火焰离子化检测器(FID)、电子捕获检测器(ECD)和火焰光度检测器(FPD)。在多农残分析中，由于农药种类多、理化性质差异较大，普通气相检测器多具有针对性(如含磷化合物可采用NPD和FPD检测器)，难以满足不同元素组成、不同极性的农残检测。此外，常规检测器抗基质干扰能力弱，对检测结果缺乏准确判断，特别是假阳性结果难以排除。因此，针对复杂基质中多农残检测，一般推荐采用色谱-质谱联用技术。气相色谱串联-质谱法对农药残留的检测，涉及的范围还主要是蔬菜、水果、单味的中药和土壤等，该方法中对样品的前处理包括对样品的提取和净化，其中提取所用的试剂多为乙腈、乙酸乙酯和丙酮，至今没有见到采用该方法对中药复方制剂的农药残留进行检测的报道。本专利技术采用气相色谱-质谱联用的方法检测益心复脉颗粒中74种农残的方法，该方法灵敏度高、准确、可靠。通过本专利技术的检测方法可以更加严格的控制产品质量，确保益心复脉颗粒的品质和提高安全性。
技术实现思路
本专利技术提供的一种气相色谱-质谱联用的方法检测益心复脉颗粒中74种农残的方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备；取益心复脉颗粒，加入水使溶解，再加入正己烷，超声提取，随后加入氯化钠和醋酸钠混匀，离心得到上清液，水浴旋蒸至近干，用丙酮复溶，加入无水硫酸镁、硅酸镁吸附剂和C18，离心，得到上清供试品溶液。2)基质匹配标准工作溶液的制备标准储备液的配制：取农药标准品10mg于10mL量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度，配成质量浓度为1.0g/L的标准储备液，储存于4℃冰箱中备用；混合储备溶液：分别精密移取一定体积的各农药标准储备液于10mL量瓶中，用丙酮稀释定容，配制成各农药组分质量浓度均为10.0mg/L的混合储备溶液，于-20℃冰箱中保存；(说明，此部分所述混合储备溶液为74种农药对照品的混合物，各农药的浓度为10.0mg/L，下同)混合标准工作溶液：向10mL量瓶中加入适量内标溶液及混合储备溶液，用丙酮稀释定容，得到质量浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.25μg/L的混合标准工作溶液；基质匹配标准工作溶液：按照供试品溶液的步骤提取、净化不含目标化合物的“空白”样品，以净化液作为溶剂，将混合标准工作溶液中的丙酮用净化液替换，其余步骤同上，最终得到基质匹配标准工作溶液；对照品为敌敌畏、四氯硝基苯、二苯胺、杀虫脒、氟乐灵、α-六六六、六氯苯、五氯苯甲醚、氯硝胺、β-六六六、五氯硝基苯、γ-六六六、特丁硫磷、δ-六六六、七氟菊酯、百菌清、五氯苯胺、甲基对硫磷、甲基毒死蜱、乙烯菌核利、七氯、皮蝇磷、八氯二丙醚、杀螟硫磷、甲基五氯苯硫醚、抑菌灵、艾氏剂、毒死蜱、对硫磷、三氯杀螨醇、氯酞酸二甲酯、三唑酮、仲丁灵、溴硫磷、二甲戊乐灵、氟虫腈、环氧七氯B、环氧七氯A、氧化氯丹、哌草丹、三唑醇、腐霉利、反式氯丹、乙基溴硫磷、o,p'-DDE、氟节胺、α-硫丹、顺式氯丹、p,p'-DDE、狄氏剂、o,p'-DDD、异狄氏剂、虫螨腈、除草醚、β－硫丹、p,p'-DDT、o,p'-DDT、硫丹硫酸酯、p,p'-DDD、溴螨酯、联苯菊酯、甲氧滴滴涕、甲氰菊酯、苯醚菊酯、灭蚁灵、氯氟氰菊酯、氟丙菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、喹禾灵、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯；3)气相色谱-质谱联用仪器的色谱条件如下：所述色谱条件为：气相色谱柱(28-32m×0.23-0.27μm×0.23-0.27mm)；载气：氦气，流速为1.6-1.75mL/min；进样口温度为240-260℃；进样量0.08-1.2μL，不分流进样；升温程序：48-52℃保持0.08-1.2min，以23-27℃/min的速度升温至120-130℃，再以8-12℃/min升温至280-320℃，保持6-8min，总运行时间为28-30min；所述质谱条件为：电子轰击电离源(EI源)电压为68-72eV；离子源温度180-220℃；接口温度