一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法技术

本发明专利技术公开了一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，包括步骤：将柑橘类水果洗净切块，加入固体碱，匀浆处理；加入乙酸乙酯，涡旋振荡，放置冰箱内冷藏0.5‑1h；再加入氯化钠和碱溶液，涡旋振荡后离心，过色谱柱，取洗脱液；利用液相色谱‑串联质谱对洗脱液进行检测。本发明专利技术的方法回收率高，检测准确度高、重复性好。

A method for the determination of pesticide residues in citrus fruits

The invention discloses a citrus fruit hymexazol pesticide residue detection method, comprising the steps of: citrus fruit is abluent cut, adding solid alkali, homogenized; adding ethyl acetate, vortex oscillation, 0.5 1H placed refrigerated refrigerator; adding sodium chloride and alkali solution, vortex oscillation after centrifugation. A column from the eluent; by liquid chromatography tandem mass spectrometry of eluent were detected. The method of the invention has the advantages of high recovery rate, high detection accuracy and good repeatability.

【技术实现步骤摘要】
一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法
本专利技术涉及农药残留检测领域，具体涉及一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法。
技术介绍
恶霉灵俗称绿亨一号、土菌消、土菌克或绿佳宝，是一种高效广谱杀菌剂，恶霉灵对各种植物真菌的病害防治效果较好，毒性较低，因此在我国应用广泛。目前，随着人们对健康安全关注度的增加，植物中恶霉灵农药残留对人体的毒害作用也逐渐受到关注，有资料显示恶霉灵农药残留不仅会损害人体的肠胃、肾脏器官，而且在人体代谢过程中恶霉灵转变成的亚硝基化合物容易诱发癌症等疾病。据此，需要对植物中，特别是水果蔬菜中的恶霉灵农药残留进行检测，以及早做出防治准备。现有针对柑橘类水果中残留的恶霉灵检测报道较少，且检测中的回收率低，检测方法选择性不好，容易造成假阳性判断，误差较大。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，该方法回收率高，检测准确度高、重复性好。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，包括步骤：（1）将柑橘类水果洗净切块，加入固体碱，匀浆处理；（2）加入乙酸乙酯，涡旋振荡，放置冰箱内冷藏0.5-1h；（3）再加入氯化钠和碱溶液，涡旋振荡后离心，过色谱柱，取洗脱液；（4）利用液相色谱-串联质谱对洗脱液进行检测。本专利技术中所述柑橘类水果指橙、柚、橘和柠檬等柑橘类。优选的，步骤（1）中，固体碱为粉末状的氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾中的一种或多种混合物。优选的，固体碱用量是柑橘类水果质量的0.5-50%，进一步优选的，氢氧化钠或/和氢氧化钾用量是柑橘类水果质量的0.5-10%，更进一步优选的，氢氧化钠或/和氢氧化钾用量是柑橘类水果质量的0.5-5%，碳酸钠或/和碳酸钾用量是柑橘类水果质量的20-50%。优选的，步骤（2）中，涡旋振荡的速率为2000-2500r/min，时间为3-8min。优选的，步骤（2）中，乙酸乙酯用量为：每1g柑橘类水果加入3-5.5ml。优选的，步骤（3）中，按质量计，氯化钠的用量是柑橘类水果用量的1.0-1.2倍，碱溶液的PH为9-12。进一步优选的，氯化钠的用量是柑橘类水果用量的1.0倍，1.1倍，1.2倍，碱溶液的PH为10，10.5，11，11.5，12。优选的，色谱柱填料为硅藻土和活性炭的混合物，按质量比计，活性炭是硅藻土重量的1-10%。进一步优选的，活性炭用量是硅藻土重量的1-5%。色谱柱作为进一步净化目的，填料用量较少，具体可为柑橘类水果重量的1-3倍。优选的，色谱柱所用洗脱液为乙酸乙酯。本专利技术所达到的有益效果：本专利技术检测方法所用溶剂及试剂为常用试剂，毒性低，在匀浆前加入固体碱能将柑橘类水果中的农残充分的提取出来，后续的加入乙酸乙酯和碱溶液等步骤在进一步将水果中农残释放出来后，还进一步将水相中农残向乙酸乙酯中转移，进一步提高恶霉灵的提取率。色谱柱的处理能进一步减少后续测量的干扰，提高检测的准确度。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本专利技术的技术方案，而不能以此来限制本专利技术的保护范围。