240-260℃；溶剂延迟时间2.7-2.9min；碰撞气：氩气；通过全扫描模式确定各组分的保留时间和一级碎片离子；通过选择离子监测模式确定各组分的二级碎片离子和相应的碰撞电压；4)分别精密吸取供试品溶液和基质匹配标准工作溶液各1μL，注入气相色谱-串联质谱仪，得到色谱图，按内标本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测益心复脉颗粒中74种农药残留的方法，其特征在于，该方法为气相色谱‑质谱联用的，74种农药为敌敌畏、四氯硝基苯、二苯胺、杀虫脒、氟乐灵、α‑六六六、六氯苯、五氯苯甲醚、氯硝胺、β‑六六六、五氯硝基苯、γ‑六六六、特丁硫磷、δ‑六六六、七氟菊酯、百菌清、五氯苯胺、甲基对硫磷、甲基毒死蜱、乙烯菌核利、七氯、皮蝇磷、八氯二丙醚、杀螟硫磷、甲基五氯苯硫醚、抑菌灵、艾氏剂、毒死蜱、对硫磷、三氯杀螨醇、氯酞酸二甲酯、三唑酮、仲丁灵、溴硫磷、二甲戊乐灵、氟虫腈、环氧七氯B、环氧七氯A、氧化氯丹、哌草丹、三唑醇、腐霉利、反式氯丹、乙基溴硫磷、o,p'‑DDE、氟节胺、α‑硫丹、顺式氯丹、p,p'‑DDE、狄氏剂、o,p'‑DDD、异狄氏剂、虫螨腈、除草醚、β－硫丹、p,p'‑DDT、o,p'‑DDT、硫丹硫酸酯、p,p'‑DDD、溴螨酯、联苯菊酯、甲氧滴滴涕、甲氰菊酯、苯醚菊酯、灭蚁灵、氯氟氰菊酯、氟丙菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、喹禾灵、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯。

【技术特征摘要】
2015.12.28 CN 20151101692411.一种检测益心复脉颗粒中74种农药残留的方法，其特征在于，该方法为气相色谱-质谱联用的，74种农药为敌敌畏、四氯硝基苯、二苯胺、杀虫脒、氟乐灵、α-六六六、六氯苯、五氯苯甲醚、氯硝胺、β-六六六、五氯硝基苯、γ-六六六、特丁硫磷、δ-六六六、七氟菊酯、百菌清、五氯苯胺、甲基对硫磷、甲基毒死蜱、乙烯菌核利、七氯、皮蝇磷、八氯二丙醚、杀螟硫磷、甲基五氯苯硫醚、抑菌灵、艾氏剂、毒死蜱、对硫磷、三氯杀螨醇、氯酞酸二甲酯、三唑酮、仲丁灵、溴硫磷、二甲戊乐灵、氟虫腈、环氧七氯B、环氧七氯A、氧化氯丹、哌草丹、三唑醇、腐霉利、反式氯丹、乙基溴硫磷、o,p'-DDE、氟节胺、α-硫丹、顺式氯丹、p,p'-DDE、狄氏剂、o,p'-DDD、异狄氏剂、虫螨腈、除草醚、β－硫丹、p,p'-DDT、o,p'-DDT、硫丹硫酸酯、p,p'-DDD、溴螨酯、联苯菊酯、甲氧滴滴涕、甲氰菊酯、苯醚菊酯、灭蚁灵、氯氟氰菊酯、氟丙菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、喹禾灵、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯。2.根据权利要求书1所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：供试品溶液的制备、基质匹配标准工作溶液以及使用气相色谱-质谱进行检测。3.根据权利要求书2所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：取益心复脉颗粒，加入水使溶解，再加入正己烷，超声提取，随后加入氯化钠和醋酸钠混匀，离心得到上清液，水浴旋蒸至近干，用丙酮复溶，加入无水硫酸镁、硅酸镁吸附剂，C18，离心，取上清液，既得。4.根据权利要求书3所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：称取益心复脉颗粒1.8-2.2g加入8-12mL水使完全溶解，加入18-22mL正己烷，涡旋混匀后超声提取4-6min，加入3-5g氯化钠和2-4g醋酸钠，涡旋混匀，剧烈震荡0.8-1.2min，随后以8000-12000r/min的速率离心4-6min，精确移取8-12mL上清液，于38-42℃水浴旋蒸至近干，用1.8-2.2mL丙酮复溶，移取1.4-1.6mL提取液到预先装有48-52mg无水硫酸镁、48-52mg硅酸镁和48-52mgC18的聚乙烯离心管中，涡旋混匀，以10000-14000r/min的速率离心2-4min，得到上清供试品溶液。