实施例1一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，包括以下步骤：将5橘子洗净切块，加入粉末状的氢氧化钠0.095g，送匀浆机匀浆处理；然后加入乙酸乙酯20ml，涡旋振荡，旋振荡的速率为2000r/min，时间为4min。随后放置冰箱内冷藏0.5h，冷藏温度-2℃。再加入5g氯化钠和PH为10氢氧化钠溶液12ml，涡旋振荡后离心，本次涡旋振荡参数同上次相同。然后过色谱柱，色谱柱填料选用硅藻土和活性炭的混合物，总用量为12g，其中活性炭用量是硅藻土用量的1.5%。用乙酸乙酯洗脱，取洗脱液备用。利用液相色谱-串联质谱对洗脱液进行检测。取5µL洗脱液进样至超高效液相色谱-质谱联用仪（美国Agilent公司生产的Agilent1290型号高效液相色谱仪和美国ABSCIEX公司生产的AP15500质谱仪连用）中平行测定三次，测定条件参考如下：色谱条件：色谱柱AgilentZORBAX300SB-C8(规格为2.1×100mm，1.8μm)；流动相：A：甲醇，B：水；梯度洗脱程序：0-2min甲醇：水＝4:9，2-4min甲醇：水＝12:1，4-10min甲醇：水＝10:1，10-15min甲醇：水＝7:1，15-30min甲醇：水＝3:7；流速：250μL/min，柱温：40℃。质谱条件：电喷雾离子源，喷雾电压（IS）：2.6V；离子化温度350℃，雾化器流量1000L/Hr；锥孔气流量50L/Hr；碰撞气流量为0.20mL/min，碰撞气氮气，驻留时间110ms。随后配标准溶液，线性回归，计算恶霉灵含量及加标回收率。经检测，本实施例中恶霉灵加标回收率为97.8%，RSD值为2.1%。对比例对比例1：匀浆处理前，加入氢氧化钠碱溶液代替固体碱，碱溶液PH为10，碱用量同实施例1，其余检测步骤同实施例1.检测结果：恶霉灵加标回收率为86.5%，RSD值为1.9%。对比例2：匀浆处理前，加入乙酸乙酯代替固体碱，其余检测步骤同实施例1.检测结果：恶霉灵加标回收率为89.5%，RSD值为2.2%。由对比例1、2和实施例1可知，在匀浆前加入固体碱能将柑橘类水果中的农残充分的提取出来，提高回收率。实施例2一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，包括以下步骤：将5g柠檬洗净切块，加入粉末状的碳酸钾2.25g，送匀浆机匀浆处理；然后加入乙酸乙酯21ml，涡旋振荡，旋振荡的速率为2500r/min，时间为5min。随后放置冰箱内冷藏0.5h，冷藏温度-2℃。再加入5.5g氯化钠和PH为11氢氧化钠溶液12ml，涡旋振荡后离心，本次涡旋振荡参数同上次相同。然后过色谱柱，色谱柱填料选用硅藻土和活性炭的混合物，总用量为12g，其中活性炭用量是硅藻土用量的2%。用乙酸乙酯洗脱，取洗脱液备用。利用液相色谱-串联质谱对洗脱液进行检测。取5µL洗脱液进样至超高效液相色谱-质谱联用仪（美国Agilent公司生产的Agilent1290型号高效液相色谱仪和美国ABSCIEX公司生产的AP15500质谱仪连用）中平行测定三次，测定条件参考参考实施例1，必要时需做不付出创造性的参数调整：计算恶霉灵含量及加标回收率。经检测，本实施例中恶霉灵加标回收率为101.8%，RSD值为3.2%。实施例3将5g柚子洗净切块，加入粉末状的氢氧化钾0.4g，送匀浆机匀浆处理；然后加入乙酸乙酯27ml，涡旋振荡，旋振荡的速率为2000r/min，时间为4min。随后放置冰箱内冷藏0.5h，冷藏温度-2℃。再加入6g氯化钠和PH为10.5氢氧化钠溶液11ml，涡旋振荡后离心，本次涡旋振荡参数同上次相同。然后过色谱柱，色谱柱填料选用硅藻土和活性炭的混合物，总用量为13g，其中活性炭用量是硅藻土用量的1.0%。用乙酸乙酯洗脱，取洗脱液备用。利用液相色谱-串联质谱对洗脱液进行检测。取5µL洗脱液进样至超高效液相色谱-质谱联用仪（美国Agilent公司生产的Agilent1290型号高效液相色谱仪和美国ABSCIEX公司生产的AP15500质谱仪连用）中平行测定三次，测定条件实施例1，必要时需做不付出创造性的参数本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，其特征在于，包括步骤：（1）将柑橘类水果洗净切块，加入固体碱，匀浆处理；（2）加入乙酸乙酯，涡旋振荡，放置冰箱内冷藏0.5‑1h；（3）再加入氯化钠和碱溶液，涡旋振荡后离心，过色谱柱，取洗脱液；（4）利用液相色谱‑串联质谱对洗脱液进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，其特征在于，包括步骤：（1）将柑橘类水果洗净切块，加入固体碱，匀浆处理；（2）加入乙酸乙酯，涡旋振荡，放置冰箱内冷藏0.5-1h；（3）再加入氯化钠和碱溶液，涡旋振荡后离心，过色谱柱，取洗脱液；（4）利用液相色谱-串联质谱对洗脱液进行检测。2.根据权利要求1所述的一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，其特征在于，步骤（1）中，固体碱为粉末状的氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾或碳酸钠中的一种或一种以上的混合物。3.根据权利要求1所述的一种柑橘类水果中恶霉灵农药残留检测方法，其特征在于，步骤（2）中，涡旋振荡的速率为2000-2500r/min，时间为3-8min。4.根据权利要求2所述的一种柑橘类水果中恶霉灵农...

【专利技术属性】
技术研发人员：司文会，方志成，阙小峰，高岳，吴晨奇，余雁，
申请(专利权)人：苏州农业职业技术学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32