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括以下步骤：精确称取益心复脉颗粒2.0g加入10mL水使试样完全溶解，加入20mL正己烷，涡旋混匀后超声提取5min，加入4.0g氯化钠和3.0g醋酸钠，涡旋混匀，剧烈震荡1min，随后以10000r/min的速率离心5min，精确移取10.0mL上清液，于40℃水浴旋蒸至近干，用2mL丙酮复溶，移取1.5mL提取液到预先装有50mg无水硫酸镁、50mg硅酸镁和50mgC18的聚乙烯离心管中，涡旋混匀，以12000r/min的速率离心3min，得上清液。6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用仪器的色谱条件如下：所述色谱条件为：气相色谱柱(28-32m×0.23-0.27μm×0.23-0.27mm)；载气：氦气，流速为1.6-1.75mL/min；进样口温度为240-260℃；进样量0.08-1.2μL，不分流进样；升温程序：48-52℃保持0.08-1.2min，以23-27℃/min的速度升温至120-130℃，再以8-12℃/min升温至280-320℃，保持6-8min，总运行时间为28-30min；所述质谱条件为：电子轰击电离源(EI源)电压为68-72eV；离子源温度180-220℃；接口温度240-260℃；溶剂延迟时间2.7-2.9min；碰撞气：氩气；通过全扫描模式确定各组分的保留时间和一级碎片离子；通过选择离子监测模式确定各组分的二级碎片离子和相应的碰撞电压。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用仪器的色谱条件如下：所述色谱条件为：InertCap5MS/HP气相色谱柱(30m×0.25μm×0.25mm；Shimadzu，日本)；载气：氦气(纯度≥99.999％)，流速为1.69mL/min；进样口温度为250℃；进样量1.0μL，不分流进样；升温程序：50℃保持1min，以25℃/min的速度升温至125℃，再以10℃/min升温至300℃，保持7min，总运行时间为28.5min；所述质谱条件为：电子轰击电离源(EI源)电压为70eV；离子源温度200℃；接口温度250℃；溶剂延迟时间2.8min；碰撞气：氩气(纯度≥99.999％)；岛津GCSolution工作站；通过全扫描模式(Q3scan)确定各组分的保留时间和一级碎片离子；通过选择离子监测模式(SIM)确定各组分的二级碎片离子和相应的碰撞电压。8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1)供试品溶液的制备；取益心复脉颗粒，加入水使溶解，再加入正己烷，超声提取，随后加入氯化钠和醋酸钠混匀，离心得到上清液，水浴旋蒸至近干，用丙酮复溶，加入无水硫酸镁、硅酸镁吸附剂和C18，离心，得到上清供试品溶液；2)基质匹配标准工作溶液的制备标准储备液的配制：取农药标准品10mg于10mL量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度，配成质量浓度为1.0g/L的标准储备液，储存于4℃冰箱中备用；混合储备溶液：分别精密移取一定体积的各农药标准储备液于10mL量瓶中，用丙酮稀释定容，配制成各农药组分质量浓度均为10.0mg/L的混合储备溶液，于-20℃冰箱中保存；混合标准工作溶液：取适量内标溶液及混合储备溶液，用丙酮稀释定容，得到质量浓度分别为0.005、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.25μg/L的混合标准工作溶液；基质匹配标准工作溶液：按照供试品溶液的步骤提取、净化不含目标化合物的“空白”样品，以净化液作为溶剂，将混合标准工作溶液中的丙酮用...

【专利技术属性】
技术研发人员：佟玲，孟文婷，刘小勤，张永志，李东翔，周水平，
申请(专利权)人：天士力制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12